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自发性蛛网膜下腔出血(SAH)主要为脑动脉瘤所致,近年来发病率有逐渐上升的趋势。SAH继发癫发作并不少见,部分病例以癫首发或是早期的主要临床表现,文献报道的SAH继发癫发作的发病率波动在9%~20%之间[1]。SAH后癫可加重病情,对患者预后造成严重影响,导致患者病死率、致残率升高。丙戊酸钠逐渐成为目前临床应用广泛的一线广谱抗癫药,丙戊酸钠作为预防性抗癫 相似文献
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不同保存时间人羊膜来源的间充质干细胞增殖能力比较 总被引:1,自引:1,他引:1
背景:以往利用羊膜提取间充质干细胞的研究多将注意力放在新鲜的羊膜标本上,由于地域和时间的限制,对羊膜进行保存是必须面对的实际问题.目的:实验拟比较从不同保存时间人羊膜标本中分离培养的羊膜间充质干细胞的增殖能力.设计、时间及地点:体外进行的细胞对照观察,于2007~01/2008-02在郑州大学医学院和生物工程系完成.材料:正常剖宫产的健康产妇志愿捐献的羊膜12份,孕38周,检测乙肝5项、HCV、HIV、梅毒等其他相关传染性指标均呈阴性.方法:无菌条件下将每份新鲜完整的羊膜平均分成3组,即新鲜1 h组、4℃放置24~36 h组、4℃放置48~60 h组.将3组标本剪碎,胰蛋白酶,胶原酶联合消化,过滤后收集单细胞悬液,以2×108 L-1密度接种,加入含胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12培养基,贴壁法纯化扩增细胞.主要观察指标:倒置昆微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线.取第3代细胞进行免疫组织化学检测和流式细胞仪鉴定.结果:①3组标本消化后都含有多种单个细胞成分,呈圆形、菱形、短梭形、多角形,细胞折光性良好,此外还有多个上皮细胞聚集所成的细胞团.接种后1~3 d各组细胞均为潜伏期;4~7 d新鲜1 h组与4℃放置24~36 h组进入对数生长期,细胞增殖活跃,细胞数目旱指数级递增,4℃放置48~60 h组仍处于潜伏期;7 d后前两组细胞已铺满瓶底,4℃放置48~60 h组刚开始指数级递增.②各组细胞神经元烯醇化酶、神经丝蛋白、巢蛋白均呈阳性表达,胶质纤维酸性蛋白呈阴性.各组细胞CD29,CD44均呈阳性表达.结论:保存时间在60h内的人羊膜都可以分离出具有增殖能力的间充质干细胞,但36h内的羊膜标本所分离的间充质干细胞具有较快的增殖能力. 相似文献
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目的:量子点是由Ⅱ-Ⅵ 族元素或Ⅲ-V族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜。实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤的效果。
方法:实验于2007-01/10在郑州大学完成。①材料:SPF级健康成年Wistar大鼠40只,按体质量编号分为4组:神经生长因子细胞组、常规细胞组、损伤模型组、培养基对照组,10只/组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。羊膜间充质干细胞来自健康产妇胎盘羊膜,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准。量子点神经生长因子纳米粒由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室协助构建。②实验方法:向羊膜间充质干细胞中加入含10%胎牛血清、20 μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%~90%融合时胰酶消化传代。取传至第3代细胞,分别加入终浓度为20,40,60 μg/L的量子点标记神经生长因子纳米粒进行修饰处理72 h,并设立空白对照和空载量子点对照。4组大鼠均采用Feeney自由落体法建立脑损伤模型,神经生长因子细胞组于大鼠损伤部位注入经40 mg/L量子点标记神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞悬液10 μL(约4.0×108个细胞),常规细胞组注入等量单纯量子点标记的羊膜间充质干细胞悬液,培养基对照组注入等量DMEM/F12细胞培养基,损伤模型组不给予移植操作。③实验评估:经量子点标记的神经生长因子纳米粒修饰后,MTT法检测细胞活性,荧光显微镜观察量子点在细胞内的分布,免疫细胞化学鉴定细胞分化。细胞移植后对各组大鼠运动及感觉功能进行评分,免疫组织化学染色及荧光显微镜观察量子点荧光化羊膜间充质干细胞在脑内存活分化和迁移情况。
