铜绿假单胞菌VgrG1a蛋白的原核表达及其人鼠嵌合型单抗的制备与鉴定

目的：探究铜绿假单胞菌Ⅵ型分泌系统VgrG1a蛋白的原核表达方法，并制备鼠源性和人鼠嵌合型单克隆抗体为抗铜绿假单胞菌感染提供了研究基础。方法：根据NCBI网站上查找到的VgrG1a序列合成重组质粒pET-21a-VgrG1a，转化大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）plysS进行诱导。通过免疫沉淀法和酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）对诱导得到的重组蛋白进行表达、纯化和鉴定。用纯化后的VgrG1a重组蛋白免疫BALB/c小鼠，制备鼠源多克隆抗体，并利用ELISA方法测定小鼠血清抗体的效价和特异性。通过P3X63Ag8.653骨髓瘤细胞融合小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞，再通过有限稀释法获得单克隆细胞。经多次ELISA筛选出能够稳定产出特异性抗体的细胞株。在公司测序后获得单克隆抗体的序列信息，并设计出含有此抗体的质粒，转染Expi293细胞，制备人源化单克隆抗体。结果：结果显示，实验成功构建了VgrG1a重组质粒，经探索在最佳表达诱导条件下（温度16℃，IPTG浓度0.5mM，诱导时间16小时），表达得到了重组蛋白VgrG1a，SDS-PAGE显示72kDa处重组蛋白浓度最高。检测制备的鼠源抗体在稀释到1/640000后效价仍较高，并且与目的蛋白能够能特异性的识别并结合。人鼠嵌合型单克隆抗体8A4F5对抗原VgrG1a亲和力高于鼠源单克隆抗体。结论：以上结果表明，该原核表达的重组蛋白具有良好的免疫原性，利用表达的重组蛋白制备的单克隆抗体具有较高的抗体效价和特异性，为进一步研究蛋白的结构与功能、研制相关的诊断试剂及疫苗提供了生物材料。     

在化学教学中渗透德育工作

教师都是德育工作者,教书育人是教师的职责.在教学过程中,怎样充分挖掘教材中蕴含的辩证唯物主义和爱国主义素材等德育内容,使之与化学知识教学有机地结合起来,并采取适宜的形式,潜移默化自然地渗透,使学生既学会了知识,又接受了教育,达到相辅相成、相得益彰的效果.本文就这方面的内容提出了自己的一些观点,希望与同行进行探讨.     

HPV基因分型检测与宫颈病变的相关性研究

目的了解粤西地区妇女21种人乳头瘤病毒(HPV)感染状况,探讨感染HPV不同亚型与不同程度宫颈病变的关系。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术(HybriMax)对5 556例患者进行HPV分型检测,677例经活检证实病变程度。结果 5 556例患者中,HPV阳性者901例(16.2%)。HPV亚型感染率前5位的是HPV52、16、58、531、1。各年龄段患者HPV检出率差异有统计学意义(P<0.05),≥51岁年龄段患者HPV检出率最高。41～50岁年龄段患者感染高危型HPV(HR-HPV)的构成比最高(P<0.05)。HPV感染率随宫颈病变严重程度增加而增加(P<0.05)。高度鳞状上皮内病变(HSIL)中HPV多型感染率最高(P<0.05)。HPV165、8、33型的检出率随宫颈病变的严重程度增加而增加(P<0.05),HSIL组与低度鳞状上皮内病变(LSIL)组相比,比值比(OR)分别为3.391(2.038～5.643)2、.409(1.188～4.888)2、.362(1.081～5.161)。结论本地区人群流行的HPV亚型为HPV52、16、58、531、1。HPV分型检测对宫颈病变的早期诊断与预后有重要意义。HPV165、8、33型致癌性较强,其中感染16亚型风险最大。     

甘草甜素的研究现状

早在《伤寒论》中已将甘草的功用归纳为(1) ;养心复脉、扶正泄痞、补中温阳、协调阴阳、柔肝调脾、缓急和胃、益气健中、健脾利水、泻火解毒、利咽清热、调和营卫、通达表理、祛痰止咳等十几种。甘草甜素 (ｇｌｙ ｃｙｎｈｉｚｉｎ ,ＧＬ)是从药用植物甘草根、茎中提取的一种有效活性成分 ,具有高甜度、低热量、安全无毒的特点 ,具有抗炎、抗病毒、抗变态反应、免疫调节等作用。近几年来 ,甘草甜素在治疗乙型肝炎、类风湿病、艾滋病等方面已取得巨大进展 ,受到国内外学者的高度重视。1　化学成分　甘草甜素(2 ) 是从甘草中分离出来的三萜类…     

高龄重症胆管炎患者的围手术期护理

重症胆管炎(ACST)病情发展快,病死率高达26~30%左右[1].尤其高龄患者由于全身重要脏器功能减退,代偿能力差,常有潜在的器官功能不全,极易导致多系统器官功能衰竭等严重后果,伴发疾病多,手术并发症高.     

134例腺病毒肺炎远期心电图随访调查

随访了１３４例腺病毒肺炎患儿，心电图检查结果，正常及大致正常９４例，异常改变４０例，其中左室高电压居首位，有１５例（３７．５％）其次为心动过速９例（２２．５％）完全，不完全右束支传导阻滞６例（１５％）少数为其他异常如心肌劳损，期前收缩等，Ｘ线胸片异常６８例，主要为支气管炎，肺炎，肺气肿等，心胸比例为０．６有２例，值得注意的是腺病毒肺炎急性期并发心肌炎３０例随访时只有２例心电图异常，为左室高电压，余     

护士长对护士与老年患者沟通的管理

我国已逐渐步入老龄化社会。随着年龄的增长，老年人的智力、学习能力、记忆力逐渐减低；同时由于社会改革的不断深人，人们的意识形态、生活方式不断发生变化，带来一系列的社会问题也影响着老年人；加之部分老年人性格孤辟、倔强，加上护士缺乏与老年患者沟通交流的技巧等，使护患沟通面临许多困难。     

补中益气汤加减治疗气虚发热28例

气虚发热是指过度劳累、饮食失调或久病失于调理,导致脾胃气虚、中气不足、阴火内生而引起发热.近年来我科用补中益气汤加减治疗气虚发热28例,疗效满意.现报道如下：     

细胞因子对退变椎间盘成份的影响

构成椎间盘的蛋白多糖含量随年龄增长而逐渐减少 ,其涵水能力下降 ,椎间盘高度和负重能力发生改变 ,影响了椎间盘的生物力学功能。椎间盘退变也与椎间盘组织中酶系活性改变和相关细胞因子的释放有关。这种成份变化的机制迄今仍不完全清楚。可能与椎间盘的生物化学和组织学性质改变有关 ,有多种细胞因子及酶可能在椎间盘退变的病理过程中发挥调节作用。现就细胞因子对退变椎间盘成份影响的研究状况综述如下 :1　椎间盘的成份及退变时的变化椎间盘主要由胶原、蛋白多糖、非胶原蛋白、细胞成份及大部分水组成。其中 ,蛋白多糖约占髓核干重的 30…     

小儿胸腹或背部烧伤透气性简易床的制作及应用

目的；小儿胸腹或背部烫伤，使用透气性简易床可预防皮肤发生湿疹。方法：用木方、钢筛网、轴钉、铁钉、寸带等材料制成夹凳式和筛式两种简易床。结果：已发生湿疹的小儿使用后，在短时间内自然痊愈；未发生湿疹的患儿使用后，可预防湿疹发生。结果：小儿透气性简易床，使用方便并可预测湿疹发生。