刺五加对低氧培养的猪肺动脉内皮细胞分泌血管调节因子的影响

为了观察刺五加对低氧培养的猪肺动脉内皮细胞分泌内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）和前列环素（ＰＧＩ２）的影响，用胶原酶消化法取杂种猪肺内皮细胞，经Ｍ１９９培养液培养，胰蛋白酶消化传代，２—３代细胞分正常组、低氧组，刺五加组正常组普通培养２４小时，低氧组...     

丹参对氧自由基损伤的离体肺动脉内皮细胞释放内皮素和前列环素的影响

近年研究表明，氧自由基参与急性或慢性肺损伤。血管内皮细胞受损，血管舒缩因子的合成释放异常，可能参与某些呼吸系统疾病的发病过程。本文通过体外细胞培养，研究了丹参对自由基损伤的肺动脉内皮细胞释放内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）和前列环素（ｐｒｏｓｔａ...     

人PD-L1Ig融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

为获取人PD L1Ig融合蛋白 ,研究其对T细胞的调节效应 ,采用PCR法从pMD18 T/PD L1中扩增出人PD L1基因的胞外段序列 ,从人脾脏细胞中扩增出人IgG1Fc恒定区基因 ,两者拼接后插入逆转录病毒载体pEGZ Term ,用脂质体法与两个辅助病毒载体共转染 2 93T包装细胞 ,用含病毒颗粒的培养上清反复感染L92 9细胞 ,Zeocin筛选能稳定分泌人PD L1Ig蛋白的基因转染细胞并亚克隆之 ,经无血清培养 ,收集的上清用Dotblot检测、ELISA定量后 ,浓缩并经ProteinG柱纯化 ,再经Westernblot鉴定。以FACS分析纯化蛋白对活化T细胞表达的PD 1结合能力 ,以体外T细胞活化体系观察其对T细胞表型的调节作用。结果表明 ,成功地构建了表达人PD L1Ig蛋白的重组逆转录病毒载体 ;获得的L92 9/PD L1Ig细胞能稳定分泌人PD L1Ig蛋白 ;该蛋白与PD 1受体具有良好的结合能力 ,能抑制T细胞的进一步活化。     

人OX40L在BL-21大肠杆菌中的表达和生物学功能研究

目的：克隆和表达人可溶性OX40L重组蛋白(sOXdOL)，探讨OXdOL信号在T细胞对乳腺癌细胞反应中的协同刺激效应。方法：运用基因工程技术在大肠杆菌中表达人重组融合蛋白GST-sOX40L，Western blot分析表达蛋白的特异性；采用体外T细胞和乳腺癌细胞混合培养体系，观察对T细胞生长和增殖的影响。结果：构建了GST-sOX40L原核表达体系，从而进行重组蛋白的有效表达；纯化的重组蛋白通过免疫印迹分析能被特异性单抗识别，并在体外培养体系中显示出协同刺激T细胞对乳腺肿瘤细胞的反应性：促进T细胞生长、增殖以及IL-2的分泌。结论：成功地研制了具有生物学活性的sOX40L，为体外激发肿瘤特异性T细胞提供良好的物质基础。     

三氧化二砷（As2O3）诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的 观察不同浓度的三氧化二砷（As2O3）作用不同时间段后对乳腺癌细胞MCF-7的诱导凋亡作用和对β3GnT2 及β3GnT8表达的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察其对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察其对MCF-7细胞凋亡的影响;同时采用RT-PCR 和Western Blot 检测相关基因mRNA及蛋白的表达水平变化.结果 不同浓度的As2O3 均可抑制乳腺癌细胞株MCF-7生长,其抑制作用随剂量增大而加强,呈时间剂量依赖性.RT-PCR 结果显示：β3GnT2、β3GnT8在各个浓度As2O3剂量组作用下,与空白组比较,均有不同程度的变化.1μg/mL和2μg/mL浓度组、4μg/mL和40μg/mL浓度组在相同时间段下分别比较,均有统计学差异（P ＜0.05）.Western Blot 检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致.β3GnT2蛋白表达中,4μg/mL（4h）组、40μg/mL（4h） 组分别与4μg/mL（48h）浓度组比较,均有明显差异（P＜0.05）;而在β3GnT8蛋白表达中,40μg/mL（4h）、4μg/mL（48h） 浓度组分别与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）.结论 As2O3对MCF-7细胞有显著的体外生长抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性;As2O3在体外能诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡效应与剂量呈正相关;As2O3还能下调β3GnT2和β3GnT8基因的表达.     