结果:①细胞生长率:培养72 h后与空白对照和空载量子点对照细胞比较,20,40,60 μg/L量子点标记的神经生长因子纳米粒组细胞生长率均呈增长趋势,40 μg/L时细胞无明显生长抑制,达60 μg/L时增长有所减慢。②体外量子点分布:荧光显微镜连续观察羊膜间充质干细胞,约6 h后开始摄入量子点标记的神经生长因子纳米粒,随着时间延长摄入量逐渐增加,于32 h荧光强度达高峰。③体外免疫细胞化学鉴定:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞表达神经元烯醇化酶和神经丝蛋白,向神经元方向分化,但不表达胶质纤维酸性蛋白。④神经行为学检测结果:细胞移植后24 h,各组神经行为学各项指标评分均基本相似(P > 0.05);移植后10,20 d,损伤模型组与培养基对照组无明显变化,神经生长因子细胞组、常规细胞组运动及感觉功能各项评分均显著降低(P < 0.05),且神经生长因子细胞组下降幅度明显强于常规细胞组(P < 0.05)。⑤免疫组织化学和荧光检测结果:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞在脑组织损伤区存活,并向周围迁移。
结论:量子点是一种较好的细胞示踪剂,负载其标记的神经生长因子纳米化颗粒的羊膜间充质干细胞移植能够改善脑损伤大鼠神经功能。 相似文献
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目的:研究USP9X/β-catenin 在高级别胶质瘤中的表达,分析USP9X/β-catenin的表达与患者临床病理特征和生存期之间的关系。方法连续收集病理科存档的高级别胶质瘤组织标本( WHO Ⅲ~Ⅳ级),随访日期截止于2015年1月。免疫组化检测高级别胶质瘤组织USP9X/β-catenin蛋白的表达,分析USP9X在不同性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分级的患者中的表达情况。单因素和多因素生存分析影响患者预后的各种预后因子。结果54例高级别胶质瘤患者中,USP9X阳性患者26例,阳性表达率48.1%。β-catenin 阳性患者25例,阳性表达率46.3%。不同年龄(P=0.777)、性别(P=0.783)、分化程度(P=0.793)、肿瘤大小(P=0.155)的胶质瘤患者中USP9表达率差异无统计学意义。但生存期小于1年的高级别胶质瘤患者中USP9X 的表达明显高于生存期大于1年的患者。 Kaplan -Meier 单因素生存分析提示USP9X 表达状况( P=0.001)、术后放射治疗( P=0.033)、肿瘤大小( P=0.049)是影响高级别胶质瘤患者预后的因素。 COX风险模型多因素分析提示USP9X表达状况是影响高级别胶质瘤患者预后的独立因子。结论去泛素化酶USP9X 在高级别胶质瘤中的表达与患者年龄、性别、肿瘤分级、肿瘤大小无关,与患者生存期的长短呈负相关。 USP9 X表达较弱、术后接受放射治疗、肿瘤较小的高级别胶质瘤患者的生存期较长。在所有与高级别胶质瘤患者预后相关的因素中,去泛素化酶USP9 X 的表达状况是影响高级别胶质瘤患者预后的独立因子。 相似文献
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目的:研究微电极在立体定向功能核团毁损治疗帕金森病(PD )的应用,并探讨其临床价值。方法回顾性分析该院84例未使用微电极引导立体定向功能核团毁损术治疗的PD患者(对照组)和74例使用微电极引导下立体定向功能核团毁损术治疗的PD患者(观察组)的临床病例资料。同时分别获得观察组及对照组核团毁损术前、术后不同服药状态下PD综合评分量表(UPDRS)评分,进而比较观察组及对照组功能核团毁损手术前后UPDRS运动评分的差异。结果观察组在术后3、6个月及1年的随访中UPDRS 运动评分较术前显著改善(P<0.05),同时患者术后抗帕金森病药物用量较术前减少(P<0.05)。其中对照组显效70例(83.3%),有效14例(16.7%),总有效率100%;观察组显效62例(83.7%),有效12例(16.3%),总有效率100%。两种治疗方法在改善患者核团毁损手术前后的UPDRS 运动评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论立体定向功能核团毁损治疗PD疗效满意,微电极记录是否可显著提高手术的准确性有待进一步商榷。 相似文献
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目的:探讨扶他林乳胶剂外用联合中成药内服治疗退行性膝关节炎的临床疗效。方法:将120例退行性膝关节炎患者使用扶他林乳胶剂外用联合骨筋丸内服治疗,并与120例布洛芬口服联合骨筋丸内服治疗作对照,观察其治疗效果,并进行疗效评定。结果:治疗组有效率92.50%;对照组91.67%;药物不良反应:治疗组3例(2.50%),对照组10例(8.33%)。结论:扶他林乳胶剂外用联合骨筋丸内服治疗退行。性膝关节病疗效肯定,且不良反应小,值得临床推广。 相似文献