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91.
目的:为了明确记忆相关基因KIBRA 在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)转基因动物模型中是否存在表达改变及及其对神经元凋亡的影响,进而探讨KIBRA 如何参与Aβ诱导的神经元凋亡及其相关机制。方法:本研究首先通过免疫组织染色及免疫蛋白印迹的方法,观察在不同月龄APP/PS1 小鼠中是否存在KIBRA 的表达改变。其次,通过TUNEL 免疫荧光染色,观察在KIBRA 基因敲除小鼠中是否存在神经元凋亡。最后,我们使用CRISPR/CAS9 慢病毒及过表达慢病毒分别转染HT22 细胞,建立KIBRA 基因敲除和KIBRA 过表达细胞模型,进而探讨KIBRA 对Aβ诱导的神经元凋亡及其相关机制的研究。结果:①KIBRA 在APP/PS1 转基因小鼠脑内特异性表达:选用9 月龄及12 月龄APP/PS1 小鼠作为AD 研究模型,通过KIBRA 免疫组织染色分析,无论整个海马,还是海马亚区CA1 区和CA3 区,9 月龄和12 月龄APP/PS1 小鼠KIBRA 阳性细胞数量均明显低于对照组,其中12 月龄尤为显著(P<0.01,P<0.001)。免疫蛋白印迹结果同样证实12 月龄APP/PS1 小鼠海马区KIBRA 的表达明显低于野生型小鼠(P<0.001)。随着月龄的增加,KIBRA在APP/PS1 转基因小鼠海马区的表达逐渐减少,提示KIBRA 在AD 小鼠海马区的特异性降低,与学习记忆障碍密切相关。②KIBRA 在神经元凋亡中的重要作用:通过TUNEL 荧光染色发现,与野生型小鼠相比,12 月龄APP/PS1 小鼠海马神经元凋亡比例明显增多(P<0.01,P<0.01)。4 月龄KIBRA 基因敲除小鼠海马神经元凋亡比例比野生型小鼠明显增加(P<0.05),提示KIBRA 在神经元凋亡的发生中扮演不可或缺的角色。③KIBRA 对Aβ诱导的神经元凋亡的保护作用:CCK8及免疫蛋白印迹结果显示,与空病毒组相比,经1 μmol·L-1 的Aβ1-42 寡聚体处理后的KIBRA 敲除组细胞活力明显降低(P<0.01);凋亡相关蛋白(剪切的PARP、活化的caspase3)的表达量明显增高(P<0.05,P<0.01)。KIBRA 过表达组细胞存活率明显优于空病毒组(P<0.05),凋亡相关蛋白较空病毒组显著减少(P<0.05),进一步提示KIBRA 参与抑制Aβ诱导的神经元凋亡,促进细胞增殖和存活。4. KIBRA 通过激活Akt 信号通路抑制Aβ诱导的神经元凋亡:本实验筛选凋亡相关信号通路,结果显示,在1 μmol·L-1 Aβ1-42 寡聚体处理1 min 后,KIBRA 敲除组Akt Ser473 位点磷酸化水平比空病毒组显著降低(P<0.05)。在Aβ1-42 寡聚体处理1 分钟后,KIBRA 过表达组Akt Ser473 位点磷酸化明显被激活,Akt Ser473 位点磷酸化水平比空病毒组显著增高(P<0.01)。此外,与Aβ1-42 寡聚体干预组相比,Akt 特异性抑制剂(MK2206)预处理组KIBRA 过表达细胞存活率明显降低(P<0.05);剪切的PARP 表达量明显增高(P<0.05)。以上结果表明KIBRA 通过激活Akt Ser473 位点的磷酸化水平,抑制Aβ诱导的神经元凋亡。结论:KIBRA 作为一种神经保护因子,通过激活Akt 信号通路抑制Aβ诱导的神经元凋亡,促进细胞增殖及存活,为AD 发病机制及治疗药物的研究提供了新的靶点。 相似文献
92.
