来源骨髓的树突状细胞培养方法特征及其合理时间

目的：观察从骨髓来源的免疫辅佐细胞树突状细胞的培养操作技术及合理的培养时间。方法：实验于2003-10／2004-12在卫生部细胞移植重点实验室进行。树突细胞来源为健康SD大鼠的骨髓细胞，分别加入4种细胞因子：重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子5μg/L，重组大鼠白细胞介素45μg/L，重组大鼠肿瘤坏死因子α 10μg/L，重组大鼠γ干扰素20μg/L，共培养2周。每隔2d加细胞因子1次，保持各细胞因子的浓度不变，分离树突细胞采用“培养黏附法”。在培养的第3天吸去上清后重新加入培养液，在培养2周后收获悬浮的树突状细胞，分离树突细胞采用“培养黏附法”。在培养的第1，3，5，7，9，11，13，15天用光学倒置显微镜观察细胞的形态；取一部分细胞在培养的第7，11，13，15天行流式细胞仪检查，并用PE标记的抗大鼠CD86单克隆抗体检测它的成熟度(CD86单抗阳性为成熟)。结果：①树突状细胞的形态：从培养第7天开始细胞周围开始逐渐伸出突起，第13天以后突起五六支左右，且长度逐渐缩短，成熟的树突状细胞伸出长短不等的突起，类似神经细胞的树突。②培养所得的树突状细胞数量：1只大鼠平均得到(1．18&;#177;0．21)&;#215;10^7。③树突状细胞的成熟度：培养第7，11，13，15天CD86单抗的阳性率分别为30％，80％，92%，94%，。结论：应用骨髓来源的树突状细胞，在两种常规的细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4基础上加入肿瘤坏死因子α和γ干扰素，培养2周，应用培养黏附法分离树突状细胞，可得到成熟的树突状细胞，且数量较多。     

微重力培养对大鼠胰岛细胞存活及形态的影响

我们应用微重力组织细胞旋转培养系统(RCCS)培养大鼠胰岛细胞,并观察其存活率及形态结构的变化。一、材料与方法1.实验动物与分组:2 5 0～3 0 0g雄性Wistar大鼠,由哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物室提供。随机将Wistar大鼠分成3组,每组8只。Ⅰ组:新鲜的胰岛不培养;Ⅱ组:普通培养组;Ⅲ组:模拟微重力培养组。2 .胰岛分离与纯化:无菌手术暴露胰腺,胶原酶V液多点注射,膨胀后取出剥去被膜,在含胶原酶V离心管中剪碎后,放入3 7℃5 %CO2 恒温培养箱,每5min振荡或吹打1次。3 0min后Hank’s液(含10 %小牛血清)终止消化。60 0 μm不锈钢网过…     

妊娠合并急性胆囊炎和胆结石的诊断与处理

急性胆囊炎和胆结石是妊娠期较为常见的急腹症 ,仅次于阑尾炎 ,居第二位。发病率为 1‰～ 8‰[1] 。 70 %的胆囊炎合并胆囊结石。妇女胆结石症发病率是男性的 2～ 3倍[2 ] 。由于妊娠期胆囊形态与功能的变化 ,胆囊组织细胞核及胞浆都具有雌激素、孕激素的受体 ,减轻胆囊对缩胆囊素的反应 ,胆囊排空率降低 ,残余量增加 ,空腹胆囊的容量增加 ,胆汁淤积 ,加上血清胆固醇升高 ,易导致胆囊炎、胆管阻塞、胆结石形成。胆石症占妊娠期黄疸病例的 7%左右。3 5 %的妊娠妇女有胆石症 ,服用口服避孕药是未服者的两倍[3 ] 。急性胆囊炎、胆石症的 2 5 %…     

