北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β内酰胺酶(ESBL)及质粒型Ampc酶菌株的比率及其基因型。方法收集北京两家教学医院2001--2002年产ESBL且对头孢西叮耐药的59株大肠埃希菌和21株肺炎克雷伯菌，采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点；接合试验证实酶基因有无可转移性，并用碱裂解法提取质粒；采用多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction，MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gelel ectrophoresis，PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果北京两家医院ESBL中质粒型AmCZ酶的发生率，大肠埃希菌分别为0和2％，肺炎克雷伯菌则分别为9．7％和17．1％。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA-1型质粒AmpC酶，同时也产CTX-3型(6株)或CTX—M-14(1株)或SHV-12(3株)型ESBL。10株中，3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33—36kb的大质粒，未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论北京地区发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX—M型ESBL的肺炎克雷伯菌，它们来自不同的克隆。     

北京协和医院外科住院患者细菌耐药性监测

  目的  了解北京协和医院外科住院患者临床分离细菌分布及对抗菌药物的耐药性。  方法  收集2012年1月1日至2013年12月31日北京协和医院外科住院患者临床分离的3084株非重复细菌, 采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验, 按美国临床实验室标准化协会2013年版标准判读药敏结果, 采用WHONET 5.6软件进行数据分析。  结果  3084株非重复细菌中, 10种最常见的细菌依次为鲍曼不动杆菌(14.1%)、大肠埃希菌(12.4%)、铜绿假单胞菌(12.4%)、肺炎克雷伯菌(11.8%)、金黄色葡萄球菌(8.9%)、粪肠球菌(5.4%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.3%)、阴沟肠杆菌(3.7%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3.6%)和屎肠球菌(3.2%), 其中革兰阴性菌占71.6%(2208株), 革兰阳性菌占28.4%(876株)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococcus, MRCNS)的检出率分别为42.7%(117/274)和77.3%(119/154)。MRSA和MRCNS对β-内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus, MSSA)和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-susceptible coagulase-negative Staphylococcus, MSCNS)。MRSA中80.3%菌株对磺胺甲噁唑-甲氧苄啶敏感, MRCNS中95.0%菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌, 但后者对氯霉素的耐药率较低, 仅为4.3%。分别发现1株和5株万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌。未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases, ESBLs)的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌的检出率分别为56.7%(217/383)、23.8%(97/408)和22.8%(13/57)。产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物仍高度敏感, 总耐药率1.6%~3.3%。泛耐药肺炎克雷伯菌的检出率为0.8%(3/363)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为19.5%和15.0%, 对阿米卡星的耐药率最低(8.6%); 鲍曼不动杆菌对上述两种抗菌药物的耐药率分别为74.1%和74.0%, 对米诺环素和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低(28.9%和51.5%)。泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为44.3%(193/436)和0.8%(3/381)。  结论  定期进行耐药性监测有助于了解细菌耐药性变迁, 为临床经验用药提供依据。     

北京协和医院1990—2009年住院患者尿道感染常见病原菌及其耐药性

  目的  了解住院患者尿道细菌感染常见病原菌及其对抗菌药物的耐药性。  方法  用纸片扩散法对1990-2009年北京协和医院住院患者尿道感染分离的4565株病原菌进行抗菌药物耐药监测。  结果  20年来北京协和医院住院患者尿道感染以大肠埃希菌检出率最高(33%), 其次为粪肠球菌(12%)、屎肠球菌(8%)、凝固酶阴性葡萄球菌(7%)、铜绿假单胞菌(6%)和肺炎克雷伯菌(6%)。2006-2009年产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lac-tamases, ESBLs)的大肠埃希菌检出率为60%;大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均100%敏感, 对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率为77.7%和76.4%。粪肠球菌对呋喃妥因和磷霉素的耐药率均低于10%。  结论  住院患者尿道感染最常见的病原菌是大肠埃希菌, 且细菌耐药性呈增长趋势, 临床上应加强细菌耐药监测。     