目的 观察bFGF对大鼠骨髓基质细胞的诱导分化作用。方法 从大鼠骨髓中分离培养基质细胞并传至第3代,用含10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的诱导培养基诱导,然后观察细胞形态的变化,并采用免疫组织化学法检测诱导后24h、48h、72h、96h细胞神经丝蛋白(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果 诱导后24h的部分细胞不仅在形态上表现为神经元样,而且呈NF-200阳性表达,GFAP阴性。48h、72h、96h NF-200阳性细胞数与24h间无显著性差异(P>0.05)。结论bFGF可以在体外诱导骨髓基质细胞向神经元样细胞分化。 相似文献
93.
目的:观察丁苯肽软胶囊治疗缺血型Moyamoya综合征的临床疗效。方法:31例缺血型Moyamoya综合征患者随机分为对照组14例和治疗组17例,对照组按缺血性卒中常规治疗,治疗组在其基础上加用丁苯肽软胶囊治疗;随访半年。于治疗前及治疗14 d后,采用中国脑卒中临床神经功能缺损程度评分量表对患者进行评分;将患者半年前后头MRA影像进行血管分期评分,统计血管分期加重例数;比较2组患者卒中或短暂性脑缺血发作(TIA)再发情况。结果:入院时对照组和治疗组的神经功能缺损评分分别为(14.50±2.59)分和(14.88±2.39)分,差异无统计学意义(P0.05);治疗14 d后,2组评分分别为(12.93±0.73)分和(10.88±1.41)分,均低于同组治疗前,且治疗组评分低于对照组(均P0.05)。半年后随访行头MRA复查结果显示,对照组颅内血管分期评分加重例数8例(57.14%),高于治疗组3例(17.65%)(P0.05)。随访半年内,对照组复发率35.70%,显著高于治疗组的复发率5.88%(P0.05)。结论:丁苯肽软胶囊治疗缺血型Moyamoya综合征能有效改善神经功能缺损且能改善颅内血管侧枝循环情况,对改善预后、降低复发率有一定作用。 相似文献
94.
内镜下括约肌切开术治疗慢性胰腺炎的护理 总被引:2,自引:0,他引:2
我院于2001年5月~2002年3月对14例慢性胰腺炎病人进行内镜下乳头括约肌切开术 (EST)治疗 ,同时实施针对性护理 ,取得满意效果。1临床资料1 1一般资料 :本组14例患者中男性11例 ,女性3例 ,年龄17~68岁 ,平均年龄43 5岁 ,病程2月~12年。临床表现 :14例患者均有持续性或间歇性左上腹部疼痛 ,13例患者在病程中有反复的血清及尿淀粉酶升高病史 ,12例伴有消瘦 ,6例患者有消化不良及脂肪泻病史 ,3例有糖尿病史。影像学检查 :14例均经B超或内镜逆行胆胰管造影术 (ERCP)、CT证实符合慢性胰腺炎… 相似文献
95.
0 引言 我院1998-6/2002-4收治女性膀胱颈部梗阻5例,对其诊断和治疗进行回顾性分析,报告如下。1 临床资料 本组35例,年龄32~77(平均50)岁。病程2月~8 a,平均2 a 1月。1 a以上 30例(85.7%)。患者均有不同程度的排尿困难,表现为排尿踌躇, 相似文献
96.
目的探讨不同产地蛹虫草、虫草花、冬虫夏草中虫草素含量的差异,以期为选择合适的虫草素提取原料提供参考。方法通过超高速液相色谱法建立虫草素检测方法;检测并对比天然蛹虫草、人工栽培蛹虫草、虫草花、冬虫夏草中虫草素的含量。结果检测的冬虫夏草中并不含有虫草素;检测的虫草花和蛹虫草中虫草素含量分别在0.03%~0.23%及0.05%~0.51%之间;而虫草素在蛹虫草子实体和虫体中的分布并不相同。结论虫草花中虫草素含量比蛹虫草中略低,都可作为虫草素的提取原料。 相似文献
97.
