慢性粒细胞性白血病慢性期10年以上者三例特征分析

尽管干扰素等药物的使用 ,慢性粒细胞性白血病 (慢粒 )的慢性期仍仅为 3～ 4年。在临床我们观察到部分患者可以长期处于慢性期 ,对这类患者进行研究对慢粒的诊治可能有所启迪。我们报道 3例生存期大于 1 0年者 ,其中 1例生存期大于 1 8年者急变后经常规化疗无效 ,改为亚砷酸后再次获缓解 ,缓解后用ＧＬＩＶＥＣ维持治疗 ,该患者一直处于慢性期 ,现报告如下。　　例 1 ,男 ,37岁 ,不明原因乏力、盗汗、消瘦就诊。查体 :无浅表淋巴结肿大 ,皮肤无出血点 ,胸骨轻压痛 ,脾肋下1ｃｍ。血常规 :ＷＢＣ 2 0× 1 0 9/Ｌ ,Ｈｂ1 1 2 ｇ/Ｌ ,ＰＬＴ 32…     

非清髓性外周血干细胞移植治疗慢性髓系白血病慢性期及加速期的疗效观察

本研究观察非清髓造血干细胞移植对慢性髓系白血病慢性期（CML—CP）、慢性髓系白血病加速期（CML—AP）的疗效。用福达华（F）30mg／m^2×6天，白消安（B）4mg／kg×2天，环磷酰胺（CTX）350mg／（m^2·d）×2天，伍用或不伍用阿糖胞苷（mra—C）对24例HLA全相合及1个位点不合者进行预处理，并对其造血恢复等指标进行动态观察。结果表明，24例患者造血顺利恢复，ANC〉0．5×10^9／L的中位时间平均为移植后13天，BPC〉20×10^9／L的中位时间平均为移植后11．5天。移植后30天经短串重复系列（STR—PCR）检测其中12例植活患者，结果9例为完全嵌合状态（CDC），3例为混合嵌合体。移植后180天时所有存活的18例患者均为CDC。中位随访24个月（4—48月），18例患者无病存活，2例患者死于严重aGVHD，1例死于cGVHD，2例死于间质性肺炎，1例死于复发。结论：非清髓造血干细胞移植是CML慢性期的有效治疗手段，对于加速期患者亦有良效。     

超声空化逆转K562／A02细胞对阿霉素的耐药性研究

本研究观察低频低功率超声联合阿霉素（adriamycin，A02）对白血病耐药细胞株K562／A02的影响，寻找合适的干预参数，探讨耐药细胞耐药逆转的可能机制。取对数生长期的白血病K562／A02细胞株，将研究对象分为空白组、单纯阿霉素组（A02）、单纯超声组（US）、阿霉素加超声组（A02＋US）共4组。细胞在24孔培养板上受低频低功率超声作用，用台盼蓝拒染法、MTT法检测细胞活性，应用瑞氏染色法和流式细胞术分别检测细胞凋亡和药物浓度，扫描电子显微镜观察细胞表面变化。结果显示，频率20kHz、声强0．25W／cm^2。、作用时间60秒的超声，可显著降低阿霉素的LC50;当声强0．50W／cm^2、作用时间大于30秒的超声，对细胞有急性杀伤作用。细胞经低频超声作用后细胞膜表面出现直径大约1-2μm的小孔，细胞内阿霉素的药物浓度增加，细胞凋亡增强。结论：适当参数的超声辐射通过超声空化导致肿瘤细胞产生声孔效应，使阿霉素对耐药细胞株的抑制作用增强，从而逆转耐药细胞株的耐药性.     

血小板衍生膜微粒对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

本研究探讨血小板衍生膜微粒(platelet-derived membrane microparticles,PMP)对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管形成的影响。用凝血酶激活血小板释放出PMP,再经高速离心分离出PMP,用流式细胞仪检定PMP,并用BCA法测定PMP的含量。将PMP接种于鸡胚绒毛尿囊膜上,观察PMP对CAM血管生成的影响。结果显示:当PMP的浓度为80μg/ml时,孵育72小时后混合纤维素滤膜周围可见到放射状密集生长的血管网,血管分支数为112.5±11.31,血管面积为(6.19±1.29)(,而在对照组无特异性密集血管生成,血管分支数为82.6±8.05,血管面积为1.78±0.33,二组比较有显著性差异(P<0.05);而与VEGF组比较,后者的血管分支数为128.4±10.02,血管面积为7.44±1.36,二组比较差异无显著性。结论:PMP对CAM新生血管的生成有促进作用。     

自体及异体CD3单克隆抗体激活杀伤细胞对正常造血细胞的影响

为探索自体及异体CD3单克隆抗体激活杀伤（CD3AK）细胞对正常造血细胞的影响。以固化抗CD3单克隆抗体联合小剂量IL-2诱导CD3AK细胞。采用流式细胞术（FCM）检测CD3AK细胞的表型变化。并检测正常骨髓经与自体或异体CD3AK细胞培养后CD34^ 细胞的比例变化。用集落培养检测正常骨髓经与自体或异体CD3AK细胞共同培养后CFU-GM的计数变化。结果显示：3-5μg/ml固化抗CD3单克隆抗体联合100U/mlIL-2可有效地激活CD3AK细胞;正常骨髓与异体CD3AK细胞培养6小时后CD34^ 细胞的比例下降32.37%。正常骨髓与自体CD3AK细胞共同培养6小时后CD34^ 细胞比例升高5.49%;CFU-GM集落培养显示正常骨髓与异体CD3AK细胞共同培养6小时后CFU-GM的计数下降20.44%,而正常骨髓与自体CD3AK细胞共同培养后CFU-GM的数量下降3.39%。上述结果表明,异体CD3AK细胞与正常骨髓造血细胞短期共同培养可产生一定的抑制作用。自体CD3AK细胞与骨髓造血细胞短期共同培养无明显影响。     

