实验教学改革与学生综合素质培养的实践

在培养医学检验专业学生中 ,通过设置综合性、设计开放性实验 ,改革实验考核方法和内容 ,强化毕业实习 ,以深化实验室体制改革。以学生为中心 ,培养学生综合素质、创新精神和实践能力 ,全面推进教学质量提高     

探索建立医学检验专业实验教学模式

重庆医科大学医学检验系 1 984年在国内首批成立。创始之初 ,由于国内无既定的模式 ,因此探索建立一套适合医学检验学生的理论和实验教学模式 ,培养理论水平丰厚、实验操作技能扎实、学生能力素质较高的毕业生一直是我们教学改革的目标。建系 1 7年来 ,经过长期的探索总结 ,我系在实验教学中形成了贯穿学生科研能力训练 ,重视学生实践能力和创造性思维培养 ,紧密结合临床的实验教学模式。该教学模式的实施 ,有效地提高了教学质量 ,强化培养了学生动手能力和思维能力 ,成效显著 ,受到学生的一致好评。总结长期实验教学的经验 ,我们重点抓了以…     

医学检验专业本科人才培养的探索

本文概括了重庆医科大学高等检验医学教育从创建到发展21年来,在学科建设、人才培养和优化课程体系等方面的探索和改革实践。初步形成了适应我国检验工作岗位的医学检验专业本科人才培养体系。     

通过矿化提高蛋白疫苗稳定性的研究

目的:通过原位矿化的方式制备肺炎链球菌蛋白质的磷酸钙矿化颗粒,并评价其在蛋白酶和热处理后的稳定性。方法:通过分子克隆技术表达并纯化蛋白野生型溶血素(WT-PLY)和其无溶血活性突变体(ΔA146PLY),在富含Ca~(2+)和PO_4~(3-)的弱碱性溶液(pH=7.5)中进行生物矿化,制备磷酸钙矿化的蛋白颗粒;通过TEM、FESEM、EDS等分析矿化颗粒的大小、形貌及表面成分;通过抗蛋白酶K降解实验、溶血实验等分析矿化疫苗的稳定性;通过体外细胞实验和体内动物实验评估热处理后矿化蛋白疫苗的保护效应。结果:在1 ml矿化体系中含有360μg蛋白、8.8μmol Ca~(2+)、8.8μmol Mg~(2+)和5.28μmol PO_4~(3-)的条件下,均可制备出WT-PLY和ΔA146PLY的矿化颗粒,BCA检测其包封率分别为44.4%和52.2%;矿化颗粒WT-PLY@CaP和ΔA146PLY@CaP在蛋白酶K处理15 min内其抗酶解活性高于其可溶性蛋白;矿化颗粒WT-PLY@CaP在55℃处理5 min和45℃处理60 min后,其溶血活性较其可溶性蛋白高;矿化颗粒ΔA146PLY@CaP在55℃处理5 min和45℃处理60 min后仍保持与未处理蛋白一致的免疫活性。结论:生物矿化有助于提高蛋白稳定性。这为疫苗蛋白及其他蛋白制品稳定性的提高提供了一种简便易行的矿化方法。     

促凝剂和肝素处理标本对锂盐浓度监测的影响

目的探讨肝素钠抗凝剂和促凝剂处理标本对血锂浓度监测的影响。方法选择临床服用碳酸锂治疗达稳态的住院患者,使用真空采血系统分别采集普通管血液标本和含有肝素钠抗凝剂及促凝剂标本,在IMS972电解质分析仪上测定Li+浓度,比较两者结果的差异。结果(1)不使用添加剂处理的标本(普通血清)Li+浓度为(0.62±0.21)mmol/L;肝素钠抗凝血浆Li+浓度为(0.62±0.21)mmol/L;促凝剂处理的血清Li+浓度为(0.64±0.16)mmol/L。不同方式处理的标本间Li+浓度均无统计学差异(F=1.154,P>0.05)。(2)肝素钠抗凝剂和促凝剂处理标本与普通血清Li+浓度之间呈高度线性相关(r=0.993～0.995,P<0.001)。(3)肝素钠抗凝剂、促凝剂添加剂、普通血液标本不分离血凝块(红细胞)室温放置8h,Li+浓度较放置前结果增高,两者比较有显著性差异(P<0.05～0.01)。(4)放置8h后,不同方式处理的标本间Li+浓度无统计学差异(F=2.769,P>0.05);并且线性相关有统计学意义(r=0.952～0.998,P<0.001)。结论促凝剂和肝素处理标本适用于锂盐的快速测定,若不能立即测定的标本应及时分离血清。     

