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目的 探讨在STAR2 0 0 0加样仪上实现核酸扩增技术样本汇集、样本留档和条码的管理等准备工作。方法 应用STAR2 0 0 0控制语言C+ + 及组件 ,编制控制程序控制加样仪进行两级汇集 ,留档及条码打印 ,同时进行全自动核酸提取及扩增和分析。结果 用国际标准核酸质控品考评及实际应用 ,表明应用STAR2 0 0 0进行全自动汇集 ,全自动核酸提取及扩增和检测可检出HBVDNA、HCVRNA和HIV1RNA分别为 2 0、10IU/ml和 2 0Copy/ml,通过对 6 0 2 4例合格样本共 2 5 1个汇集池分析 ,检出 6例HBVDNA阳性样本 ,阳性检出率为 0 .0 99%。HCVRNA和HIV1RNA未检出阳性。结论 STAR 2 0 0 0加样仪可用于血液核酸筛查的样本汇集及条码管理工作。 相似文献
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全自动血液核酸筛查及阳性献血员追踪的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
目的 建立献血者全自动核酸检测方法,探讨在我国血液筛查中引进全自动核酸筛查方法的可行性。方法 在酶联免疫吸附实验(ELISA)筛查血液基础上,选用全自动汇集仪进行血样汇集(24人份),在全自动核酸提取仪上提取样本核酸,应用聚合酶链反应(PCR),在COBAS AMPLICOR进行扩增和检测结果,用国际标准核酸质控品考评检出限量,对阳性献血者追踪检测。结果经考评及常规应用表明,全自动汇集、全自动核酸提取及扩增和检测95%的检出限量HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA分别为38.9、17.4IU/ml和20.6拷贝/ml,95%的可信限分别为[21,323]、[10.5,342]和[12,300]。通过对16512个样本共688汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0.048%,其中7例为Anti-HBc阳性,其余1例亦转换为阳性。HCV RNA和HIV-1 RNA未检出阳性,6例HBV DNA阳性样本追踪发现,3例发生了血清转换现象。结论本实验结果认为全自动血样汇集,全自动核酸提取扩增和检测方法可应用于血液的筛查工作。 相似文献
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目的对酶联免疫检测阴性的样本进行核酸检测,探讨其应用特点。方法将酶联免疫检测阴性的样本按不同试剂厂家的要求进行汇集并进行核酸筛查,不同时段应用不同的核酸检测试剂,并参加卫生部临检中心和澳大利亚国家实验室的核酸检测室间质评。结果在筛查的55 543人份样本中,检出HBsAg阴性而核酸HBVDNA阳性的样本2份,未检出丙型肝炎病毒抗体和艾滋病毒抗体阴性而其相应核酸阳性的样本。卫生部临检中心室间质评结果与预期结果完全相符,国际室间质评结果HIV-1RNA完全相符,HBVDNA和HCVRNA分别有1个和2个未检出。结论我国目前核酸检测试剂的灵敏度还有待进一步提高,核酸检测还需进一步扩大检测规模。核酸检测在血站和医院应用的不同。 相似文献
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目的 探讨在加样仪上实现血液样本汇集,在Roche MPLC上全自动提取样本HBVDNA,在COBUS AMPLICOR上进行扩增和检测的方法,为血液HBV DNA筛查提供应用依据。方法 在酶联免疫吸附实验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2030加样仪自编程序进行全自动血样汇集(24例份),在MPLC上全自动方法提取样本核酸,应用PCR方法在COBAS AMHLICOR进行扩增和检测分析结果,从检出限量及抗干扰能力方面进行考评。结果 用国际标准核酸质控品考评及常规应用,表明全自动汇集,全自动核酸提取及扩增和检测HBV DNA95%检出限量为39.6U/ml,20mg/dl胆红素、1g/dl血红蛋白及中等程度的脂血对结果无影响。通过对5136例份样本共214汇集池分析,HBVDNA阳性6例,阳性率为0.12%。结论 本实验结果认为MPLC全自动核酸提取方法可应用于血液混样核酸筛查工作。 相似文献
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血液HBV DNA全自动检测及基因分型分析 总被引:8,自引:2,他引:8