人胎甲状旁腺细胞培养形态与功能的研究

目的 研究单层培养不同胎龄人胎甲状旁腺细胞的形态及功能。方法 将２０周至２８周水囊引产的胎儿按周龄分为３组，用胰酶消化法将胎儿甲状旁腺分离制成单细胞并培养，每日观察并记录甲状旁腺细胞的形态，每隔４８ｈ留取甲状旁腺细胞培养的上清液。测定上清液中甲状旁腺激素（ＰＴＨ）的浓度。结果 形态学观察发现胎儿甲状旁腺细胞培养４８ｈ后贴壁。细胞结构完整，群聚生长，但无明显细胞延展生长现象。第１１天以后细胞轮廓增强。胞质内可见颗粒状物，并可见悬浮的细胞碎片，上清液中ＰＴＨ水平第３、第１１天与其它各天均有显著性差异（Ｐ〈０．０１）；３个胎龄组之间ＰＴＨ水平差异无显著性（Ｐ〉０．０１）。结论 胎儿甲状旁腺细胞培养至第３天形态及分泌功能最佳；２０周内周龄对甲状旁腺细胞的分泌无影响。     

测定胰腺干细胞分子标志的临床意义

胰腺干细胞对于治疗各种胰腺损伤、胰腺炎、特别是糖尿病具有划时代的作用。而对胰腺干细胞分子标志的鉴定则是研究的基础。本文对目前已知的可认同为胰腺干细胞分子标志的起源、表达及意义进行探讨和分析,从而为胰腺干细胞研究工作的进一步开展奠定基础。     

胰十二指肠切除术中胰腺空肠吻合方法改进32例报告

胰十二指肠切除术 (Ｐａｎｃｒｅａｔｏｄｕｏｄｅｎｅｃｔｏｍｙ ,ＰＤ)最常见的并发症是胰瘘 ,学者们虽对胰空肠吻合方法进行了大量的改进 ,但仍时有胰瘘发生。我院对Ｂｒｅｗｅｒ等[1] 处理胰腺残端的方法稍做改进 ,在 1996年 10月至 1998年 10月 ,对 32例患者施行了改进的ＰＤ术 ,取得了明显效果 ,现报告如下。一、临床资料本组男 2 4例 ,女 8例 ,年龄 34～ 72岁 ,平均 5 6岁。病理学诊断 :胰头癌 16例 ,十二指肠乳头癌 6例 ,胆总管下端癌 6例 ,Ｖａｔｅｒ壶腹癌 4例。二、手术方法本组除行常规的ＰＤ加Ｃｈｉｌｄ法消化道重建外 ,手术…     

不典型阑尾炎穿孔15例分析

急性阑尾炎,典型病案诊断并不困难。但不典型病案,误诊率高。现将我院4年来遇到的15例报告如下。临床资料本组15例,男11例,女4例为肥胖体质,年龄最大者62岁,最小22岁。发病至入院时间最长72     

胆囊隆起性病变的早期诊断与外科治疗(附52例临床分析)

<正> 近年,随着B超广泛应用及普及,胆囊隆起性病变日趋增多。为了加深认识,对鉴别早期胆囊癌,正确诊惭与及时处理都具有重要的现实意义。我们自1980至1988年间,共诊治本病52例,经手术治疗和病理证实,占同期胆囊切除术的4.46％,其中哈医大二院28例,一院24例,现结合临床有关问题讨论如下。     

网膜囊内自体脾组织移植的临床观察

3年来,我们采用1cm~3去包膜小脾块移植手网膜囊内的方法,对21例脾外伤脾破裂患者进行脾切除自体脾组织移植手术。术后不同时期作免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM),补体 C_3、淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬功能试验,同位素铟(~(111)In)扫描等项检查。结果说明移植之脾组织存活良好,并较早地恢复了部分脾脏功能。从而证明了我们的移植方法安全可行且效果较佳。这对预防凶险的脾切除术后感染(OPSI)有一定的临床意义。     

胆囊隆起性病变的早期诊断与外科治疗

近年,随着B超广泛应用及普及,胆囊隆起性病变日趋增多。为了加深认识,对鉴别早期胆囊癌,正确诊断与及时处理都具有重要的现实意义。我们自1980至1988年间,共诊治本病52例,经手术治疗和病理证实,占同期胆囊切除术的4.46％,其中哈医大二院28例,一院24例,现结合临床有关问题讨论如下。