参芎葡萄糖注射液对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对H_2O_2诱导的人脐静脉上皮细胞(HUVEC)细胞氧化模型损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVEC人脐静脉内皮细胞,用H_2O_2(130 mmol·L~(-1))处理0.5 h,建立HUVEC细胞H_2O_2氧化损伤模型。SGI组HUVEC细胞用(6%,8%,10%)SGI预处理6 h后,再用H_2O_2处理0.5 h。用MTS法检测细胞存活率;用ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测凋亡相关基因及蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况。结果:在130 mmol·L~(-1)H_2O_2作用细胞0.5 h的情况下,细胞存活率降低至50%左右,降低的程度合适,且实验结果重复性好,因此后续实验用该条件建立氧化损伤模型。与H_2O_2组比较,SGI预处理6 h能显著升高细胞存活率(P0.05,P0.01),减少LDH的外漏和MDA的生成(P0.05,P0.01),显著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P0.05,P0.01)。RT-PCR和Western blot结果表明,SGI能显著上调Bcl-2的表达(P0.05,P0.01),下调Caspase-3,Bax的表达(P0.05,P0.01)。结论:参芎葡萄糖注射液能保护HUVEC细胞对抗H_2O_2诱导的氧化损伤,具有一定的剂量依赖关系,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

基于蛋白质组学分析参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制

目的:利用串联质谱标记(TMT)定量蛋白质组学技术探究参芎葡萄糖注射液(SGI)拮抗过氧化氢(H₂O₂)诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制。方法:体外培养H9c2细胞,H₂O₂诱导H9c2细胞建立氧化损伤模型,利用细胞增殖与毒性检测法(MTS)检测细胞存活率,高效液相色谱法(HPLC)进行肽段分级,超高效液相色谱-质谱联用技术检测H9c2细胞的蛋白表达,使用MaxQuant(v1.5.2.8)进行数据检索,高分辨质谱定量分析筛选差异表达蛋白,通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达蛋白进行生物信息学分析,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内脂质结合蛋白2(Plin2)和原肌球蛋白1(Tpm1)的蛋白表达水平进行验证。结果:通过谱图解析鉴定有48608个特异性肽段,5903个可定量蛋白。与模型组比较,SGI组有82个差异表达的蛋白,其中有22个蛋白上调,60个蛋白下调。GO分析结果显示,差异表达蛋白主要参与程序性细胞死亡调节、细胞增殖调控、心血管系统发育和细胞迁移等生物进程。KEGG分析结果表明,这些蛋白与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR),黏着斑和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt),Ras相关蛋白1(Rap1)等通路有关。Western blot结果显示,与模型组比较,SGI能显著增加Plin2蛋白表达水平,显著降低Tpm1蛋白表达水平(P<0.01),与蛋白质组学结果一致。结论:提示SGI可能通过调控PPAR,黏着斑,PI3K/Akt和Rap1等通路抑制细胞凋亡,从而拮抗H₂O₂诱导细胞氧化损伤,但需要后续实验进一步验证研究。     

黑骨藤靶向TNF-α抗类风湿关节炎的药效物质基础分析

目的:应用网络药理学和实验验证,分析黑骨藤靶向肿瘤坏死因子-α(TNF-α)治疗类风湿关节炎的药效物质基础。方法:课题组前期研究发现黑骨藤醇提组分(CDLF,CQAF)具有显著抗类风湿关节炎(RA)活性,并鉴定出10个具有抗RA的活性单体。应用酶联免疫吸附测定法(ELISA),以白细胞介素-6(IL-6),一氧化氮(NO),白细胞介素-1β(IL-1β)和前列腺素E(2 PGE2)为指标比较活性单体,CDLF和CQAF组分抗RA活性;网络药理学分析黑骨藤抗RA可能的分子机制;TNF-α分子对接、表面等离子分子互作(SPR)技术和TNF-α诱导L929损伤模型验证黑骨藤化学单体靶向TNF-α能力。结果:ELISA发现,CDLF和CQAF组分抗RA活性明显高于鉴定出的10个活性单体;网络药理学分析,发现黑骨藤抗RA的核心靶点为信号传导及转录因子3(STAT3),肿瘤坏死因子(TNF)和IL-6,基因本体(GO)富集有胶原分解代谢、炎症反应,核转录因子(NF)-κB转录因子活性的正调控,B细胞增殖的正调控等,基于京都基因与基因组百科全书(EKGG)富集有TNF信号通路,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路,NF-κB信号通路,Toll样受体信号通路,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等;TNF-α分子对接,SPR技术和TNF-α诱导L929损伤模型实验发现,CDLF和CQAF组分具有较好的结合并拮抗TNF-α的活性,但从两组分中分离鉴定的活性成分,并没有表现出与CDLF和CQAF组分一致的抗TNF-α活性。结论:黑骨藤的CDLF和CQAF组分可能通过靶向TNF-α治疗RA,实验发现已分离的化学成分与TNF-α结合活性低于CDLF和CQAF组分,同时课题组在黑骨藤药材中分离到最低质量分数为0.25 ng·g^-1的化学成分,说明与TNF-α结合而产生抗RA活性成分可能为痕量成分。     

