吉西他滨诱导人肺癌细胞株SPC-A-1凋亡及对HMGA1基因表达的影响

[目的]探讨吉西他滨对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及HMGA1基因表达的影响。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察吉西他滨对人肺癌细胞株SPC-A—1增殖的抑制效应：利用DNA琼脂糖凝胶电泳法、细胞AO／EB荧光染色法及流式细胞术检测吉西他滨诱导肿瘤细胞凋亡的作用：采用逆转录一多聚酶链反应技术（RT-PCR）观察吉西他滨对人肺癌细胞株SPC-A-1凋亡相关基因HMGA1mRNA的影响。[结果]吉西他滨对人肺癌SPC-A-1细胞株增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;0．1μmol／L、1μmol／L和10μmol／L浓度吉西他滨处理细胞72h后,AO／EB荧光染色法计算细胞凋亡百分比分别是18．56％±1．04％、39．45％±0．83％、48．48％±0．85％（P〈0．05）;细胞经1μmol／L的吉西他滨处理72h后,DNA琼脂糖凝胶电泳法显示有特异性的DNA梯状条带;0．1μmol／L、1μmol／L和10μmol／L吉西他滨处理细胞72h后,凋亡率分别为20．65％±0．83％、38．53％±0．97％、51．48％±1．04％,对照组为5．19％±0．89％（P〈0．05）：随着吉西他滨浓度的增加．HM—GA1基因表达下调,各组与β-actin条带灰度比值分别为0．856±0．030、0．696±0．007、0．543±0．037,对照组为0．907±0．007（P〈0．05）。[结论]吉西他滨可抑制人肺癌SPC-A—1细胞株的生长,促进凋亡,可能的机制和下调HMGA1基因表达有关。     

脊髓再程放疗的基础与临床研究进展

随着肿瘤患者生存逐渐延长,首次放疗后在照射野内或旁复发或诊断新发肿瘤病例显著增长。但各种正常组织修复放疗损伤能力差异很大,因此合理的再程放疗决策需要深入认识各OAR放疗后长期修复的能力。脊髓是放疗计划中首先需要限制剂量的OAR,放射性脊髓炎大多在放疗结束后6月至 3年内发生^[1],其临床症状表现决定于脊髓平面、脊髓受损范围及病变程度,早期症状有浅感觉异常,肌无力等,随着病变进展,症状多样化,如步态不稳、轻瘫、偏瘫等。放射性脊髓炎主要是白质病变,外侧束多见,血管内皮损伤是放疗损伤的重要机制,其次有神经髓磷脂崩解、轴突变性、神经胶质细胞肿胀,镜下形态学可见血管壁纤维素样坏死、管腔闭塞、外渗及白质凝固性坏死或软化灶^[2-3]。笔者对脊髓再程放疗的动物实验及临床数据进行文献综述,以期有助于临床上参考。     

CEA在评估直肠癌新辅助放化疗后肿瘤退缩中的意义

目的探讨局部晚期直肠癌术前新辅助放化疗疗效的预测因素,以指导直肠癌的个体化治疗。 方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院2014年3月至2015年3月间收治的28例局部进展期直肠癌患者的临床病理资料,利用化学发光法检测新辅助放化疗前、后直肠癌患者血清癌胚抗原（carcino embryonie antigen,CEA）水平,以放化疗后肿瘤TNM分期降期与否和肿瘤消退程度（肿瘤长径）作为同步放化疗疗效的判断标准,分析CEA检测值的变化与直肠癌患者新辅助治疗疗效及预后等临床特征之间的关系。 结果病理完全缓解组(pathologic complete response,pCR)组与非pCR组患者,CEA的水平在新辅助治疗前后无统计学差异(p=0.069),新辅助治疗后,CEA的下降程度在两组中未见差异（p=0.827）。经新辅助治疗后肿瘤长径退缩显著组,CEA下降程度也较显著,CEA下降≥50%组内,新辅助治疗后肿瘤长径退缩≥25%的患者占70.6%,CEA下降<50%组内,此部分患者仅占54.6%。 结论新辅助放化疗后CEA明显下降的患者其肿瘤退缩更显著,提示CEA可能作为一项直观的评估直肠癌新辅助放化疗的疗效指标。     

