结核分枝杆菌38KD蛋白对小鼠树突状细胞的功能影响

【立论依据】 结核分枝杆菌(MTB)是结核病的病原菌,属胞内寄生菌。MTB感染机体后由抗原提呈细胞(APC)将抗原分子提呈给初始T细胞,诱导体内产生以细胞免疫为主的适应性免疫应答。树突状细胞(DC)作为提呈能力最强的APC在机体抗结核免疫中起着重要作用。有研究表明MTB可通过影响DC的功能来调节淋巴细胞的应答。如Palma 等发现MTB的PstS1蛋白可刺激DC诱导记忆性T细胞增殖并分泌更多的IFN-γ 和 IL-22;Byun 等则发现Rv0315(一种新的MTB抗原)可促进DC的成熟进而诱导Th1型免疫应答。而38KD蛋白作为MTB的一种具有强免疫原性的免疫原,其对树突状细胞的影响尚不清楚。本课题通过体外诱导表达MTB-38KD蛋白,刺激小鼠DC,研究其相关分子的变化情况,以明确38KD蛋白对DC的功能影响。 【设计思路】 构建38KD载体,诱导蛋白表达纯化后体外刺激小鼠DC,在不同时间点检测DC相关分子表达情况。 【实验内容】 38KD蛋白基因从MTB提取扩增验证后,将其构建到pET28a质粒上转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达并纯化,以不同浓度38KD蛋白刺激小鼠骨髓源DC,在不同时间点用流式细胞术检测表面CD11c、B7、MHC-Ⅱ等分子表达、ELISA检测培养上清IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ分泌情况。 【材料】 昆明小鼠、MTB菌株、质粒pET28a、BL21(DE3)、DNA纯化试剂盒、质粒提取试剂盒、SDS-PAGE配胶所需试剂、相关细胞因子ELISA检测试剂盒、荧光标记抗体(抗CD11c、B7、MHC-Ⅱ)等。 【可行性】 已有研究表明MTB的抗原成分与DC有关,38KD蛋白作为MTB的主要免疫原,极有可能对DC的功能有一定的影响;项目组已构建38KD蛋白原核表达载体,并参与发表相关科研文章,具有一定的结核研究基础,并可提供相关理论和技术支持。 【创新性】 本课题首次观察MTB-38KD蛋白对小鼠DC的影响,为后续抗MTB感染机制的研究提供理论基础。     

慢性肾功能不全合并高胆固醇血症患者进行联合降脂治疗的疗效及安全性

目的观察CKD2期合并高胆固醇血症患者使用氟伐他汀后仍未达标时加用依折麦布进行联合降脂治疗的疗效及安全性。方法 32例高危及极高危的高胆固醇血症患者接受氟伐他汀（40mg/日）3个月治疗后血脂水平仍未达标,再联合应用依折麦布（10mg/日）治疗3个月。观察治疗前后的血脂水平、肾功能的变化及不良反应的发生率。结果所有患者接受氟伐他汀治疗后血清TG、TC、LDL-C、Lp（a）均明显下降,HDL-C明显升高,P〈0.01。在氟伐他汀治疗基础上加用依折麦布可使TC、LDL-C进一步下降,P〈0.01。加用依折麦布后45%的高危患者及25%的极高危患者血脂达标。治疗过程中未出现严重不良事件,所有患者肾功能保持稳定。结论 CKD2期合并高胆固醇血症的患者,单用氟伐他汀不能达标时,联合依折麦布治疗,能够更好的达到血脂目标水平,短期使用安全性好。     

