增强型绿色荧光蛋白转染猪骨髓间充质干细胞特性观察

目的：借助质粒将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染猪骨髓干细胞（MSC）,观察转染后EGPP在（MSC）内表达情况及MSC生长特性。方法：1月龄小型香猪为MSC供体,EGFP基因转染MSC,计算转染效率,流式细胞仪鉴定G418筛选后EGFP基因稳定表达率和转染后细胞增殖周期改变。结果：转染率为（36．9±3．4）％;G418筛选后EGFP表达率75．6％,EGFP转染MSCG0／G1期MSC比例较对照组明显增加（P〈0．01）,S＋G2／M期MSC比例减少（P〈0．01）。结论：猪MSC经基因转染和G418筛选,获得EGFP稳定表达;转染和G418筛选后MSC增殖能力降低,G0／G1期MSC比例增加,S＋G2／M期MSC比例下降。     

先兆子痫患者外周血、脐血及蜕膜NK细胞的相关研究

目的：对先兆子痫孕妇外周血、脐血及蜕膜NK细胞进行研究，以探讨先兆子痫的病因。方法：对42例先兆子痫患者及20例正常孕妇外周血、脐血NK细胞分离后记数。采用免疫组织化学法检测胎盘蜕膜NK表型后记数并检测其平均灰度。结果：①轻度及重度先兆子痫患者母血及脐血NK细胞数均显著高于正常孕妇（P〈0．05）；②重度先兆子痫患者蜕膜NK细胞数高于正常孕妇（P〈0．05）；③轻度及重度先兆子痫患者胎盘蜕膜NK细胞CD56组化染色平均灰度值高于正常孕妇（P〈0．05）。结论：先兆子痫患者外周血、脐血及蜕膜的NK细胞数量均高于正常孕妇，且呈激活状态的胎盘蜕膜NK细胞较多，可能与发病有关。     

红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗HSV-1 的实验研究

目的 探讨红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）感染的活性,为开 发新型抗病毒药物提供实验基础。方法 以Vero 细胞为病毒感染靶细胞,以不同浓度淡紫拟青霉胞外多糖 作用于HSV-1 感染的各个阶段,以细胞病变程度测定病毒半数感染量,MTT 法检测淡紫拟青霉胞外多糖对 Vero 细胞的毒性作用、对HSV-1 的直接灭活作用、对病毒吸附和生物合成的影响。结果 淡紫拟青霉胞 外多糖对Vero 细胞的半数有毒浓度（CC50）为1 724.2μg/ml,该多糖浓度<900μg/ml 时,细胞存活率仍> 90%,且对细胞无增殖作用;在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,该多糖可在一定程度上抑制病毒吸附,并表 现出一定的量效关系,半数抑制浓度（IC50）为650.7μg/ml ;该多糖还具有抑制HSV-1 生物合成的作用, 其IC50 为547.7μg/ml,在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,抑制率与药物浓度呈量效关系,未发现该多糖对 HSV-1 有直接灭活作用。结论 淡紫拟青霉胞外多糖对Vero 细胞毒性较小,是一种非常安全的多糖;该多 糖具有一定的抗病毒作用,在一定浓度范围内可抑制HSV-1 吸附和生物合成,且表现出一定的量效关系。     

血小板衍生生长因子和表皮生长因子对多囊卵巢综合征患者颗粒细胞雌二醇生成的影响

目的：探讨血小板衍生生长因子（PDGF）和表皮生长因子（EGF）对多囊卵巢综合征（PCOS）患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇（E2）生成的影响。方法：收集体外受精-胚胎移植（IVF-ET）时PCOS患者的卵巢黄素化颗粒细胞进行体外原代培养,在培养0、48、120h时以睾酮（10-7mol/L）作为底物,分别添加PDGF（10μg/L）和（或）EGF（10cg/L）于无血清培养液中,培养3h,收集培养上清,用放射免疫法测定E2含量。以不加任何细胞因子为空白对照。结果：与空白对照比较,PCOS患者颗粒细胞经PDGF刺激,E2分泌量增加（P〈0.05）;经EGF刺激,E2分泌量减少（P〈0.05）。PDGF和EGF联合作用0h、48h,E2分泌量减少;120h时,E2分泌量与空白对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：PDGF增加PCOS患者颗粒细胞E2的分泌,EGF减少E2的分泌。     

人白细胞抗原TAP等位基因多态性与先兆子痫的关联性研究

先兆子痫是产科常见的严重并发症，严重危及母婴安全。随着先兆子痫免疫学改变发现的逐渐增多，对其免疫功能相关基因的研究将有助于病因的最终阐明。迄今，人白细胞抗原（HLA）的抗原处理相关转运蛋白（transporter associated with antigen processing，TAP）与先兆子痫相关性的研究国内外均未见报道。     

