血复生浸膏结合辨证类方对慢性再生障碍性贫血患者外周血miRNA、淋巴细胞亚群及细胞因子影响的临床观察

  目的：观察血复生浸膏结合辨证类方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及其对外周血microRNA、淋巴细胞亚群、细胞因子的影响。  方法：将60例慢性再生障碍性贫血患者随机分为治疗组与对照组,每组30例;另设正常对照组20例。对照组予常规基础治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上加用血复生浸膏结合辨证类方。两组疗程均为6个月、随访6个月,观察临床疗效,比较外周血象指标、microRNA(miRNA-155-5p、miRNA-1260b)表达、淋巴细胞亚群(总T细胞、B细胞、NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc)水平及血浆相关细胞因子水平的变化情况。  结果：①治疗组、对照组临床总有效率分别为83.33%、53.33%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。②组间治疗后比较,Hb、WBC、Ret水平差异有统计学意义,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。③组间治疗后比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平差异有统计学意义,治疗组下调幅度明显强于对照组(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平均明显上调(P<0.05);两组治疗后与正常组比较, miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平虽有所下降,但均未达到正常水平(P<0.05)。④组间治疗后比较,NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,NK细胞、Th细胞比例及Th/Tc水平均明显不足(P<0.05),Tc细胞比例明显过高(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,治疗组Th/Tc水平差异有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而NK细胞、Th细胞及Tc细胞比例与正常水平已无显著差异(P>0.05);对照组NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义,均未达到正常水平(P<0.05)。⑤组间治疗后比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α水平明显过高(P<0.05),TGF-β1水平明显过低(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,IFN-γ、TNF-α、TGF-β1的水平差异均有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而治疗组IL-12p70无显著差异,已恢复至正常水平(P>0.05)。  结论：在西医常规治疗基础上,血复生浸膏联合辨证类方治疗再障的疗效较为满意,其调控再障免疫异常的机制可能是通过改善淋巴细胞亚群失衡、抑制造血负调控因子、下调miRNA-155-5p、miRNA-1260b的表达而实现。     

基于液相色谱-质谱技术的多发性骨髓瘤患者血清代谢组学分析

目的:应用代谢组学方法观察多发性骨髓瘤(MM)患者的血清代谢产物变化规律,探索MM诊断、预后判断及病情进展的潜在生物标志物.方法:收集MM患者26例和健康人50例的血清标本.将液相色谱-质谱检测所得的数据输入SIMCA-14.0软件,进行多变量统计分析.用主成分分析法、偏最小二乘法判别分析和正交偏最小二乘法判别分析模式...     

生长激素对机体营养代谢和免疫功能影响的研究进展

生长激素(GH)是体内重要的合成类激素,对生长发育及代谢起着重要作用.近年来,GH越来越多地应用于严重烧(创)伤、肝硬化低蛋白血症、肾病综合征(NS)等多个方面,对调节机体营养代谢及免疫功能效果显著,但同时也存在一些不良反应和并发症.本文就GH对机体营养代谢及免疫功能的调节作用作如下综述.     

DC疫苗联合CIK细胞免疫治疗B细胞淋巴瘤的初步临床观察

近年来非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma,NHL）的发病率不断上升,化疗联合美罗华免疫治疗使NHL获得了较高的缓解率,但仍有部分患者因为原发耐药或者缓解后复发而无法获得治愈,因此研发新的淋巴瘤治疗方法对于提高疗效,延长患者生存具有重要的意义。近年来树突状细胞（dendritic cell, DC）疫苗免疫治疗各类肿瘤的基础与临床研究受到广泛的关注,通过给患者免疫接种携带肿瘤抗原的DC,可以诱导患者机体产生特异性的、持久的抗肿瘤免疫应答\[1-2\];细胞因子诱导杀伤（cytokine induced killer,CIK）细胞输注可以调节和增强患者机体免疫功能\[3\]。因此本研究选择在淋巴瘤化疗完全缓解期,采用淋巴瘤抗原体外冲击的自体DC皮下免疫接种患者,其后静脉回输自体CIK细胞的方法免疫治疗B细胞淋巴瘤, 进行了初步的临床观察,现报道如下。     