2005—2010年北京协和医院细菌耐药性监测

目的了解北京协和医院2005—2010年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法共收集2005—2010年临床分离的26 459株非重复的细菌,采用纸片扩散法进行药敏试验,按CLSI 2010年版标准判读药敏试验结果,采用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 26 459株非重复株中最常见的菌种分别为:大肠埃希菌(17.7%)、铜绿假单胞菌(10.5%)、金葡菌(10.3%)、鲍曼不动杆菌(9.9%)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS,9.4%)、肺炎克雷伯菌(8%)、粪肠球菌(5%)、屎肠球菌(4.5%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3%)和阴沟肠杆菌(2.8%)。其中革兰阴性菌占64.9%,革兰阳性菌占35.1%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)的检出率分别为52.8%和59.2%。MRS对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)。仍有76.4%和87.6%的MRSA对甲氧苄啶磺胺甲噁唑和磷霉素敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌。发现少数耐万古霉素和替考拉宁的粪肠球菌和屎肠球菌,根据表型推测多数对万古霉素耐药的肠球菌可能为VanA型,未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌属细菌。β溶血链球菌对青霉素的敏感率为94.6%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBLs的检出率分别为47.0%、27.2%、23.6%和5.4%。产ESBLs菌株对测试药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。2010年发现少数泛耐药肺炎克雷伯菌(2.6%,13/497)和大肠埃希菌(0.2%,2/993)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为27.1%和20.9%,对阿米卡星的耐药率最低(13.2%)。鲍曼不动杆菌对上述2种碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为49.0%和66.6%,对头孢哌酮-舒巴坦和米诺环素的耐药率最低,分别为36.0%和14.2%。2010年泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率(51.5%)明显高于2009年(42.2%)。结论细菌对抗菌药物的耐药性呈增长趋势,特别对MRSA、耐万古霉素肠球菌(VRE)、多重耐药和泛耐药的肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,已成为临床治疗面临的挑战。     

2004-2005年中国社区获得呼吸道感染常见病原菌耐药性研究

目的调查中国6所教学医院2004--2005年分离的社区获得呼吸道感染常见病原菌的耐药性。方法收集2004年7月-2005年3月全国6个地区6所医院社区获得呼吸道感染患者中分离的510株肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、p溶血链球菌及MSSA、非产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，以琼脂稀释法测定头孢泊肟等9种抗菌药物的MIC。结果肺炎链球菌中，青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）、青霉素中介肺炎链球菌（PISP）、青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）对头孢泊肟的敏感率分别为98．9％、42．2％、6．4％。肺炎链球菌对莫西沙星的敏感率为100％；对米诺环素的敏感率为94．6％；对阿奇霉素的敏感率仅为10．7％；流感嗜血杆菌、MSSA、非产ESBL的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对头孢泊肟、头孢丙烯、头孢克洛、莫西沙星和米诺环素的敏感率在51．3％～100％。结论呼吸道病原菌特别是肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的耐药率与往年监测结果相比较呈增加趋势；头孢泊肟对呼吸道病原菌的抗菌活性优于头孢丙烯和头孢克洛。     

2012年中国成人社区获得性呼吸道感染主要致病菌耐药性的多中心研究

目的 调查2012年我国11家医院成人社区获得性呼吸道感染病原菌的耐药性.方法 收集2012年1-12月全国11家中心分离的599株成人社区获得性呼吸道感染病原菌,其中肺炎链球菌381株,流感嗜血杆菌137株,卡他莫拉菌81株.采用琼脂稀释法测定抗菌药物的MIC值.结果 50％(300/599)的菌株分离自60岁以上的患者,16.2％(97/599)的菌株分离自40岁以下的患者.按照肺炎链球菌口服青霉素的折点判定标准,56.7％(216/381)的肺炎链球菌为青霉素不敏感菌株(PNSSP),肺炎链球菌对大环内酯类的耐药率超过90％(345/381),对口服头孢菌素的耐药率为39.9％ ～50.7％(152 ～ 193株).肺炎链球菌对左氧氟沙星和莫西沙星的敏感度分别为97.8％(372/381)和99％(377/381).PNSSP对头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、头孢克洛、头孢呋辛的耐药率显著高于青霉素敏感菌株(PSSP).流感嗜血杆菌对除氨苄西林(71.5％,272/381)和头孢克洛(75.2％,286/381)外的抗菌药物的敏感度均超过90％.流感嗜血杆菌中β-内酰胺酶阳性率为21.9％(30/137),且β-内酰胺酶阳性菌株对氨苄西林、头孢克洛、氯霉素和四环素的耐药性显著高于β-内酰胺酶阴性菌株.氟喹诺酮类药物对流感嗜血杆菌的作用效果明显.除克林霉素、阿奇霉素和克拉霉素对卡他莫拉菌作用较差外,其他药物对卡他莫拉菌均具有较高的抗菌活性.结论 大环内酯类和口服头孢菌素类药物对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的抗菌活性有限,左氧氟沙星和莫西沙星对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌仍具有较高的抗菌活性.     