液基细胞学结合阴道镜检查在北京市社区妇女宫颈病变筛查中的意义

目的探讨宫颈液基细胞学及阴道镜检查在北京市社区妇女宫颈病变筛查中的临床意义。方法2006年6月至2007年6月对北京市展览路社区的795位20～54岁有性生活的妇女进行筛查。筛查对象接受妇科检查时,留取宫颈超柏氏薄层液基细胞学检测标本,并对宫颈细胞学异常者行阴道镜检查及活组织检查。结果宫颈细胞学阳性[≥ASC-US（不能明确意义的不典型鳞状细胞）]45例,占5．7％（45／795）。其中ASC-US33例,占73．3％（33／45）;低度鳞状上皮内病变8例;高度鳞状上皮内病变3例;不典型腺细胞1例。细胞学阴性750例,占94．3％（750／795）。宫颈细胞学阳性的45例中,5例拒绝行阴道镜检查,占11．1％（5／45）。在行阴道镜活组织病理检查的40例中,慢性宫颈炎11例（27．5％）;宫颈湿疣14例（35．0％）;宫颈上皮内瘤样病变（CIN）1为7例（17．5％）;CIN2为3例（7．5％）;CIN3为4例（10．0％）;早期浸润癌1例（2．5％）。细胞学阴性的750例中,宫颈湿疣2例（0．3％）;CIN1为5例（0．7％）;宫颈低级别腺上皮内病变1例（0．1％）。宫颈液基细胞学筛查CIN1及以上宫颈病变和宫颈癌的敏感度71．4％,特异度94．2％,阳性预测值37．5％,阴性预测值99．2％;筛查CIN2及以上宫颈病变和宫颈癌的敏感度100．0％,特异度96．0％,阳性预测值20．5％,阴性预测值100．0％。结论应重视并及时进行北京市社区人群宫颈病变的早期筛查,薄层液基细胞学结合阴道镜活组织检查及病理学检查,对提高早期宫颈癌筛查的准确性效果明显。     

基于数据挖掘方法分析中药外用疗法治疗颈肩腰腿痛用药规律

[目的] 分析和挖掘治疗颈肩腰腿痛的中药外用处方用药组方规律。[方法] 通过中医传承辅助平台（V2.5）软件,分析自1980年1月至2017年5月期间已发表文献中有效的中药外用处方的用药组方规律。[结果] 共筛选出145个有效处方,包含188味中草药,使用频次总和为1 582次,其中红花出现频次最高。频次在30次以上的两味药组合有14组;频次在15次以上的三味药有56组,四味药有8组。通过药物之间的关联规律,演化得出三味药的核心组合16个,四味药的核心组合2个,新处方2个。[结论] 临床中治疗颈肩腰腿痛的中药外用药物以祛风湿类药物为主,兼配以活血化瘀类、补虚类、清热类、解表类、理气类、温里类等药物,共凑祛风除湿、活血通络之效。     

西藏当归同岷县当归挥发油、总黄酮含量及抗氧化活性对比研究

目的：考察西藏昌都、那曲当归根与道地药材岷县当归根挥发油、总黄酮含量和体外抗氧化活性,为当归资源的开发利用提供药源和理论依据。方法：以《中华人民共和国药典》2015版中挥发油测定法通则2204乙法为依据,提取各地产当归根中的挥发油并进行含量对比;采用乙醇浸提,结合加热回流提取各地当归根中的总黄酮;采用NaNO₂-AlCl₃比色法,以芦丁为对照品,对当归中总黄酮进行含量测定。采取浸泡、超声、过滤、烘干、溶解、浓缩得乙醇提取物,以总抗氧化能力及对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力综合评价各地产当归的体外抗氧化活性。结果：与道地药材岷县当归根比较,西藏昌都、那曲当归根挥发油含量均较低(***P<0.001),且未达到“药典”标准要求;然而,西藏昌都、那曲当归根总黄酮含量分别为3.076 mg·g^-1、2.681 mg·g^-1,与岷县当归根中总黄酮含量1.715 mg·g^-1比较,含量显著高且差异具有统计学意义(***P<0.001)。与岷县当归根比,西藏昌都...     

胃癌术后硬膜外镇痛与静脉镇痛对比的系统回顾与Meta分析

目的比较硬膜外与静脉镇痛在胃癌根治性手术中应用的效果。方法对胃癌根治术中硬膜外镇痛与静脉镇痛的随机对照试验进行系统回顾和荟萃分析。主要研究结果为术后24 h疼痛评分,次要结果包括术后并发症发生率、首次排气时间、住院时间。结果有6项随机对照研究共计393例患者纳入研究,其中英文4篇,中文2篇。Meta分析结果显示,与静脉镇痛组相比,硬膜外镇痛组术后24 h静息状态(WMD=-0.74,95%CI:-1.35^-0.13,P=0.02)、运动状态疼痛评分均较低(WMD=-1.5,95%CI:-1.95^-1.05,P<0.001),术后恶心、呕吐(RR=0.32,95%CI:0.18~0.58,P<0.001)及呼吸系统并发症发病率(RR=0.50,95%CI:0.29~0.85,P=0.01)较低,差异均具有统计学意义,术后泌尿系统并发症两组之间差异无统计学意义(RR=0.87,95%CI:0.38~1.96,P=0.73),但低血压的发生高于静脉镇痛组(RR=3.27,95%CI:1.28~8.32,P=0.01),术后首次排气时间(WMD=-14.01,95%CI:-22.85^-5.17,P=0.002)、术后住院时间(WMD=-0.69,95%CI:-0.90^-0.49,P<0.001)均短于静脉镇痛组。结论胃癌根治术患者镇痛的选择,硬膜外镇痛无论是静息还是动态时镇痛效果均优于静脉镇痛,虽会增加术后低血压发病率,但与肺部并发症、恶心呕吐的等并发症减少有关,并且具有促进胃癌术后肠道功能恢复及缩短住院时间的优势。     