葛根总黄酮联合三氧化二砷对Kasumi-1和HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨葛根总黄酮(PRF)联合三氧化二砷(ATO)对M2型急性髓系白血病细胞株Kasumi-1和HL-60细胞增殖和凋亡的影响。方法以100μg/mL PRF和1μmol/L ATO联合处理Kasumi-1和HL-60细胞48 h(RRF+ATO组),MTT法检测细胞增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞早期凋亡率,Real-Time PCR检测凋亡抑制基因Bcl-2、SurvivinmRNA表达,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白酶Caspase-3、-8、-9的表达。设立单用100μg/mL PRF的PRF处理组和空白对照组。结果 RRF+ATO组Kasum-1细胞增殖抑制率、早期凋亡率以及Caspase-3、-9表达均显著高于PRF处理组(P<0.05),细胞中Bcl-2 mRNA表达的下调趋势明显。RRF+ATO组HL-60细胞各项指标检测结果与PRF处理组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PRF联合ATO能有效抑制Kasumi-1细胞增殖并诱导早期凋亡,而对HL-60细胞则无明显影响。     

LIFT术与肛瘘切开术治疗经括约肌肛瘘的近远期肛门功能变化观察

目的观察经括约肌间瘘管结扎术（LIFT）与肛瘘切开术治疗经括约肌肛瘘的近远期肛门功能变化。 方法选取深圳市南山区人民医院2015年9月至2017年2月收治的120例经括约肌肛瘘患者,随机分为观察组与对照组,每组各60例。对照组采取肛瘘切开术,观察组采取LIFT术。比较两组手术时间、创面愈合时间及术后第1 d、第3 d及第7 d的创面VAS疼痛评分,术后1个月的总治愈率、术后并发症总发生率及随访6个月的复发率,比较两组术前、术后1个月及术后6个月的肛门功能（应用盆底肌电图和肛门直肠压力测定进行评价）。 结果观察组创面愈合时间为（27.44±6.12）d,短于对照组（32.71±8.35）d（t=-3.943,P=0.000）;两组术后第1 d与第3 d的VAS疼痛评分无明显差异（P>0.05）,观察组术后第7 d的VAS疼痛评分为（2.11±0.66）分,低于对照组（3.56±0.91）分（t=-9.991,P=0.000）。观察组与对照组愈合率分别为90.00%和93.33%,复发率分别为13.33%和10.00%,差异无统计学意义（P>0.05）。观察组术后并发症总发生率为3.33%,低于对照组13.33%（χ²=3.927,P=0.048）。观察组术后1个月与6个月的耻骨直肠肌、内括约肌、外括约肌运动单位电位（MUP）平均时限及肛管静息压与肛管最大收缩压与术前比较无统计学意义（P>0.05）,对照组均下降（P<0.05）;观察组术后1个月与6个月的耻骨直肠肌、内括约肌、外括约肌MUP平均时限及肛管静息压与肛管最大收缩压均高于对照组。 结论LIFT术治疗经括约肌肛瘘可减轻手术对括约肌的损伤,从而减轻患者术后疼痛、促进创面愈合,减少术后并发症,使患者近远期肛门功能得到保护。     

葛根总黄酮对不同急性髓系白血病细胞株增殖抑制的影响

为了探讨葛根总黄酮对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的作用及其可能的机制,观察不同浓度葛根总黄酮体外对4种AML细胞株Kasumi-1、HL-60、NB4和U937的增殖抑制影响和细胞周期的变化。应用MTT法检测细胞株细胞的增殖抑制作用,用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果表明:一定浓度葛根总黄酮对4种AML细胞株增殖抑制作用差异显著,抑制强度依次为NB4细胞Kasumi-1细胞U937细胞HL-60细胞;葛根总黄酮不同程度地改变NB4、Kasumi-1、U937及HL-60细胞周期进程,使G1期细胞比例下降,S期细胞比例增高,出现亚二倍体峰,呈现浓度依赖性。结论:葛根总黄酮体外对不同AML细胞株具有选择性增殖抑制作用,以对NB4细胞株的影响最为显著。     

