VEGF基因多态性与子宫内膜异位症的相关性研究

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)+936C/T基因多态性与子宫内膜异位症的关系。方法:运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment lengthpolymorphism,PCR-RFLP)技术检测健康对照者和子宫内膜异位症(简称内异症)组基因型,比较各组的基因型和等位基因频率。结果:(1)内异症组CC基因型及C等位基因频率显著高于正常对照组;(2)CC基因型者血清VEGF水平高于TT型者。结论:VEGF+936C/T基因多态性可能与子宫内膜异位症的发生发展有关,C等位基因可能是子宫内膜异位症的易感基因。     

针刺治疗糖尿病性周围神经病变临床研究

将７８例糖尿病性周围神经病变患者随机分为针刺治疗组和药物对照组,针刺组以益气养阴,活血通络为治则进行临床研究。结果显示,针刺组治疗前后疗效差异有显著性间意义,与对照组比较差异有显著性意义。两组患者血液流变学检查和肌电图检查治疗前差异不明显,针刺治疗后差异有显著性意义。     

HCV-RNA实时荧光定量的临床价值

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)检测丙型肝炎病毒(HCV-RNA)在临床中的应用价值。方法用RFQ-RT-PCR检测325例肝炎病人标本,并同时采用ELISA检测抗-HCV,了解样本中HCV-RNA含量与抗-HCV的相关性。结果325份标本中有15例HCV-RNA含量高于1000拷贝/ml,18例抗-HCV阳性。经统计分析,两者有明显的相关性。结论RFQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的应用价值。     

视网膜色素变性视紫红质部分基因序列检测

建立了重盐、异丙醇提取视紫红质 ( RHO)基因 DNA序列检测方法。结果显示正常人 RHO第 5外显子基因所选 2 77碱基排列与 Nathans- Hogness报道的基因密码一致。RHO基因直接提取法不能用于序列测定。该法与酚提取法相比 ,时间缩短数个小时 ,成本降低 50 %     

HCV-RNA荧光定量标准品制备的研究

目的 介绍一种简便快速的丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量标准品的制备方法.方法 RT-PCR扩增目的片段,产物与pGEM-T裁体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品.结果 RNA标准品具有较大的线性范围(109 copies/ml-101copies/ml).批内和批间重复性也较好,cv分别为3.68%和8.40%.结论 本法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用.     

增殖诱导配体及其受体在肿瘤组织中的表达与意义

目的分析增殖诱导配体（APRIL）及其受体在不同肿瘤组织及肿瘤发展不同阶段的表达水平,探讨其与肿瘤发生的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）检测了临床上常见肿瘤组织中APRIL及其受体mRNA的准确含量,并以靶基因和内参mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果肿瘤组织中APRIL表达水平显著高于交界组织（P〈0．05）和正常组织（P〈0．05）;B细胞成熟抗原（BCMA）和穿膜蛋白活化物（TACI）表达水平在大多数肿瘤组织中与正常组织差异无统计学意义（P〉0．05）;APRIL在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中表达水平显著高于正常黏膜（P〈0．05）,APRIL在胃癌组织中表达水平显著高于肠上皮化生和异型增生（P〈0．05）,而其受体BCMA和TACI在各组胃黏膜病变之间表达水平无统计学意义（P〉0．05）。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL在肿瘤发生、发展过程中可能起了重要作用;除了BCMA和TACI外,肿瘤细胞可能还存在APRIL未知受体;APRIL在某些类型肿瘤有可能主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。     

增殖诱导配体及其受体在肿瘤组织中的表达与意义

目的分析增殖诱导配体(APRIL)及其受体在不同肿瘤组织及肿瘤发展不同阶段的表达水平,探讨其与肿瘤发生的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测了临床上常见肿瘤组织中APRIL及其受体mRNA的准确含量,并以靶基因和内参mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果肿瘤组织中APRIL表达水平显著高于交界组织(P<0.05)和正常组织(P<0.05);B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)表达水平在大多数肿瘤组织中与正常组织差异无统计学意义(P>0.05);APRIL在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中表达水平显著高于正常黏膜(P<0.05),APRIL在胃癌组织中表达水平显著高于肠上皮化生和异型增生(P<0.05),而其受体BCMA和TACI在各组胃黏膜病变之间表达水平无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL在肿瘤发生、发展过程中可能起了重要作用;除了BCMA和TACI外,肿瘤细胞可能还存在APRIL未知受体;APRIL在某些类型肿瘤有可能主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。     

冠心病患者肿瘤坏死因子β基因多态性研究

目的 :研究肿瘤坏死因子 - β(TNF- β)基因多态性与冠心病的关系。方法 :聚合酶链反应扩增 TNF-β第一内含子含有 10 6 9位核苷酸 A→ G多态位点的基因片段 ,Nco I内切酶进行限制性酶切反应。结果 :6 3例冠心病患者及 90例正常对照 TNF- β基因型及等位基因频率均无显著性差异 ,冠心病患者 *2 / 2基因型年龄低于 *1/ 2与*1/ 1基因型。结论 :TNF-β基因多态性与冠心病无关联 ,但不同 TNF-β基因型冠心病患者年龄存在差异     

RNA荧光定量标准品制备新方法的探讨

目的 以丙型肝炎病毒（HCV）为例,介绍一种简便快速的RNA定量标准品的制备方法.方法 RT-PCR扩增目的片段,产物以pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品.结果RNA标准品具有较大的线性范围（10^9copies/ml～10 copies/ml）,批内和批间重复性也较好,CV分别为1.68%～5.97%和6.40%～10.581%.结论 此法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用.     

乙型肝炎病毒核酸的实时荧光定量PCR检测及其临床意义

目的建立实时荧光定量PCR(rea l-tim e fluorescence quan titative PCR,RFQ-PCR)检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值。方法在HBV S基因高保守区设计了特异性的引物和探针,利用T aqM an探针的基本原理,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中HBV-DNA的准确含量。结果220例临床样本的检测结果显示,乙肝大三阳患者HBV-DNA阳性率(98.8%)显著高于其它各组(P<0.01),病毒平均含量为7.52±0.43 cop ies/m l;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P<0.01),但平均病毒含量与大三阳组无差异(P>0.05),高达7.41±0.26 cop ies/m l;单独HB sA g阳性和单独HB sA b阳性组HBV-DNA阳性率分别为56.4%,19.2%,平均病毒含量分别为5.35±0.32 cop ies/m l,4.02±0.31 cop ies/m l;80例献血员血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其它各组。结论RFQ-PCR检测HBV-DNA含量比EL ISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后意义重大。