银杏叶提取物和左旋硝基精氨酸甲酯对内毒素致大鼠肺动脉内皮细胞损伤的保护作用

我们于2006年10月至2008年4月观察银杏叶提取物(GbE)和左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对内毒素致大鼠肺动脉内皮细胞(PAECs)损伤的保护作用,通过内毒素即脂多糖制备细胞损伤模型,GbE和L-NAME两种药物单独用药和联合用药进行药物干预,检测多种指标,观测联合用药是否在保护内皮细胞损伤方面较单独用药具有优越性[1-3].     

混合呼出气二氧化碳分压及平台压监测在机械通气中的应用

目的研究机械通气参数的准确调节。方法机械通气的分钟通气量及其他参数依据监测的混合呼出气二氧化碳分压、平台压、气道阻力、呼吸顺应性和动脉血气进行调节。结果呼吸机参数调节后患者的ＰａＣＯ２均在预期范围内，未出现肺的气压伤和循环障碍。结论为减少机械通气的副作用和并发症，建议在机械通气过程中，动态监测混合呼出气二氧化碳分压、气道阻力、呼吸顺应性和动脉血气，依据多项指标精确调节呼吸机     

L-NAME对内毒素致大鼠肺动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨左旋硝基精氨酸甲酯（L—NAME）是否对内毒素脂多糖（LPS）导致的大鼠肺动脉内皮细胞（RPAECs）损伤具有保护作用。方法利用大鼠肺动脉组织块贴壁法进行细胞原代培养。通过形态观察和Ⅷ因子相关抗原抗血清间接免疫荧光染色对细胞进行鉴定。将细胞分组，LPS、L—NAME与细胞共育24小时，检测各组细胞及培养上清中的硝基酪氨酸阳性细胞百分比（NT％）和乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、内皮素-1（ET-1）的含量。结果L—NAME组中LDH（2237．04±50．32，2104．26±58．57）、MDA（8．36±0．25，7．26±0.24）比LPS组LDH（2553．01±55．75）、MDA（10．95±0．33）明显降低（P〈0．05），SOD（41．09±2．20，50．76±2．66）较LPS组SOD（33．16±2．9）明显升高（P〈0．05），NT％（33．7±1．94％，28．88±1．73％）与LPS组（40．28±2．3％）相比显著下降（P〈0．05），ET-1为（417．98±21．44，467．8±17．94Pg／ml，505．88±20pg／m1）与LPS组ET-1（391．67±14．62pg／m1）相比明显升高（P〈0．05）。结论L—NAME可能通过抗氧化作用来保护大鼠肺动脉内皮细胞。但是L—NAME升高细胞培养上清中的ET-1，单独用药可能导致肺动脉压力的增高。     

电子直线加速器外照射后NOS和SOD的变化研究

目的探讨β射线放射损伤后NOS和SOD的改变情况。方法采用直线加速器照射制作动物的β损伤模型 ,同时对NIH3T3细胞进行β外照射 ,观察NOS、SOD含量的改变。结果 β损伤后NOS在一定剂量范围内上升 ;SOD则在一定剂量范围内下降。结论 β损伤后能产生自由基 ,但其作用效应主要在全身 ,自由基在受照局部皮肤组织中改变的作用不大     

32例宫颈癌介入治疗的疗效分析

1995年 5月～ 1999年 11月 ,我院对 32例宫颈肿瘤患者采用介入超选择髂内动脉前支 (子宫动脉 )插管化疗栓塞 ,并加以放射治疗或手术治疗 ,取得了较好的治疗效果 ,现报告如下。临床资料一、一般资料 :年龄 2 8～ 66岁 ,中位年龄 4 8岁。根据ＦＩＧＯ分期法分期 ,Ⅰ期 4例 ,Ⅱ期 5例 ,Ⅲ期17例 ,放疗、术后复发 6例。宫颈鳞癌 17例 ,腺癌11例 ,腺鳞癌 2例 ,恶性黑色素瘤 1例 ,平滑肌肉瘤1例。二、治疗方法 :常规采用Ｓｅｌｄｉｎｇ′ｓ技术 ,经皮股动脉穿刺插管术 ,将 6Ｆ或ＲＩＭ导管送至髂总动脉造影。根据造影所见确定病变的性质、位置、营…