流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸水平

[摘要] 目的：探讨流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸蛋白水平的应用。 方法：采用直接免疫荧光标记方法,应用P-Tyr-100抗体标记胞浆抗原,流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞系(K562细胞)和Bcr-Abl阴性细胞系(HL60细胞)磷酸酪氨酸水平,并以同样的方法分析20例正常人外周血粒细胞和32例慢性粒细胞白血病病人(CML)中性粒细胞的磷酸酪氨酸水平,以细胞的平均荧光强度(MFI)表示其磷酸酪氨酸水平。结果：HL60细胞和K562细胞的MFI分别为170.89±23.42和 838.25±56.59,20例正常人、CML慢性期病人和CML加速/急变期病人的MFI分别为250.39±115.78、1549.66± 453.55和1879.29± 533.19,CML病人的MFI明显高于正常人(P<0.01),CML加速/急变期病人的MFI明显高于CML慢性期的病人(P<0.05)。结论：流式细胞术是一种理想的检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸水平的方法,且快速、敏感,有可能用于CML的快速诊断。     

补肾解毒化瘀方联合CPT化疗方案治疗老年多发性骨髓瘤临床观察

目的 观察补肾解毒化瘀方联合CPT化疗方案治疗老年多发性骨髓瘤的临床疗效及其对免疫功能的影响。方法 将40例老年多发性骨髓瘤患者随机分为治疗组与对照组,每组20例,两组均采用CPT化疗方案,28 d为1个周期,6个周期评价疗效;治疗组同时加用补肾解毒化瘀方治疗。观察临床疗效、生活质量变化及中医临床症状改善情况,治疗前后分别观察血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）、白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）及调节性T细胞的水平变化情况。结果 治疗组与对照组近期疗效分布差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组骨痛缓解效果显著优于对照组（P<0.05）;治疗组生活质量改善效果优于对照组(P＜0.05);中医临床证候改善方面,治疗组优于对照组(P＜0.05)。治疗前两组VEGF、IL-6水平差异无统计学意义(P＞0.05),治疗3个月及6个月后均显著下降（P＜0.05）,且治疗组VEGF、IL-6水平较对照组下降显著(P＜0.05)。调节性T细胞表达比较,治疗前患者CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low细胞比例均显著升高（P＜0.05）,但治疗后两组细胞比例均显著下降(P＜0.05),且治疗组细胞比例较对照组下降更明显(P＜0.05)。结论 补肾解毒化瘀方联合CPT化疗方案治疗多发性骨髓瘤有助于改善患者临床症状,提高免疫功能。     

135例急性髓细胞白血病免疫表型特点及意义

目的探讨急性髓系白血病(AML)免疫表型的特点及意义。方法应用流式细胞术,采用CD45/SSC双参数方案对135例AML患者进行免疫表型分析。结果在135例急性髓系白血病中表达较高的抗原依次是MPO(94.8%)、CD33(94.8%)、CD13(90.4%)、HLA-DR(74.1%)、CD117(65.2%)和CD34(61.5%)。CD14仅表达于急性粒-单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)。AML伴淋系抗原表达以CD7(32.6%)最为多见,其次为CD56(26.7%)和CD19(10.4%)。共发现4例急性双表型白血病(ABL),同时具有髓系和淋系抗原表达。结论 MPO、CD33、CD13是诊断AML最敏感的抗原。CD7、CD56、CD19在AML诊断及预后判断具有重要意义。免疫表型分析有助于AML的诊断及预后判断。