Erk/Akt信号分子介导血清饥饿诱导的前列腺癌DU145细胞增殖

目的 癌症晚期阶段,随着肿瘤体积增大,肿瘤灶内的细胞面临着低氧、营养匮乏的生存环境.近年来研究表明,癌细胞在这种环境条件下仍具有一定的增殖能力.本研究旨在探讨血清饥饿对前列腺癌(prostate cancer,PCa)DU145细胞增殖的影响及其相关信号分子的调控机制.方法 无血清培养基干预DU145细胞,分别用MTT、细胞计数实验观察血清饥饿对细胞活力和细胞增殖的影响;蛋白质印迹法测定干预前后细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,Akt)的蛋白表达及磷酸化水平变化.结果 血清饥饿72h,细胞活力(t=8.233,P=0.001)和细胞增殖能力(t=12.291,P=0.000 3)显著降低.血清饥饿48 h的细胞数目为0.792±0.063,较血清饥饿24 h的0.591±0.070增多,t=3.686,P=0.021.随着血清饥饿时间的延长,细胞增殖受到影响.蛋白质印迹法结果表明,血清饥饿能明显促进Erk (P=0.007)和Akt(P-0.001)磷酸化,却对Erk和Akt总蛋白的表达没有显著影响.Erk通路抑制剂U0126显著抑制了血清饥饿环境下Erk的磷酸化(P＜0.001),同时抑制了细胞的增殖能力,t=8.544,P=0.001;Akt通路抑制剂LY294002显著抑制血清饥饿环境下Akt磷酸化(P=0.003)的同时抑制了细胞的增殖能力,t=10.472,P＜0.001.结论 在血清饥饿条件下,DU145细胞可以通过激活Erk和Akt信号通路来保持一定的增殖能力,这可能是其在血清饥饿环境下做出的适应性反应.     

甲状腺癌HER—2／neu癌蛋白和mRNA表达的研究

「目的」观察人类甲状腺癌中ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌蛋白和ｍＲＮＡ的表达及其关系。「方法」应用免疫组化和同位素点杂交技术对新鲜冰冻甲状腺组织ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌蛋白和ｍＲＮＡ的表达进行研究。「结果」２１例甲状腺乳头状癌中１４例ＨＥＲ－２ｅｎｕ癌蛋白表达阳性,而其他类型肿瘤和非肿瘤组织均未见ＨＥＲ－２／ｎｅｕ ｍＲＮＡ表达研究显示,乳头状癌和淋巴结转移灶中,ｍＲＮＡ的表达水平明显高于其他肿瘤和非肿瘤组织。本研究还证明石蜡包埋的乳头状癌标本中ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌蛋白表达率明显低于新鲜标本。「结论」ＨＥＲ－２／ｎｅｕ蛋白的表达是甲状腺乳头状癌的一个特征性改变,ＨＥＲ－２ｎｅｕ蛋白的表达与ｍＲＮＡ的表达相一致,ＨＥＲ－２ｎｅｕ蛋白检测的稳定性取决于组织标本的质量。     

骨髓的巨大瘤细胞及其意义

我们在７例患的骨髓中发现了巨大瘤细胞及其变种,按不同的形态人为地将其分为５种,以瑞氏染色、组化染色、免疫组化染色、流式细胞仪检查、电镜观察及病理学观察均说明这些细胞类似淋巴样－单核细胞样－巨噬细胞样细胞,在骨髓增生亢进和明显病态造血现象。２例按病理观察诊断为恶性淋巴瘤。所有病例无淋巴结、肝－脾肿大或任何局部瘤块。关于预后,２例患分别于病程８个月和１７个月死亡,１例在病程１０个月时病情危重,其余     

LINC01426通过EZH2调节非小细胞肺癌顺铂耐药的机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01426对非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂(DDP)耐药的影响,并研究其潜在机制。方法:体外培养A549细胞和抗DDP细胞株A549/DDP,逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中LINC01426、zeste增强子同源物2(EZH2)mRNA表达;LINC01426和EZH2之间的相互作用通过RNA-蛋白质相互作用预测(RIP-seq)、RNA免疫沉淀(RIP)、RT-qPCR和染色质免疫沉淀(ChIP)测定进行验证。将A549/DDP细胞分为对照组(Control组)、si-NC组、si-LINC01426组、si-LINC01426+pc-NC组、si-LINC01426+pc-EZH2组,转染培养48 h,用RT-qPCR检测各组细胞中LINC01426、EZH2 mRNA、PTEN mRNA表达,CCK-8检测细胞对DDP的敏感性,集落形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western blot)分析细胞中EZH2、PTEN、AKT、p-AKT蛋白表达。裸鼠移植瘤模型验证LINC01426是否...     