神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:研究周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白(Growth-associated protein,GAP-43)mRNA表达和蛋白质合成的变化规律。方法:建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型,用原位杂交和免疫组化技术观察大鼠腰髓和背根神经节的GAP-43mRNA表达和蛋白质合成变化。结果:大鼠坐骨神经损伤后,腰髓腹角运动神经元和感觉神经元GAP-43mRNA表达和蛋白质合成增强。结论:周围神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达显著增强,神经再生完成后表达减弱,表明GAP-43在神经再生过程中起重要作用。 相似文献
98.
目的 分析临床检测抗-HCV诊断丙型肝炎的不确定性,提高临床诊断丙型肝炎的正确率.方法 对125例观察对象采用化学发光法检测血清抗-HCV水平、采用PCR荧光法检测血清HCV-RNA水平;运用加法运算法则并结合抗-HCV和HCV-RNA检测结果对HCV感染进行概率判定.结果 125份标本中,抗-HCV检测值(S/CO)范围为1.05~34.65、平均水平为26.70;检测出HCV-RNA阳性74例(占59.2%)、HCV-RNA阴性51例(占40.8%),抗-HCV检测值(S/CO)在1.05~16.74范围内时,HCV-RNA检测结果均为阴性.结论 血清抗-HCV检测值(S/CO)在1.05~16.74范围内而HCV-RNA检测结果为阴性时,发生HCV感染的概率为0.408;血清抗-HCV检测值(S/CO)在17.85~34.65范围而HCV-RNA检测结果为阳性时,发生HCV感染的概率为1.临床上依据抗-HCV检测结果诊断HCV感染时,应采取慎重和理性的态度. 相似文献
99.
目的研究山药提取物联合替加氟对结肠癌的体内抑制作用及免疫功能的影响。方法建立荷结肠癌HT29细胞裸鼠模型,用替加氟(36mg/kg)、山药提取物(125mg/kg)、山药提取物(125mg/kg)协同替加氟(36mg/kg)分别治疗,观察各组抑瘤情况以及血清中的CD4+T和CD8+T比值及白细胞介素-2(IL-2)、α-肿瘤坏死因子(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果荷瘤鼠各组治疗结束后,协同组的瘤质量明显低于单独使用山药提取物组及替加氟组,血清中的CD4~+T和CD8~+T比例值及IL-2、TNF-α和IFN-γ的含量明显高于单独使用山药提取物组及替加氟组。结论山药提取物协同替加氟可以提高荷结肠癌裸鼠的免疫力,具有一定的治疗效果。 相似文献
100.
586例急性中毒住院患儿临床特征分析 总被引:1,自引:1,他引:0
目的对急性中毒住院患儿的临床特征进行分析,为儿童急性中毒的预防和治疗提供参考。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院2006年1月至2015年12月出院并确诊为中毒的586例住院患儿的临床资料。结果 586例患儿中,男354例,女232例;年龄24 d至15.8岁;婴幼儿和学龄前期患儿450例(76.8%);农村患儿463例(79.0%);意外中毒551例(94.0%)。药物、农药、鼠药中毒分别221例(37.7%)、167例(28.5%)和175例(29.9%)。中毒物质在城市和农村患儿的分布差异有统计学意义(P0.01),其中城市中毒患儿以药物为主要中毒物质,农村患儿中农药中毒所占比例最高。药物、农药、鼠药中毒患儿的主要临床表现差异有统计学意义(P0.01),分别以神经系统、消化系统、循环系统症状为主;不同物质中毒患儿治疗总有效率差异无统计学意义。结论儿童急性中毒主要发生在婴幼儿和学龄前儿童;多发生在农村;多为意外中毒;药物中毒是造成急性中毒的主要原因;不同物质所致中毒患儿主要的临床表现不同,但临床治疗的总有效率无明显差异。 相似文献