一步法联合冻存提高大鼠胰岛冻存质量的研究

目的探讨提高大鼠胰岛冻存质量的方法,以期为建立胰岛库奠定基础。方法将受体鼠分为实验组A组:即一步法联合冻存的胰岛移植组;对照组B组:新鲜的胰岛移植组;对照组C组:逐步法冻存的胰岛移植组。观察3组之间胰岛收获率,活性及移植后效果等方面的差异。结果纯化后收获大鼠胰岛每只(826.87±93.24)IEQ。A组平均胰岛收获率为(87±4)%,高于C组的胰岛收获率(81±4)%。A组和C组经过胰岛刺激素释放实验后均有较B组高的基础胰岛素释放量,但刺激指数则明显低于B组的637.3±39.5。胰岛移植入糖尿病鼠受体后,A组和B组在移植后1周即恢复血糖为正常值,并维持到观察结束。而C组中则需要较长时间纠正血糖到正常。移植(2011.14±114.22)IEQ胰岛在A组和B组可达到100%纠正糖尿病。结论采用全新的细胞内低温保存液(HTS)结合细胞冻存液(DMSO)对大鼠胰岛进行一步法冻存取得了明显优于用DMSO逐步冻存的效果。     

应用骨髓法培养树突状细胞的研究

目的探讨培养树突状细胞(DC)的最佳方法和合理的培养时间。方法取大鼠的骨髓细胞分别加入4种细胞因子重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rrGMCSF)5μg/L,重组大鼠白细胞介素4(rrIL4)5μg/L,重组大鼠肿瘤坏死因子α(rrTNFα)10μg/L,重组大鼠γ干扰素(rrγIFN)20μg/L培养2周,并用PE标记的抗大鼠CD86单克隆抗体检测它的成熟度。结果从第7天开始细胞周围开始逐渐伸出突起,第13天以后突起5～6支左右,且长度逐渐缩短,成熟的树突状细胞伸出长短不等的突起,类似神经细胞的树突。60只大鼠培养所得的树突状细胞平均为(1.18±0.21)×107第7、11、13、15天的CD86单抗的阳性率分别为30%、80%、92%、94%,随着时间的延长,它的阳性率不断增加,尤以第1周到第2周之间增长的特别明显,但2周以后,树突状细胞的成熟度无明显提高。结论应用骨髓法来培养树突状细胞加入细胞因子rrGMCSF、rrIL-4、rrTNF-α、rr-γ-IFN培养2周,可得到成熟的树突状细胞。     

乌司他丁对犬胰岛的保护作用

目的判定在机械分离纯化犬胰岛过程中,胰腺原位灌洗时应用乌司他丁(UTI)的保护作用,观察胰岛的获取产量。方法将20只犬随机分为两组,每组10只。HC-A组:胰腺经腹主动脉原位灌洗时用冷HC-A液2500ml;HC-A UTI组:胰腺原位灌洗时,HC-A液中加用UTI10000U/kg。两组均经主胰管用4℃胶原酶V控压灌注,在RicordiChamber系统中消化,用Ficoll连续梯度离心纯化。记录消化时间、胰岛外分泌腺包裹率、胰岛纯度、纯化后胰岛在体外用低糖与高糖刺激下胰岛素分泌量、C-肽的释放量及收获的胰岛当量(IEQ),并对纯化后的胰岛进行光镜及电镜观察。结果HC-A UTI组与HC-A组在胰腺消化时间、胰岛外分泌腺包裹率、胰岛纯度、纯化后的胰岛在体外经低糖与高糖刺激下胰岛素分泌量、C-肽的释放量以及胰岛的形态和结构上比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。HC-A组收获胰岛[(3.42±1.47)×104]IEQ,HC-A UTI组收获胰岛[(6.17±2.86)×104]IEQ,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论在犬胰岛分离和纯化过程中,胰腺获取原位灌洗液中加用UTI能保护胰腺组织,增加胰岛产量。     

放射性镍钛合金内支架治疗晚期恶性胆管梗阻

目的 探讨放射性镍钛记忆合金胆道内支撑架对晚期恶性胆管梗阻的治疗效果。方法 通过对比放射性镍钛合金胆道内支架，Wallstent金属内支架，胆肠吻合术在减黄效果，术后并发症，生存时间等方面 疗效，研究放射性镍钛合金胆道内支架在治疗晚期恶性胆管梗阻方面的优越性。结果 三组在减黄效果上无明显差别，但放射性镍钛合金内支架组在无症状生存时间及总的生存时间方向较另两组长，其术后并发症较另两组明显少（P＜0．01），复发率低，而且病人痛苦小，生存质量明显得到提高。结论 放射性镍钛合金胆道支架既能解决晚期恶性胆管梗阻病人因胆道梗阻所致黄疸带来的痛苦，又能有效抑制肿瘤细胞的生长，对于延长病人生存时间，提高生存质量具有切实疗效。     

缺血性脑梗死在基层医院的诊疗要点

脑血管病是危害我国中老年人身体健康和生命的主要疾病,死亡人群构成比.城市居民至第一、二位,农村升至第二位.我国每年脑血管病新发病例数超过200万,死亡病例约150万.每年导致的直接间接经济损失超过200亿元人民币[1].并逐渐有低龄化趋势,故脑血管病患者在基层医院得到有效的治疗,显得尤为重要.     