论如何改进我国非处方药品分销渠道的策略

本文旨在通过对非处方药(OTC)药品分销渠道的研究,主要从分销渠道的要素入手,解决现阶段我国医药企业在OTC药品分销渠道方面存在的不足,为我国医药企业OTC药品分销渠道模式要素的改进提供有益的借鉴.     

硫辛酸辅助治疗早期2型糖尿病肾病的疗效观察

目的 观察硫辛酸治疗早期2型糖尿病肾病的疗效.方法 将50例伴有微量白蛋白尿的2型糖尿病患者随机分成硫辛酸治疗组(治疗组)25例和常规治疗组(对照组)25例.对照组予以控制饮食、降糖、降压等基础治疗,治疗组在对照组基础上加用硫辛酸注射液,治疗前后测定尿微量白蛋白排泄率(UAER)、尿β2微球蛋白水平,比较两组患者的临床疗效.结果 与治疗前比较,治疗组UAER及尿β2微球蛋白水平均显著降低(P＜0.01),治疗过程中未出现明显不良反应.对照组UAER及尿β2微球蛋白水平与治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05),两组患者治疗后比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硫辛酸能显著减少2型糖尿病肾病(DN)患者尿微量白蛋白的排泄及尿β2微球蛋白水平.     

枳实大黄汤联合丁苯酞对急性脑梗死神经功能和氧化应激的影响

目的 观察枳实大黄汤联合丁苯酞对急性脑梗死（ACI）患者的神经功能及血清氧化应激水平的影响。方法 将92例ACI患者按照随机数字表法分为两组各46例,观察组采用枳实大黄汤联合丁苯酞治疗,对照组采用丁苯酞治疗,治疗周期14 d。观察治疗后两组临床疗效、中医证候评分、神经功能、血清氧化应激水平以及不良反应。结果 治疗14 d后,观察组血清丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）水平低于对照组（P <0.05）,超氧化物歧化酶（SOD）水平高于对照组（P <0.05）。治疗后两组神经功能评分均明显下降（P <0.05）,观察组治疗后评分均显著低于对照组（P <0.05）。观察组总有效率为95.65%,高于对照组78.26%(P <0.05)。治疗后观察组半身不遂、偏身麻木、头晕目眩等症状积分均低于对照组（P <0.05）;观察组胃肠道障碍、肢体乏力、言语不清、反应迟钝等不良反应发生率与对照组比较差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 枳实大黄汤联合丁苯酞治疗ACI患者能够改善血清氧化应激水平,提升神经功能,提高其临床疗效,改善临床症状,无明显不良反应。     

国外基本卫生服务实施背景、策略及其影响研究

目的了解国外基本卫生服务实施的背景、策略及效果。方法由主题专家和检索人员讨论并试验后确定检索词,共检索22个电子数据库,50个非政府组织及政府机构网站和搜索引擎Google。纳入所有描述及评价已经实施的基本卫生服务内涵、服务包和遴选原则、实施背景、策略及效果的文献。用自行设计的数据提取表收集文献内容和有关研究质量的信息,对提取信息进行分析和描述。结果共纳入166篇文献,大多数研究来自中低收入国家,主要是关于各国基本卫生服务包内容、遴选原则、实施背景与策略的描述（160篇）,涉及效果评价方面的文献极少（6篇）。评价策略的研究大部分为横断面研究,只有1篇是有干预的时间序列研究。结论由于各国政治、历史文化、经济背景以及政策目标的差异,其基本卫生服务政策的实施策略也各不相同,但采取全民覆盖的医疗保险制度和政府提供的基本卫生服务,基本实现卫生服务的全民覆盖,现已成为全世界大多数国家的共识,其中转型国家的经验尤其值得借鉴。     