循环核酸测定在恶性肿瘤诊断中的应用

循环核酸是指存在于血液(血浆或血清)中的细胞外游离DNA和RNA。本文对血浆(血清)DNA如Ras和p53基因突变、微卫星改变、肿瘤抑癌基因启动子的高甲基化、线粒体DNA突变和肿瘤相关病毒DNA等以及肿瘤相关RNA如酪氨酸酶RNA、端粒酶成分RNA、不同肿瘤相关基因编码的mRNA和病毒RNA等检测在肿瘤诊断和预后中的意义进行了综述，并简要展望了循环核酸测定的应用前景。     

天然抗菌肽分离纯化方法的建立

目的寻找高效、广谱的新型天然抗菌肽，建立稳定、有效的分离纯化方法。方法家蝇免疫诱导后制成组织匀浆，经超速离心、分子筛过滤、SephadexG50层析、反相高效液相色谱法（RP-HPLC）、透析浓缩等技术进行分离纯化，用K-B法鉴定抗菌活性。结果组织提取液经超速离心后，用pH6．8Tris-HCI尿素缓冲液作流动相，SephadexG50层析，收集到有明显抗菌活性的成分。再用pH6．8磷酸盐缓冲液作流动相，经RP-HPLC半制备柱进一步纯化，各成分分离效果良好，保留时间为18．008min处的谱峰，有明显的抗菌活性。用RP-HPLC分析柱显示其为单一成分，达到了色谱纯。该抗菌肽对大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantS．aureus，MRSA）均有抗菌活性。结论建立了有效的家蝇抗菌肽分离纯化方法，纯化的家蝇抗菌肽有广谱抗菌活性。     

环境因素诱导细菌致病基因的表达及其调节

研究细菌致病基因的表达及其调节特性 ,有助于定义潜在的毒力因子 ,鉴定新的致病基因和毒力因子。本文综述了特定的宿主产物、温度、Fe离子浓度、渗透压等环境信号诱导细菌致病基因表达的机理 ,以及两成分调节系统和DNA超螺旋的改变对细菌致病基因表达的调节。     

PspA免疫小鼠抗肺炎链球菌侵袭性感染研究

目的:获取原核表达的肺炎链球菌PspA重组蛋白并研究其作为疫苗的价值. 方法:分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将编码PspA抗原表位在内的部分序列克隆到原核表达载体PET-32(a)内,酶切及测序鉴定重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,将获得的重组蛋白用Western Blot鉴定,镍柱纯化并透析除盐. 用重组蛋白免疫动物,观察PspA抗体对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用. 结果:DNA序列与GenBank中的数据相符,所表达纯化的蛋白经Western Blot证实为PspA,其抗体在肺炎链球菌感染中对小鼠有保护作用. 结论:重组PspA刺激产生的抗体能够有效抵抗肺炎链球菌TIGR4侵袭性感染,该重组蛋白可作为肺炎链球菌多肽联合疫苗的组成部分之一.     

槲皮素对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究槲皮素对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响.方法采用MTT试验、流式细胞仪检测槲皮素对体外培养的人肺腺癌A549细胞的抑制作用和细胞周期的变化,电镜观察超微结构变化,免疫组化技术检测槲皮素对凋亡相关蛋白Bcl-2、p53表达的影响.结果MTT结果显示槲皮素对体外培养的A549具有明显的增殖抑制作用,且具有一定的浓度和时间依赖性;流式细胞仪检测发现,30μg/ml槲皮素作用A549细胞48h后能将细胞阻滞于G0/G1期,且在细胞周期G1峰的左侧出现了凋亡峰;电镜观察发现有凋亡的特征性改变;免疫组化结果显示,槲皮素使Bcl-2表达下调,而上调p53蛋白的表达.结论槲皮素能抑制肺腺癌A549细胞的生长,阻止细胞由G0/G1期向S期和G2/M期移行并诱发细胞凋亡,其诱发A549细胞凋亡的机制可能与上调促凋亡蛋白p53表达和下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达有关.