鼻咽癌部分危及器官勾画差异对剂量分布的影响

目的 探讨全盲下危及器官（OARs）勾画指南的统一学习对鼻咽癌放疗时OARs勾画的体积及受照剂量分布差异的影响。方法 在全盲模式下,由4名医师对8例鼻咽癌患者在CT横断面上勾画双侧颞叶、内耳、中耳,后统一学习OARs勾画指南,比较学习前后上述OARs体积的差异及其受照射剂量的变化。结果 学习前后内耳及中耳绝对体积没有明显差异（P＞0.05）;学习后,左右两侧的颞叶的体积均较学习前有所缩小（P＜0.05）;上述3种OARs的一致性指数（AI）在学习后明显提高（P＜0.05）。从剂量学来看,与学习前相比,除了左侧内耳Dmean,右侧内耳的Dmean及两侧内耳的V50均有统计学差异（P＜0.05）;除了左侧中耳Dmean,右侧中耳的Dmean及两侧中耳的V50均无统计学差异（P＞0.05）;右侧颞叶的D2和左侧颞叶的Dmax、D1、D2在学习前后存在明显差异（P＜0.05）。指南的统一学习使双侧内耳Dmean和V50、左侧中耳的V50、左侧颞叶D1和右侧颞叶D2的Kappa值均明显提高（P＜0.05）。结论 不同观察者勾画的OARs体积和剂量之间存在明显差异,统一学习明显提高了颞叶、中耳及内耳勾画的准确性及一致性,从而使放疗计划的评价更加客观。     

原发性肝癌SBRT研究进展

SBRT杀伤肿瘤细胞的机制可能与常规分割放疗不同,可体现在以下两个方面:单次大剂量照射可使肿瘤细胞膜破坏,释放肿瘤特异性抗原,成为“原位肿瘤疫苗”,继而可激发免疫系统杀灭残余肿瘤;当单次分割剂量>8~10 Gy时,照射1~6 h后可通过酸性鞘磷脂酶途径介导血管内皮细胞快速凋亡,进而肿瘤血管闭塞,出现二次肿瘤杀伤效应。本文综述原发性肝癌利用SBRT临床研究进展,旨在了解其是否通过上述机制增加了临床疗效。     

神经胶质瘤细胞株H MGA1基因沉默对吉西他滨化疗敏感性的影响

目的探讨神经胶质瘤细胞株SHG-44高迁移率族蛋白A1(HMGA1)基因表达下调后对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法用HMGA1 siRNA慢病毒载体及阴性siRNA慢病毒载体分别转染SHG-44细胞。稳定转染HMGA1 siRNA的细胞为阳性组、稳定转染不含HMGA1的细胞为阴性组,未转染的细胞为对照组。RT-PCR和Western blot检测HMGA1 mRNA和蛋白的表达,MTT法和克隆集落形成实验检测吉西他滨对细胞生长、增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果阳性组HMGA1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性组和对照组(P<0.05)。经吉西他滨处理后,MTT表明阳性组细胞生长抑制率显著高于阴性组,阳性组IC50为(0.279±0.013)μg/ml,明显低于阴性组的(0.746±0.020)μg/ml(P<0.05)。克隆形成实验表明阳性组克隆形成率显著低于阴性组(P<0.05),而细胞凋亡率显著高于阴性组(P<0.05)。结论神经胶质瘤细胞SHG-44中HMGA1基因沉默后,显著增强SHG-44细胞对吉西他滨的化疗敏感性。     

体积对自动勾画软件勾画危及器官准确性的影响

【摘要】目的:评价基于人工智能的自动勾画系统（AccuContour自动勾画软件）对危及器官（OAR）勾画的几何准确性,探讨OAR自动勾画的几何准确性是否受OAR体积的影响。方法:选取161例患者,其中头颈部、胸部、盆腔肿瘤患者各40例,腹部肿瘤患者41例。分别采用AccuContour自动勾画软件和手动勾画的方式对晶体、视神经、眼球、垂体、脑干、腮腺、下颌骨、双肺、心脏、双肾、肝脏、直肠、膀胱、股骨头等部位进行勾画。统计各个勾画部位的戴斯相似系数（DSC）、豪斯多夫距离（HD）、Jaccard系数以及体积这4项参数,并使用DSC、Jaccard系数和HD评价自动勾画的几何准确性。对DSC、HD、Jaccard系数与体积进行Spearman相关性分析,并对晶体、视神经、眼球、腮腺、颞颌关节、双肺、双肾、股骨头等成对部位的DSC、HD、Jaccard系数之间进行Wilcoxon配对秩和检验。结果:各个部位的DSC均数均大于0.7;头颈部的Jaccard系数均数为0.557~0.880,其中最低的为右视神经,最高的为下颌骨。头颈部、胸部、盆腔的HD均数分别小于8、22、16 mm;除肝脏（HD=34.563 mm）外,腹部其他部位的HD均数均小于19 mm。DSCall、Jaccardall系数及HDall的大小与体积具有相关性（rDSC=0.757, PDSC=0.000;rJaccard=0.775, PJaccard=0.000;rHD=0.761, PHD=0.000）。晶体、视神经、眼球、垂体、脑干、腮腺、下颌骨、双肺、膀胱、股骨头等部位的DSC和Jaccard系数与OAR体积具有相关性（P<0.05）,HD与体积不具有相关性（P>0.05）。双肺之间的DSC和Jaccard系数差异具有统计学意义（PDSC＝0.000, PJaccard＝0.000）。结论:AccuContour自动勾画软件对于OAR的勾画具有较高的准确性,自动勾画的几何准确性受OAR体积大小的影响。     