联合应用汉防己甲素和他莫西芬逆转K562/VCR细胞株多药耐药

目的：研究多药耐药基因（mdrl)及P－糖蛋白（Pgp)单独及联合应用汉防己甲素（Tet)和他莫西芬（Tmx)时,逆转多药耐药的效应,方法：使用MTT法对长春新碱（VCR）,Tet,Tmx单独及联合使用时抑制K562和K562／VCR细胞株的作用进行研究。结果：当单独及联合使用Tet和Tmx时,它们不会增加VCR对K562细胞株的抑制率,但能明显逆转K562／VCR细胞株对VCR的多药耐药,结论：Tet和Tmx单独使用均能逆转多药耐药,联合使用具有明显的协同作用。     

异基因外周血干细胞移植二例

目的 观察异基因外周血干细胞移植造血恢复情况以及主要血型不合红系恢复情况。方法 对2例患者行异基因外周血干细胞移植并对其造血进行动态观察。结果 2例患者均较快植入，1例主要血型不合者未进行血浆交换红系亦较快恢复。结论 异基因外周血干细胞移植造血恢复快，主要血型不合患者只进行标准预处理而不进行血浆置换红系亦可较快恢复。     

以四肢淀粉样变为主要表现的多发性骨髓瘤一例

淀粉样变性是多发性骨髓瘤的一种特殊的临床表现，为免疫球蛋白轻链与多糖的复合物沉淀于组织器官中所致，可累及多种脏器，最常见于心脏、肝脏和肾脏，也可见于消化道、神经、舌、腮腺，但皮肤受累的相关报道极少，尤其是四肢严重受累的病例，国内外均很罕见。而继发于多发性骨髓瘤的淀粉样变性在我国的发生率仅为1．6％～5．6％，此类患者预后较差，     

低氧诱导因子抑制剂对白血病细胞株HIF-1α和VEGF表达及诱导细胞凋亡作用的研究

本研究探讨低氧诱导因子抑制剂3-(5′-hydroxymethyl-2′-furyl)-1-benzylindazole(YC-1)对人急性白血病病细胞低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)和血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的调节及诱导细胞凋亡作用。应用DAPI染色检查凋亡细胞的形态;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测K562、U937、Jurkat白血病细胞株hif-1α和vegf mRNA表达以及YC-1对U937细胞hif-1α、vegf mRNA表达影响;Western blot检测YC-1对U937细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达,以及BAX、BCL-2、caspase-3蛋白变化,分析YC-1诱导U937细胞凋亡的可能机制。结果表明:在3种白血病细胞株均可见hif-1α和vegf mRNA表达。4μmol/L YC-1处理U937细胞(0、8、16和24小时)后,可见凋亡细胞出现的典型凋亡形态特征;流式细胞术检测的细胞0、8、16和24小时凋亡率分别为(4.87±0.70)%、(27.27±2.00)%、(51.53±2.81)%及(60.5±3.20)%;vegf mRNA表达下调,而hif-1αmRNA表达无明显变化;HIF-1α蛋白、VEGF蛋白和BCL-2蛋白表达下调,而BAX和caspase-3蛋白表达上调,BAX/BCL-2比率升高并呈时间依赖性(r=0.973,p0.01)。结论:3种白血病细胞株均显示hif-1α和vegf mRNA表达,YC-1可以抑制白血病细胞HIF-1α蛋白表达,进而下调VEGF,并通过上调BAX/BCL-2比率、caspase-3蛋白表达诱导细胞凋亡。     

维生素K2对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1增殖抑制作用的实验研究

目的研究维生素K2(VK2)对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1的生长抑制作用.方法采用光镜或电镜技术观察VK2作用于MUTZ-1细胞株后细胞形态和超微结构的改变;应用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测细胞的增殖抑制作用.结果VK2作用于MUTZ-1 72 h后呈现典型凋亡细胞的形态学改变, 且随着VK2浓度的增加和作用时间的延长凋亡细胞所占的百分比增高;MTT结果显示10 μmol·L-1及以上浓度的VK2处理MUTZ-1细胞株后细胞生长明显受抑,并呈浓度依赖性,与对照组比有显著性差异(P＜0.05);且随着VK2作用时间的延长细胞凋亡率也逐渐增高,且呈明显的时间依赖性(P＜0.05).5μmol·L-1的VK2有促MUTZ-1细胞株增生的趋势,但与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论低浓度VK2(5μmol·L-1)对MUTZ-1细胞株有促增殖趋势;较高浓度的VK2(10～40μmol·L-1)主要是通过诱导MUTZ-1细胞凋亡而抑制其增殖.