脲原体属和人型支原体体外药物敏感性及其对喹诺酮类药物耐药机制分析:单中心回顾性研究

  目的  分析脲原体属和人型支原体体外药物敏感性特点, 并分析其对喹诺酮类药物耐药的相关机制。  方法  回顾性总结北京协和医院2012年9月至2017年4月通过体外培养方法检测出的脲原体属和人型支原体标本, 结合患者临床资料和菌种鉴定结果分析其体外药物敏感性特点。针对喹诺酮类药物耐药特点, 采用普通PCR法扩增目的基因并测序, 将测序结果翻译成蛋白质序列, 与NCBI数据库中参考序列进行比对, 检测DNA促旋酶(GyrA/GyrB)和拓扑异构酶Ⅳ(ParC/ParE)序列的突变情况。  结果  脲原体属混合人型支原体的体外敏感性总体低于脲原体属或人型支原体单独体外敏感性; 除大环内酯类外, 脲原体属对喹诺酮类、四环素类、交沙霉素、原始霉素、强力霉素的敏感性普遍低于人型支原体, 但差异无统计学意义(P均>0.05)。女性患者体内分离得到的脲原体属对阿奇霉素、红霉素、克拉霉素、氧氟沙星的体外敏感性较男性低(P均＜0.05)。微小脲原体对大部分抗菌药物的敏感性高于解脲脲原体, 尤以对四环素的敏感率差异最大(98.48%比72.73%, 差值25.8%, P＜0.05)。在GyrA、GyrB、ParC和ParE的序列比对中, 共发现21个突变位点, 其中ParC S83L突变占96.22%(51/53), 为最主要突变位点; 其余为ParC A136T突变、ParE R448K突变、GyrA L176F和ParC S83L联合突变等以及6个目前尚未报道过的突变位点, 即ParC的L540F、R718W、Q767E、S789N、M828I和I831T突变。  结论  脲原体属和人型支原体的体外药物敏感性与感染种属有关, 脲原体属的体外敏感性还与菌种、患者性别有关。对脲原体属喹诺酮类耐药的机制研究表明, 单独ParC S83L突变是脲原体属对喹诺酮类耐药的主要机制, 而新发现6个突变位点可能的作用机制仍有待深入研究。     

达托霉素等抗菌药物对499株血流感染革兰阳性球菌的体外抗菌活性

目的 评价达托霉素、万古霉素、替考拉宁、替加环素、头孢吡普、利奈唑胺等抗菌药物对血培养分离革兰阳性球菌的体外抗菌活性.方法 用微最肉汤稀释法测定达托霉素对499株血培养分离革兰阳性球菌的最小抑菌浓度(MIC)值,用琼脂稀释法测定其余9种抗菌药物MIC值,WHONET 5.4软件分析药敏数据.结果 葡萄球菌对达托霉素、万古霉索、替考拉宁、替加环素、头孢吡普和利奈唑胺的敏感率均为100%.达托霉素在1 mg/L浓度下可抑制所有的葡萄球菌.对于甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCoN),其MIC50和MIC90均为0.5 mg/L.达托霉素对肠球菌的最高MIC为4 mg/L,粪肠球菌的MIC50和MIC90均为2 mg/L;屎肠球菌的MIC50和MIC90分别为2 mg/L和4 mg/L.1株对利奈唑胺耐药(MIC为8 mg/L)的粪肠球菌对达托霉索敏感(MIC为1 mg/L).3株携带vanA基因的屎肠球菌(万古霉素的MIC均大于32 mg/L,替考拉宁的MIC均为32 mg/L)对达托霉素、替加环素、利奈唑胺均敏感.达托霉素对肺炎链球菌和草绿色链球菌的MIC范围分别为0.032～0.250 mg/L和0.125～1.000 mg/L.结论 达托霉素作为新型的抗菌药物,对血流感染常见的革兰阳性球菌均有很好的体外抗菌活性.可成为临床治疗革兰阳性球菌特别是耐药菌感染的很好选择.