联合转染p21基因及反义c-fos核酸对移植静脉血管平滑肌细胞增殖的影响

①目的观察联合转染p^21基因及反义c—fos核酸对自体静脉移植后移植血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响，探讨预防移植血管再狭窄的基因疗法。②方法选择20只新西兰家兔，随机分为实验组和对照组，每组各10只。用显微外科技术建立自体颈静脉一颈总动脉移植模型；实验组移植静脉进行p^21基因和反义c-fos核酸转染，而对照组未进行转染。术后2周取出移植血管，用电子显微镜及计算机图像分析仪观察血管中段内膜厚度、管腔狭窄度、平滑肌细胞增殖指数，用免疫组织化学方法对移植血管c—fos、c—myc、移植血管VSMC的增殖细胞核抗原（PCNA）阳性表达进行检测。③结果实验组血管中段内膜厚度、管腔狭窄度、平滑肌细胞增殖指数及c-fos、c—myc、PCNA阳性表达率均明显低于对照组（t=8．19～25．19，t′=6．14、7．36，P〈0．01）。④结论移植静脉联合转染p^21基因及c-fos反义核苷酸可有效地抑制移植血管VSMC增殖。     

联合转染p21基因和反义c-fos核酸对兔自体移植静脉内膜增生的影响

目的：探讨联合转染p21基因和反义c-fos核酸对兔自体移植静脉内膜增生的影响，探索一种理想的血管再狭窄的疗法。方法：选择20只新西兰家兔，实验组、对照组各10只，均行自体颈外静脉、颈总动脉移植手术，实验组行腺病毒介导的p21 cDNA溶液浸泡和反义c-fos寡聚核苷酸凝胶涂布；对照组仅行空载腺病毒溶液浸泡和凝胶涂布。术后2周取出移植血管，分别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度（IT）、内膜平滑肌细胞（VSMC）数及PCNA阳性表达情况。结果：实验组移植血管IT、管腔狭窄度及VSMC数均较对照组减少，增殖细胞核抗原（PCNA）阳性表达情况亦较对照组明显减少。结论：联合转染p21基因和反义c-fos核酸可有效地抑制移植静脉内膜的增生。     

亚细胞的Ca^2＋动力学

阐述了内质网、线粒体、细胞核及其他亚细胞区域的Ca^2 浓度在细胞静息及活化状态下的变化及其可能的机制。     

蛋白激酶及蛋白磷酸酯酶活性改变对阿尔茨海默病样神经原纤维变性的影响

目的了解蛋白激酶与蛋白磷酸酯酶活性改变对阿尔茨海默病(AD)样神经原纤维变性的影响。方法选择SD大鼠24只,随机分为实验组和对照组,各12只。实验组采用脑立体定位注射技术,向海马区注射20 mmol/L缓激肽(BK)和4.2 mmol/L环孢菌素A(CSA)各0.2 mL,对照组注射人工脑脊液0.4 mL,电跳台法测试大鼠学习与记忆状况;免疫印迹法检测Tau蛋白质磷酸化状况。结果实验组鼠出现错误次数多于对照组(t=3.362,P<0.01),受电击时间长于对照组(t=4.537,P<0.01)。实验组海马区12E8显色强于对照组,Tau-1显色弱于对照组。结论BK和CSA可诱发Tau蛋白多个位点出现AD样异常磷酸化,导致动物学习记忆障碍。     

腹腔与侧脑室注射八肽胆囊收缩素对大鼠中枢催产素含量的影响

采用放射免疫测定法比较腹腔注射和侧脑室注射八肽胆囊收缩素(CCK-8)后中枢各脑区及脊髓内催产素含量的变化.结果表明,腹腔注射CCK-8可使垂体、下丘脑、桥脑及脊髓内催产素含量明显增加(P<0.05,P<0.01);侧脑室注射CCK-8后,仅垂体内催产素含量增加(10min后P<0.05,20min后P<0.01),其他脑区及脊髓内催产素(OXT)含量未见有统计学意义的变化(P>0.05).提示CCK-8对中枢脑区及脊髓内OXT含量增加的影响以外周性传入机制为主.     

CNTF对大鼠脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用

目的：研究睫状神经营养因子（CNTF）对脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用。方法：将大鼠分为假手术组，生理盐水（NS）组和CNTF组，用Allen改良法撞击致SD大鼠脊髓T10损伤，经蛛网膜下腔留置导管注射NS和CNTF；术后每周进行一次BBB评分和斜板试验的行为学评分；6周时采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪技术标记红核神经元，取红部位脑组织作冰冻切片，应用四甲基联苯胺（TMB）呈色反应显示脊髓损伤后红核神经元存活率，并进行图像数据的分析。结果：（1）CNTF组行为功能高于NS组；（2）CNTF组HRP标记红核神经元数目多于对照组。结论：CNTF可减轻脊髓损伤后的逆行性损伤，而对上行运行神经元发挥保护作用，从而对肢体功能的恢复起到促进作用。     