儿童咯血介入栓塞治疗后复发8例

【摘要】 目的 分析儿童咯血经导管支气管动脉栓塞术（BAE）后复发的原因,为预防复发提供支持。方法 回顾性分析2014年6月至2018年6月46例咯血患儿经BAE治疗后复发的8例临床资料,通过支气管动脉再次造影综合分析复发原因。结果 BAE术后8例咯血复发患儿再次造影发现,复发咯血由原责任血管再通所致2例,异常供血支气管动脉遗漏栓塞所致2例,病灶新生侧支循环供血动脉建立所致3例,血管变异超选失败所致1例。二次BAE治疗后随访6个月至3年。7例患儿未再出现咯血症状,1例再次出现咯血,给予外科右肺下叶切除后治愈。结论 BAE可有效治疗咯血,完全栓塞是关键。但术中造影应仔细,避免遗漏,再通和新发动脉也值得注意,是咯血复发原因之一。     

产前应用地塞米松对晚期早产儿振幅整合脑电图的影响

目的 通过分析产前应用地塞米松的晚期早产儿振幅整合脑电图(Amplitude integrated electroencephalogram, aEEG)的数据变化特点,探讨分娩前应用地塞米松对晚期早产儿神经系统的影响。方法 收集58例晚期早产儿在出生后72 h内及出生后7 d的aEEG资料,分析带宽、睡眠周期、边界电压及背景活动,对比产前2周内曾应用地塞米松与产前未应用地塞米松的晚期早产儿aEEG数据资料。结果 产前应用地塞米松组纳入30例晚期早产儿,产前未应用地塞米松组纳入28例晚期早产儿,在出生后72 h内aEEG参数比较中,产前应用地塞米松组患儿活动睡眠期的上边界电压低于未应用组,活动睡眠期及安静睡眠期的下边界电压高于未应用组,差异有统计学意义(P<0.05);在出生后7 d的aEEG参数对比中,产前应用地塞米松组患儿活动睡眠期及安静睡眠期的下边界电压高于未应用组,安静睡眠期的带宽窄于未应用组,差异有统计学意义(P<0.05)。而在背景活动与睡眠周期的比较中,两组患儿在不同aEEG采集时间段内,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 产前应用地塞米松可使晚期...     

BRSK2、ZFX及CTHRC1蛋白在胃癌组织中的表达及与病理参数、预后的关系研究

目的 研究脑选择性蛋白激酶2(BRSK2)、X染色体连锁锌指蛋白(ZFX)及胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)在胃癌组织中的表达及与病理参数、预后的关系.方法 回顾性分析我院2016年1月—2018年1月收治的58例胃癌患者的临床资料,按照部位不同分为胃癌组织组和癌旁组织组(距离胃癌组织5 cm以上的正常胃黏膜组织...     

从“煎厥”探析可逆性后部脑白质综合征中医病机

目的 探析可逆性后部脑白质综合征(reversible posterior leukoencephalopathy syndrome, RPLS)的中医病机,以期为中医辨治急重症提供理论依据。方法 依据《素问·生气通天论篇第三》描述“煎厥”与RPLS临床表现极为相似及吻合,基于“煎厥”发于“阳气耗”“阴精亏”及“脏精绝”,分别从“脏腑”“阴阳”及“虚实”等方面分析RPLS中医病位及病机。结果 中医理论认为二者病位均在肝肾,中医病机均属本虚标实,本虚为肝肾阴虚、肝阳上亢,标实为痰湿、瘀血内阻。结论 用“煎厥”理论认识RPLS的病机,为中医药参与防治危急重症提供理论支撑。