血管紧张素Ⅱ诱导RIN-m细胞凋亡的实验研究

目的:以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及AngⅡ1型受体(AT1受体)拮抗剂氯沙坦作用于RIN-m细胞(来源于射线诱导的褐鼠胰岛素细胞瘤),观察RIN-m合成及分泌胰岛素功能及细胞凋亡的情况.为进一步在临床中研究血管紧张素受体拮抗剂对糖代谢的改善作用提供实验证据.方法:细胞的培养及干预:RIN-m细胞(40～50代)接种于3 mL含5.6 mmol/L葡萄糖的RPMI 1640培养液中.A组加入10μL生理盐水,B、C、D、E组加入终浓度分别为0.1、1、10及100 nmol/L的AngⅡ,F组在加入100 nmol/L的血管紧张素Ⅱ醋酸盐前10 mim给予氯沙坦1 μmol/L.各组处理后继续置于37℃、5%CO2的恒温培养箱中48 h.RIN-m细胞行流式细胞仪(Annexin V/FITC)及TUNEL检测凋亡.结果:两种凋亡检测结果大致相似,TUNNEL检测各组凋亡率分别为(7.50±1.18)%,(8.15±0.97)%,(12.67±1.35)%,(15.88±1.75)%,(20.66±0.80)%,(7.74±0.84)%;流式细胞仪检测各组凋亡率分别为(7.62±0.87)%,(8.74±1.31)%,(14.64±1.48)%,(16.47±0.88)%,(20.51±1.03)%,(7.63±0.79)%.AngⅡ干预组凋亡率高于空白对照组,并呈剂量-效应依赖关系,氯沙坦预处理+AngⅡ组与空白对照组比较差异无统计学意义(P=0.98).结论:AngⅡ可能通过与胰岛β细胞表面AT1受体结合而诱导RIN-m细胞凋亡,氯沙坦可抑制AngⅡ的促凋亡作用.     

马法兰预处理行自体外周血造血干细胞移植患儿的护理

目的 总结14例以马法兰预处理行自体外周血造血干细胞移植患儿的护理特点.方法 根据儿童的生理特点行移植前的各项准备,并放置双通道中心静脉插管.预处理方案采用卡铂和足叶乙甙24 h持续静脉滴注,加马法兰,连用4 d.结果 经中心静脉双通道持续静滴化疗药物4 d,未发生渗漏等现象,耐受性好;均发生了感染、较严重的消化道反应及严重的口腔黏膜溃烂水肿,均伴有严重的孤独感和心理负担.通过加强无菌观念,做好口腔护理、肛周护理等基础护理工作,并重视心理护理14例患儿的各种并发症均痊愈,移植成功.结论 中心静脉插管有利于顺利实施连续4 d的化疗,用马法兰等预处理的移植患儿伴有十分严重的并发症,认真细致的护理至关重要.     

非哺乳期乳腺炎患者焦虑抑郁状态及影响因素分析

目的 探讨非哺乳期乳腺炎(NLM)患者伴有焦虑抑郁状态的基本情况及其对生活质量的影响。方法 选取2021年7月至2022年12月该院乳腺科门诊及住院的174例NLM患者为研究对象,采用简明疼痛量表(BPI)、欧洲生活质量协作组癌症核心量表(QLQ-C30)、医院焦虑抑郁量表(HADS)进行问卷调查,观察NLM伴或不伴焦虑抑郁状态的人口学资料、疾病特征、生命质量和疼痛情况。结果 174例女性NLM患者平均年龄(33.47±5.49)岁。27例(15.5%)为焦虑状态,7例(4.0%)为抑郁状态,31例(17.8%)为焦虑抑郁状态。NLM伴焦虑抑郁状态患者在功能领域(身体、角色、情绪、认知和社会)水平更低,在症状领域(疲劳、恶心呕吐、疼痛、失眠、食欲、经济)持续负担较高,在整体健康状况领域较差,以及疼痛干扰评分较高(P<0.05)。结论 NLM患者存在一定的焦虑或抑郁状态,并与疼痛和生命质量相关。