联合转染p21基因及反义C-Fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响

①目的　探讨联合转染p2 1基因及反义C Fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响 ,探索一种理想的预防血管再狭窄的基因疗法。②方法　选用 2 0只新西兰家兔 ,实验组 10只 ,对照组 10只 ,均行自体颈静脉、颈总动脉移植手术 ,实验组行腺病毒介导的p2 1cDNA溶液浸泡和反义C Fos寡聚核酸凝胶涂布 ;对照组仅行空载腺病毒溶液浸泡和凝胶涂布。术后 2周取出移植血管 ,分别检测移植血管内膜厚度、内膜平滑肌细胞数 (VSMC)及内膜平滑肌细胞增殖细胞抗原 (PCNA)阳性表达情况。③结果　实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、VSMC数及PCNA阳性表达情况较对照组均有明显差异 (t=2 8.30～ 38.5 2 ,P <0 .0 1)。④结论　联合转染p2 1基因及反义C Fos核酸可有效地抑制移植静脉内膜的增生 ,是一种有效防治移植静脉再狭窄的基因疗法。     

盐藻β-胡萝卜素对实验性动脉粥样硬化的作用

①目的　观察盐藻 β 胡萝卜素 (β C )对实验性动脉粥样硬化的作用 ,并探讨其可能的作用机制。 ②方法　选用健康雄性鹌鹑 12 0只 ,随机分为 6组 ,每组 2 0只 ,分别用灌胃法连续 8周喂以普通饲料 +花生油 (普饲对照组 )、高脂饲料 +花生油 (高饲对照组 )、高脂饲料 +β C 6 .2 5、12 .5 0、2 5 .0 0、5 0 .0 0mg/kg(A、B、C、D组 )。从第9周开始各组换以普通饲料继续喂养至 11周。分别于实验第 8、11周末检测各组血清总胆固醇 (TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、极低密度脂蛋白胆固醇 (VLDL C) ,并计算HDL C/TC比值。同时 ,测定动脉壁TC、游离胆固醇 (FC)、胆固醇酯 (CE)含量。③结果　实验第 8周末 ,B、C组动脉壁TC、CE含量较高饲对照组低 ,差异有显著性 (F =5 .36、15 .89,q =3.94～ 5 .38,P <0 .0 5 )。第 11周末 ,B、C、D组血清TC、LDL C、VLDL C及动脉壁TC、CE含量低于高饲对照组 ,HDL C/TC比值高于高饲对照组 ,差异均有显著性 (F =5 .6 7～ 37.2 7,q =2 .17～ 5 .13,P <0 .0 5 )。 ④结论　β C可通过调节脂肪代谢 ,降低过氧化脂质 ,减少胆固醇特别是CE在动脉壁的沉积而阻抑动脉粥样硬化的形成和发展。     

急性心肌梗塞病人细胞粘附分子与补体激活成分的动态变化

目的:探讨急性心肌梗塞(AMI)病人血浆细胞粘附分子和补体活化成分的变化。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测了67例AMI病人发病第1、4、7d时和38例健康人,42例陈旧性心肌梗塞(OMI)病人白细胞CD18表达、血浆可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、可溶性血管细胞间粘附分子-1(sVCAM-1)和血浆补体活化片段(sC5b-9)浓度的变化。结果:AMI病人白细胞CD18表达、sICAM-1、sVCAM-1和sC5b-9浓度非常显著高于对照组和OMI病人(P＜0.01)。发病第1-7d,白细胞CD18表达、sICAM-1、sVCAM-1和sC5b-9浓度逐渐降低。死亡者和伴有室性心律失常者各指标增高较存活者和无室性心律失常者更明显(P＜0.01)。AMI病人白细胞CD18表达、sICAM-1、sVCAM-1浓度与sC5b-9浓度呈正相关(r=0.648,0.652,0.668,0.698,0.914,0.725,0.737,0.752,0.792,P＜0.01),白细胞CD18表达与sICAM-1、sVCAM-1浓度呈正相关(r=0.662,0.683,0.695,0.738,0.744,0.745,P＜0.01)。结论:细胞粘附分子和补体激活成分的相互作用参与了AMI的发生和发展,且与病情严重程度和预后有密切关系。     

高压氧暴露对体外培养神经元的存活率和形态的影响及血小板源性生长因子-BB和阿魏酸钠的保护作用

为了研究高压氧 (hyperbaric oxygen,HBO)暴露对体外培养的大鼠神经元生长的影响以及血小板源性生长因子 -BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)和阿魏酸钠的保护作用 ,本研究采用原代培养大鼠大脑皮层和海马神经元 ,在5 0 0 k Pa高压氧中暴露 3 0 m in和 60 min,MTT法检测神经元的存活率 ,并观察神经元的形态变化。此外 ,用形态学观察结合图像分析研究 PDGF-BB的促神经元生长作用。结果显示高压氧暴露后 ,神经元存活率明显下降 ,且随暴露时间延长 ,存活率下降越显著 ,神经元形态也出现明显的损伤性改变。预先给予 PDGF-BB可促进神经元胞体和突起的生长 ,使存活率明显提高 ,阿魏酸钠则没有显著影响。上述结果表明过度高压氧暴露能损伤神经细胞 ,降低神经元的存活率 ,PDGF-BB可促进神经元的生长 ,起神经保护作用 ,从而提高存活率。