血清孕酮和β-HCG联合检测在早期先兆流产中的临床价值

目的评估血清孕酮和β-HCG联合检测在早期先兆流产中的临床价值。方法选取本院早期先兆流产患者及健康孕妇各36例作为样本,采用相同方法检测血清孕酮及β-HCG指标。给予早期先兆流产患者黄体酮+HCG治疗。结果观察组患者血清孕酮(16.52±1.02)nmol/L、β-HCG(13460.22±502.62)mIU/mL,与对照组相比,数据差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者,终止妊娠者共5例。未终止妊娠,采用黄体酮等药物治疗后,治疗有效者共30例,有效率83.32%。结论早期先兆流产患者,多伴随血清孕酮和β-HCG指标降低症状。临床可视检出结果,考虑给予患者药物治疗,或建议终止妊娠,以提高孕妇的健康水平。     

微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植的实验研究

目的 探讨微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植治疗大鼠甲状旁腺功能低下症的效果。方法 应用微囊化技术，制备微囊化（海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊）新生猪甲状旁腺细胞，32只去甲状旁腺的Wistar大鼠随机分成微囊组、非微囊组、空囊组和对照组，分别移植微囊化新生猪甲状旁腺细胞、甲状旁腺细胞、空微囊及生理盐水。移植后监测血钙及甲状旁腺素水平40周，40周后回收移植物，透射电镜检查。结果 移植后，微囊组大鼠血钙及甲状旁腺素水平恢复到正常范围内，直至观察结束时（40周），透射电镜检查显示移植物存活良好；非微囊组、空囊组和对照组大鼠的血钙及甲状旁腺素水平无改善。结论 微囊化新生猪甲状旁腺细胞异种移植在不用免疫抑制剂情况下，可以在大鼠体内存活，且有功能；海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊对免疫活性细胞及抗体具有屏蔽作用。     

一种提高犬胰岛体外培养质量的方法

目的研究提高犬胰岛体外培养质量的方法。方法将犬胰岛分别进行普通培养 (A组)、常温(37℃)微重力培养(B组)和低温(26℃)微重力培养(C组),分别培养3、7、14和21 d, 并检测各组胰岛培养后收获率、存活率和功能。结果不同方法培养21 d后,B组和C组平均胰岛收获率为(66．2±4．1)％和(81．3±4．8)％高于A组的胰岛收获率(50．5±2．9)％,P<0．05。A组胰岛存活率降至(27．7±3．5)％,与B组的(49．7±3．2)％和C组的(64．8±4．7)％比较,P<0．05。 B组和C组DNA含量及胰岛素含量均维持较高的水平,B组和C组胰岛素储备能力较A组高,胰岛索刺激指数分别为(3．30±0．70)、(5．48±1．00)和(2．33±0．50),差异有统计学意义(P< 0．05)。结论低温微重力三维培养胰岛是提高胰岛培养质量的好方法。     

胚胎干细胞转基因治疗甲状旁腺功能低下症

目的　探讨小鼠胚胎干细胞 (TC 1)转基因治疗甲状旁腺功能低下症 (HPT)。方法包装出重组人甲状旁腺素 (PTH )基因的小鼠干细胞病毒 (MSCV) ,以lml重组病毒液加入 poly brene(终浓度 8mg/L)感染TC 1细胞 ,检测基因转导效率 ,PTH分泌情况 ;以及每 1× 10 5个 /mlTC 1细胞注入模型鼠体内各组小鼠血PTH和血钙变化情况。结果　获得滴度为 2× 10 7集落形成单位 (CFU) /ml的重组逆转录病毒 ,其感染TC 1的效率为 70 % ,每 10 6 未分化TC 1每 48h分泌PTH10ng。重组有PTH基因的TC 1细胞注入模型鼠体内后 ,在观察期间实验组动物血PTH和血钙均保持在接近正常值范围内。结论　MSCV介导外源PTH基因可高效转导TC 1并持续分泌PTH ;内环境并不是决定TC 1分化的唯一因素。经基因转导的TC 1可较好的改善模型鼠的症状 ,是未来细胞移植的一种潜在来源。     

老年人阑尾炎108例临床诊治体会

老年人阑尾炎临床表现轻、病理变化重,易穿孔。诊断靠临床表现,结合实验室检查,治疗以手术为主。