目的建立血液HBVDNA标本汇集、核酸提取、扩增及检测的全自动筛查模式,对阳性标本进行基因分型和血清学追踪检测,为血液HBVDNA自动化筛查提供科学依据。方法在酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2000加样仪自编程序进行全自动血样汇集(24人份),在MPLC仪上全自动提取标本核酸,应用PCR方法在COBASAMPLICOR进行扩增和检测分析结果,用国际标准核酸质控品考评检出限量,对阳性标本进行基因分型并追踪血清转换过程。结果全自动汇集、全自动核酸提取和扩增及检测HBVDNA95%检出限量为38.9IU/ml,95%CI为(21323)。通过对16512个标本共688个汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0.049%。其中C型3人,B型2人,D型1人,2人未能确定基因型,6例阳性标本追踪发现,3例发生了血清转换现象。结论HBVDNA全自动核酸检测方法可应用于24人份血液混样核酸筛查。 相似文献
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目的 了解深圳市无偿捐血者近年来梅毒感染状况,控制梅毒经血液传播,降低输血风险,为捐血者的招募提供参考依据.方法 用梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)及酶联免疫吸附试验(ELISA)对捐血者进行梅毒抗体筛查,阳性者用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)确认.对数据进行分析,找出保障安全输血的有效措施.结果 2006~2008年深圳市筛查无偿捐血者共156 652例,经TPPA确证梅毒抗体阳性626例,梅毒抗体阳性率为0.40%.2006年、2007年、2008年阳性率分别为0.43%、0.40%、0.38%,呈逐年下降趋势,在年龄、职业、学历和捐血次数分布上存在显著性差异.结论 梅毒抗体阳性率在深圳市捐血人群中呈逐年下降趋势,年龄、职业、学历、捐血次数与梅毒抗体阳性率有关. 相似文献
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自动化核酸扩增技术(NAT)在血液筛查中的应用研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的为了提高血液安全性,探讨自动化核酸扩增技术在血站血液筛查中应用的可行性。方法在酶联免疫试验(ELISA)常规筛查血液的基础上,应用STAR2000加样仪自编程序进行全自动血样汇集(8人份),在KHB-DP1000半自动核酸提取仪上自动化方法提取样本核酸,应用荧光PCR方法在AB I7300上进行扩增和检测分析结果,用临检中心室间质控品和澳大利亚室间质控品进行室间质评,用标准品考评检测限量。结果应用标准品考评检测限量,本法的95%的检出限量HBV DNA、HCV RNA和H IV RNA分别为100.9 IU/m l,155.1拷贝/m l和165拷贝/m l,95%可信限范围分别为(60.1、302.2),(98.9,398.6)和(105.2,425.8)。通过对16 744个样本共2093汇集池检测,初始检测HBV DNA阳性池2个,HCV RNA、H IV RNA未检出阳性池,进一步拆分检测,有2份献血者的血液HBV DNA阳性,HBV DNA阳性率为0.012%。结论随着国内相关技术的不断提高和相关制度的不断完善,可以考虑将国产自动化核酸扩增试剂纳入血站血液常规筛查。 相似文献
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两种梅毒检测试剂敏感性及特异性比较 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 比较ELISA及TRUST 梅毒检测试剂敏感性及特异性。方法 采用ELISA及TRUST法同时筛查献血者标本中的梅毒指标 ,结果阳性采用TPHA法确证。结果 在TPHA法确证的 2 73例阳性标本中 ,TRUST检出 97例 ,敏感性为 35 5 % ;ELISA检出 2 70例 ,敏感性为 98 9%。TRUST检出的 10 3例阳性中 ,有 6例经确证为阴性 ,特异性为 94 2 % ;ELISA检出的 32 4例阳性中 ,有 5 4例经确证为阴性 ,特异性为 83 3%。两种试剂检测结果同时为阳性的标本为 94例 ,经确证均为阳性 ,有 3例经确证为阳性的标本为TRUST法检出而ELISA方法未能检出。结论 ELISA试剂的敏感性远远高于TRUST试剂 ,而特异性稍低于TRUST试剂 ,无论哪种试剂阳性 ,均应进行TPHA确证 ,若两种试剂检测均为阳性 ,在临床上基本可断定为阳性。 相似文献