乙型肝炎病毒基因多态性检测芯片的临床应用

在乙型肝炎病毒 (HBV)持续感染的过程中 ,其基因组可自然地或在治疗诱导下出现各种变异而呈多态性 ,给乙型肝炎的诊断、治疗及判断预后带来许多临床问题。DNA芯片技术是近几年发展起来的进行大规模遗传多态性检测的新方法 ,我们根据HBV基因多态性位点及突变热点的几种可能突变情况 ,设计了多条寡核苷酸探针 ,与聚合酶链反应 (PCR)扩增的HBV基因相应区段杂交 ,根据特定位置上杂交信号的有无和与之相应的探针序列来判定基因突变的类型。同时 ,测定了 99例临床样本和 4 0例献血员样本 ,取得了较满意的结果 ,现初步报告如下。材料和方法一…     

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性改良法与经典法检测比较

目的 :研究血管紧张素转换酶 (ACE)插入 /缺失 (I/D)多态性的检测方法。方法 :用在 PCR反应系统中加入 5 %的二甲基亚砜 (DMSO)的改良法检测了 16 8例健康人群 ACE基因型 ,并与经典 Rigat方法进行比较。结果 :两种方法检测的 II基因型频率相同 ,但在 19例 DD基因型中 ,有 5例用 DMSO改良法检测后 ,却均为 ID基因型 ,误判率为2 6 .32 %。结论 :经典 Rigat法存在着较高率 ,改良法简便、可靠 ,适合临床实验室开展及大规模人群检测。     

血红蛋白AHD—575测定法

本文建立了ＡＨＤ－５７５测定血红蛋白法，标准用主纯度氯化血红素或摩尔吸光系数化的二级血样品标准。与ＨＩＣＮ法、Ｃｏｕｌｔｅｒ血细胞计数分析仪法比较（Ｐ〈０．０５），结果准确可靠。     

胱抑素C检测在儿童肾小球疾病诊断中的意义

目的:探讨胱抑素C(CYS-C)在小儿肾小球疾病诊断中的意义。方法:用HITACHI7600-020生化分析仪检测53例小儿肾小球疾病患者血清中BUN、CRE、UA、TCh、CYS-C﹑β2MG。结果:肾小球疾病组的CYS-C、CRE等浓度明显高于对照组(P<0.01)。结论:CYS-C是反映小儿肾小球滤过率的重要指标,在小儿肾小球疾病诊断中有重要作用。     

结直肠癌组织APRIL表达检测方法的比较

目的 观察结直肠癌组织中增殖诱导配体(APRIL)表达检测方法,实时荧光定量PCR法、免疫组化染色法的相关性.方法 实时荧光定量PCR法检测29例结直肠癌患者肿瘤组织及自身癌旁组织;免疫组化染色法检测相同29例结直肠癌患者组织及正常结直肠组织12例的APRIL蛋白表达.结果 29例结直肠癌组织中实时荧光定量PCR法检测APRIL阳性率为93.1%(27/29);免疫组化染色法检测APRIL阳性率为89.6%(26/29);两方法比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 实时荧光定量PCR法、免疫组化染色法检测APRIL的表达方法,能为临床提供有诊断参考价值的信息.     

冠心病患者载脂蛋白E、血管紧张素转换酶联合基因型研究

目的 :研究中国人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及血管紧张素转换酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/D)多态性与冠心病的关联。方法 :分别用PCR -RFLP及PCR技术检测了 12 9例冠心病患者及 90例健康人ApoE ,ACE基因型。结果 :冠心病组ε3 / 4基因型及ε4等位基因频率显著高于对照组 ,ε3 / 3 基因型及ε3 等位基因频率则显著低于对照组 ;ACE各基因型及等位基因频率两组间无显著差异 ;在ε4携带情况下 ,不同ACE基因型冠心病危险度不同 ,DD型 >ID型 ,而Ⅱ型似有一定的保护作用。结论 :ε4等位基因是冠心病的遗传易患因子 ;ACE基因与冠心病发病无显著关联 ,但对ε4等位基因有一定的“修饰”作用。     

高血压患者尿微量清蛋白与C反应蛋白及其-717A>G基因多态性的关系

目的探讨高血压患者尿微量清蛋白(MAU)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及其-717A>G基因多态性的关系。方法将高血压患者按尿清蛋白水平分为尿正常清蛋白(NMAU)组(75例)和MAU组(56例),另选择健康体检正常者为对照组(60例)。免疫浊度法测定各组血浆hs-CRP水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测受检者CRP的-717A>G基因型及等位基因频率,并进行组间比较。结果 3组受检者的收缩压、舒张压、hs-CRP、MAU、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中NMAU组与MAU组的收缩压、hs-CRP、MAU、TG水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logis-tic回归分析显示hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的危险因素(OR=3.107)。MAU组与NMAU组受检者比较,CRP-717A>G基因型AA、AG及GG频率分布差异无统计学意义(χ2=3.621,P>0.05);等位基因A、G频率分布差异有统计学意义(χ2=3.931,P=0.047)。结论 hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的独立危险因素,CRP-717A等位基因可能是高血压患者MAU发生的易患基因。     

CD14基因启动区C（-26O）T分子变异与中国人群冠心病相关性研究

目的:研究CD14基因启动区C(-269)T分子变异与中国人群冠心病的关联。方法:用PCR技术检测了50例经冠脉造影证实的冠心病患者及90例健康人CD14基因启动区含(-269)多态位点的基因片段,HaeⅢ酶切分型。计算基因型及等位基因频率,并比较两组间差异。结果:冠心病组T等位基因(无酶切位点)频率显著高于对照组(51.00％Vs32.78％;OR=2.13;95％ CI,1.30～3.50;P<0.01)。结论:CD14基因启动区C(-269)T分子变异与中国人群冠心病相关。     

PCR与ELISA检测乙型肝炎病毒标志物比较和评价

分别用聚合酶链反应与酶联免疫吸附法对２４８份血清进行乙直病毒标志测定，并作比较。结果表明，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ－ＤＮＡ有很好的相关性和相似的流行病学意义。但两不可替代。     

可长期保存的嗜酸性粒细胞计数稀释液

根据渗透压对细胞影响的原理，用碳酸碳盐，ＥＤＡ－Ｎａ２作为提高嗜酸性粒细胞计数稀释液晶体渗透压成分，再以苯酚为稳定剂，使嗜酸性粒细胞不被溶解，经染要色计数。用本法配制已保存２年的稀释液与新鲜配制的用丙酮，乙醇为保护剂的经典方法比较差异无显著性。