新生儿高胆红素血症心肌肌钙蛋白T的变化

目的:探讨新生儿高胆红素血症时心肌肌钙蛋白T(cTnT)的变化及其临床意义。方法:采用化学免疫系统和全自动生化分析仪,对38例高胆红素血症患儿血清cTnT及IBIL进行检测,同时选20例生理性黄疸新生儿作为对照。结果:各组新生儿血清中cTnT水平:重度高胆红素血症组显著高于轻度组(P<0·01)和对照组(P<0·01),轻度组与对照组无显著性差异(P>0·05)。结论:新生儿高胆红素血症可以引起心肌的损害,血清cTnT水平升高程度与IBIL成正相关。cTnT的检测可以为临床治疗提供实验依据。     

NK细胞在重度子痫前期发病中的作用

目的：探讨NK细胞在重度子痫前期发病中的作用及其机制。 方法： 采集重度子痫前期晚孕、正常晚孕孕妇外周血及其新生儿脐血，Percoll分离NK细胞，SAP法计数，MTT法检测其增殖活性，［51Cr］释放法检测其杀伤活性，免疫组织化学法检测胎盘蜕膜组织NK细胞数量及HLA-G蛋白表达水平。 结果： ①重度子痫前期患者外周血、蜕膜组织及其新生儿脐血中NK细胞数量均显著高于正常晚孕组（P<0.05）；②重度子痫前期患者外周血及其新生儿脐血NK细胞增殖和杀伤活性均高于正常晚孕组（P<0.05）；③重度子痫前期患者胎盘蜕膜HLA-G蛋白表达水平显著低于正常晚孕组（P<0.05）。 结论： 重度子痫前期患者NK细胞功能异常增强，可能参与疾病发生。     

新生儿窒息后血清肌酸激酶的变化结果分析

肌酸激酶是诊断急性心肌梗死(AMI)重要酶学指标之一,灵敏度高,特异性也较强,为了探讨新生儿窒息后心肌细胞的损伤程度,对我院2001年新生儿重症监护病房78例窒息新生儿进行血清CK水平监测,采用酶偶联测定方法,结果发现窒息组新生儿血清CK水平明显高于正常对照组(P<0.001),重度窒息组高于轻度窒息组(P<0.01),经有效治疗二周后,各组新生儿CK水平趋向一致。     

PDGF与卵巢的相关研究

卵巢是女性内分泌器官，具有分泌甾体激素．促进卵子成熟的功能，近年来，越来越多的证据表明，卵巢局部产生的细胞因子参与卵巢功能调节。血小板衍生生长因子(platele-delived growth factor，PDGF)作为强有力的有丝分裂原．以自分泌、旁分泌方式在卵巢局部发挥重要作用。现就PDGF与卵巢相关的研究作一综述。     

人工模拟胰腺微环境诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛素产生细胞

目的:探讨人工模拟胰腺微环境诱导下骨髓间充质干细胞是否可以转分化为胰岛素产生细胞,并评价其功能.方法:采集兔骨髓间充质干细胞,分为2组.实验组将胰腺碎片整合到镍包被的微载体中,重建胰腺微环境,进行细胞培养,对照组为同期培养的未经诱导的细胞.骨髓间充质干细胞在微环境中培养3～4周后,观察是否有胰岛样细胞团形成.ELISA法检测细胞悬液中胰岛素含量,荧光免疫组化检测细胞团胰岛素和C-肽蛋白的表达,荧光原位杂交(FISH)检测胰岛素和C-肽mRNA的表达,流式细胞仪检测分化的细胞在高糖环境下继续培养3周是否发生凋亡.结果:培养3～4周后倒置显微镜下观察到胰岛样细胞团.实验组基础相胰岛素分泌量为(308.50±14.54)mIU/L,在高糖刺激下为(414.30±28.94)mIU/L,2者相比,差异有统计学意义(t=5.68,P＜0.01);高糖刺激下实验组的胰岛素分泌量高于对照组的(5.21±1.04)mIU/L(t=34.60,P＜0.01).分化的胰岛样细胞团表达C-肽和胰岛素mRNA与蛋白.分化的细胞在高糖环境下继续培养3周未发生凋亡.结论:人工模拟胰腺微环境可以诱导骨髓间充质干细胞转分化为有功能的胰岛素产生细胞,有望替代胰岛细胞治疗糖尿病.