甲状腺乳头状癌组织常染色体和性染色体STR基因座变异分析

目的：探讨甲状腺乳头状癌组织中短串联重复序列（STR）基因座变异规律以及显微切割技术在肿瘤组织鉴定中的应用,为甲状腺乳头状癌组织的个体识别及亲缘关系鉴定提供依据。方法：收集43例人甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织经激光显微切割获取肿瘤细胞和间质细胞,采用Chelex-100法提取DNA,分别采用Goldeneye^® DNA 22NC、Goldeneye^® DNA 27YB和Goldeneye^® DNA 17X试剂盒进行常染色体和性染色体STR基因座PCR扩增,ABI 3500遗传分析仪检测进行STR分型。结果：甲状腺乳头状癌组织肿瘤间质细胞与对应癌旁组织的STR分型一致。43例癌组织的肿瘤细胞有9例STR基因座发生了变异,在常染色体和X染色体联合检测的37个STR基因座共检出11次变异（常染色体变异7次,X染色体变异4次）,其中等位基因增加3次,部分杂合性丢失6次,出现新等位基因2次,并且同一甲状腺乳头状癌肿瘤细胞可同时发生多种变异。Y染色体STR基因座没有检出变异。结合实验结果与患者临床资料分析,STR基因座的变异与甲状腺乳头状癌患者的临床分期、性别无明显相关关系,与患者的年龄正相关,差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论：甲状腺恶性肿瘤组织常染色体和X染色体STR基因座存在变异,而且变异更可能发生在年龄大的甲状腺乳头状癌组织中,在司法鉴定中进行STR分型时应谨慎判型。显微切割技术可准确分离间质细胞,是解决此类恶性肿瘤组织检材涉及的案件进行身源鉴定的有效手段。     

生物反馈联合电刺激治疗中老年女性压力性尿失禁的疗效观察

目的评价生物反馈联合电刺激治疗中老年女性压力性尿失禁的效果。方法采用便利抽样法选取2015年9月1日到2017年12月31日在复旦大学附属上海市第五人民医院就诊的168例中老年女性压力性尿失禁患者分成两组。观察组84例给予生物反馈联合电刺激锻炼盆底肌,每周2次,每次30min;对照组84例给予单纯Kegel锻炼盆底肌。比较两组患者治疗前及治疗后4周、8周的排尿相关指标:3d漏尿次数、1h尿垫试验漏尿量、尿失禁问卷简表(ICI-Q-SF)、盆底肌肉功能Glazer评估测试,评价两种方法对于盆底肌肉功能训练的效果。结果观察组治疗后4周及8周的排尿相关指标同对照组相比,尿失禁问卷简表(ICI-Q-SF)得分(5.8±2.4 vs.7.9±2.7,P0.01;7.2±2.9 vs.8.9±3.1,P0.01)、1h尿垫试验漏尿量[(4.87±1.92)g vs.(7.79±2.08)g,P0.05;(6.42±0.86)g vs.(9.43±0.94)g,P0.05)]和3d漏尿次数[(2.48±2.35)次vs.(4.86±2.17)次,P0.05;(3.15±1.26)次vs.(5.55±1.63)次,P0.05]等结果均优于对照组,差异有统计学意义。结论盆底生物反馈联合电刺激治疗中老年女性压力性尿失禁优于单纯Kegel锻炼方法,值得临床推广。     

半夏泻心汤及其类方不同配伍对正常大鼠胃液成分的影响

目的为类方的配伍研究提供可参考的试验设计方法.方法用均匀设计法对半夏泻心汤及其类方进行组方药量变化研究,以胃液分析为药理学指标,对所得的药理实验数据进行逐步回归分析.结果在半夏泻心汤、甘草泻心汤方中,各药味对胃液成分的影响其变化趋势类似,但影响程度不尽相同,生姜泻心汤与其他两方出入较大.不同药味之间存在交互作用.结论本方法对类方配伍研究有一定参考价值.     

非线性思维和系统论：中医科研的新钥匙

现代中医学的研究与发展,在理论和方法上缺乏理性认识,文献研究薄弱,忽略整体与宏观,用西医理论规范中医,生搬硬套西医还原论研究中医。笔者认为,中医的科学研究,并不是把中医纳入西医的轨道,而是用客观的知识和理性的方法来改造中医,开发符合现代价值的医学模式。因此,文献研究应充分运用理论思维、非线性思维和系统论,以临床研究为重点,充分利用现代数据挖掘软件,以突破原有的方法论,寻找新的方法,建立新的研究体系,中医药的科学研究才可能有实质性的进展。     

手术配合口服中药治疗完全性直肠脱垂12例的临床效果观察

目的:探究分析手术配合口服中药治疗完全性直肠脱垂的临床效果。方法:选取2015年1月—2016年2月于我院住院治疗的完全性直肠脱垂患者12例为研究对象,采用三联手术结合我院自制口服中药对完全性直肠脱垂患者进行治疗,随访1年,观察12例患者的治疗效果。结果:经过手术配合口服中药治疗1年后,12例患者均1次性治愈,且均无一例患者出现复发和并发症的情况,患者的肛门功能恢复良好,没有排便失禁或是直肠狭小的后遗症,治愈率达100%,患者满意度为100%,且治疗后的临床气虚和排便情况评分明显优于治疗前,差异显著(P<0.05)。结论:手术配合口服中药治疗完全性直肠脱垂12例患者的治疗效果可靠,有效提高治愈率和患者满意度,效果显著,值得临床推广实践。