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HBsAg和B19 VP2复合抗原的基因克隆及在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建乙肝表面抗原(HBsAg)-人微小病毒B19VP2蛋白的原核高效表达系统.方法用PCR扩增HBsAg基因及B19病毒VP2基因,分别与pGEM-T重组,构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pGEX-5X-1表达载体中,得到pGEX-5X-1-HBs;再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pGEX-5X-1-HBs中,得到pGEX-5X-1-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定.结果pGEX-5X-1-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21中高效表达,表达产物经Western-blot鉴定具有HBsAg及B19 VP2的双重抗原性.结论成功构建pGEX-5X-1-HBs-VP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为HBV和B19病毒重组多价疫苗的研究奠定了基础. 相似文献
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目的探讨血浆中脂氧素 A4(LXA4)和基质金属蛋白酶 9(MMP9)的动态变化及对早产儿支气管肺发育不良( BPD)的预测价值。方法选择 2018年 1—7月入住徐州医科大学附属医院新生儿科 32周以下的早产儿 50例,根据 BPD的诊断标准为 BPD组( 20例)和非 BPD组( 30例)采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测病儿第 1、7、14天血浆中 LXA4、MMP9的表达水平。结果生后第 1天 BPD组和非 BPD组血,浆 LXA4表达水平[(330.4±21.6)比( 321.1±35.9)pg/mL],差异无统计学意义( P>0.05); BPD组第 7天 LXA4水平为( 281.8±7.0)pg/mL,第 14天 LXA4水平为( 188.4±5.7)pg/mL,随着时间推移逐渐下降,各时间点均低于非 BPD组,不同时间点之间两两比较均差异有统计学意义,非 BPD组 LXA4水平逐渐上升,于第 7天达到峰值( 348.6±4.4)pg/ mL,后又逐渐下降至第 14天的( 270.3±5.4)pg/mL,不同时间点之间两两比较均差异有统计学意义( P<0.05);第 1天 BPD组和非 BPD组血浆 MMP9表达水平( 23.9±3.9)ng/mL比( 25.3±2.6)ng/mL,差异无统计学意义( P>0.05),BPD组血浆 MMP9水平逐渐上升,且生后第 7、14天 BPD组血浆 MMP9水平[(32.6±3.9)ng/mL、(39.0±2.1)ng/mL]均高于非 BPD组[(28.8±2.9)ng/mL、(32.2± 3.4)ng/mL],不同时间点之间两两比较差异有统计学意义( P<0.05)。依据 BPD组和非 BPD组 LXA4浓度绘制 ROC曲线下面积为 0.670(95%可信区间为 0.580~0.759),依据 BPD组和非 BPD组 MMP9浓度绘制 ROC曲线下面积为 0.749(95%可信区间为 0.667~0.830)。结论生后 7d检测血浆 LXA4和 MMP9的表达水平对早产儿支气管肺发育不良有早期预测价值。 相似文献
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段振离 《人人健康:医学导刊》1996,(10)
爱,这令人陶醉的字眼,编织了多少色彩绚丽的生活花环,酿造了多少醇香四溢的幸福美酒,使人的生活更加充实,更有意义。然而您可知道,爱与健康还有十分密切的关系。 相似文献