XPA单核苷酸多态与晚期非小细胞肺癌对铂类药物化疗敏感性的相关性研究

目的：DNA修复能力与肿瘤细胞对铂类药物的敏感性密切相关。该研究利用一种新型单核苷酸多态性（SNP）的检测方法，探讨DNA修复基因XPA的SNP与非小细胞肺癌（NSCLC）患者对顺铂（ciaplatin）或卡铂（carboplatin）为主的化疗方案敏感性的关系。方法：经病理学确诊的晚期NSCLC患者96例，采用顺铂或卡铂为主的方案化疗，2～3个周期后进行临床疗效评价。根据cDNA芯片原理制作一种目的基因芯片，利用双色荧光探针杂交进行咒蹦的A23G多态的基因分型，比较不同基因型对化疗敏感性的影响。组间比较采用χ^2检验，比值比（OR）及其95％可信区间（CI）由logistic回归模型计算。结果：成功进行基因分型，野生型、杂合型和突变型的叠加荧光分别显示为绿色、黄色和红色。携带咒蹦23A／A、A／G和G／G基因型的患者，化疗有效率（完全缓解＋部分缓解）分别为35．7％、46．9％和16．7％，差异有显著性统计学意义（P〈0．05）；携带G／G基因型患者的化疗失败风险是携带至少1个A等位基因（A／G和A/A基因型）个体的3．57倍；但G等位基因携带者的疗效与A等位基因携带者的相似，差异无统计学意义（30．9％ vs 41．7％，P=0．2045）。结论：该芯片检测方法准确、高通量且价格低廉，适用于大规模样本SNP调查；XPA基因多态与NSCLC患者对铂类药物化疗的敏感性相关。     

T1～2N0M0期食管癌根治性放疗的预后分析：泛京津冀食管肿瘤多中心协作组多中心回顾性研究(3JECROG R－01H)

目的探讨T1～2N0M0期食管癌根治性放疗的预后及其影响因素。方法回顾性分析泛京津冀食管癌协作组10家医疗中心的196例行根治性放疗的T1～2N0M0期食管癌患者的临床资料, 其中单纯放疗118例, 放疗辅助化疗78例;三维适形放疗(3DCRT)96例, 调强放疗(IMRT)100例。计划靶区(PTV)和大体肿瘤区(GTV)中位照射剂量均为60 Gy。中位随访59.2个月。预后影响因素的单因素分析采用Log rank检验, 多因素分析采用Cox模型回归分析。结果全组患者双肺20 Gy剂量照射的体积占总体积的百分比(V20)为(18.65±7.20)%, 平均剂量为(10.81±42.05)Gy。心脏V30为(14.21±12.28)%, 脊髓最高剂量为(39.65±8.13)Gy。放射性肺炎发生率为14.80%(29/196), 放射性食管炎发生率为65.82%(129/196), 均以1～2级为主, 无4级以上急性不良反应。全组患者中位总生存时间和无进展生存时间分别为70.1和62.3个月, 1、3、5年总生存率分别为86.1%、65.2%和55.8%, 1、3、5年无进展生存率分别...     

汉防己甲素联合柔红霉素对K562／A02细胞株P21蛋白和P糖蛋白表达的影响

本研究旨在探讨汉防己甲素（TET）对人慢性髓系白血病（CML）急性红白血病细胞株K562／A02多药耐药的逆转作用,及其逆转耐药与细胞周期依赖性激酶抑制因子（p21）、P糖蛋白（P—gp）及其基因的关系,为TET的临床应用提供新的理论基础。K562／A02细胞实验分组为：①单用柔红霉素（DNR）对照组;②DNR＋TET0．5mg／L组;⑧DNR＋TET1．0mg/L组;④DNR＋TET2．0m8／／L组。采用Western blot法检测实验各组K562／A02细胞P21的表达。采用流式细胞仪（FCM）检测实验各组细胞P—gp的表达,采用半定量PCR（RT—PCR）测定细胞MDR1基因mRNA表达水平。结果表明：K562／A02细胞中P21蛋白的表达随着TET浓度的增加而增强,P—gp蛋白的表达随着TET浓度的增加而减低。K562细胞中mdr1基因几乎无表达,K562／A02细胞中mdrl基因高表达,随着TET浓度的增加K562／A02细胞mdrl基因表达不断降低。结论：TET对K562／A02耐药具有逆转作用且呈浓度依赖性,其逆转耐药可能与其上调P21蛋白的表达、下调mdrl及P—gp的表达有关,