Cyclopamine对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制的研究

目的:探讨 sonic hedgehog(Shh)信号通路的特异性抑制剂环杷明(cyclopamine)对血清饥饿的人肝癌Hep3B细胞增殖、早期凋亡和白蛋白( albumin,ALB)、甲胎球蛋白 (α-fetoprotein,AFP)表达的影响.方法:采用WST-8法、激光共聚焦扫描显微术、FCM法、RT-PCR和电化学发光免疫法,检测血清饥饿状态下cyclopamine引起的Hep3B细胞增殖抑制、线粒体膜电位改变,以及对细胞分泌ALB和AFP的影响.结果:血清饥饿状态下cyclopamine可明显抑制Hep3B细胞的增殖.半定量测量结果显示,Hep3B细胞平均红绿荧光吸光度比值有所降低;FCM法检测结果显示,6 h后线粒体膜电位较0 h时明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).AFP mRNA及蛋白分泌水平均明显降低,但对ALB mRNA及蛋白分泌影响不明显.结论:Cyclopamine对Hep3B细胞增殖以及AFP mRNA和蛋白的分泌有明显抑制作用,同时促进线粒体膜电位的降低,提示cyclopamine具有抑制肿瘤细胞生长和促进早期凋亡发生的作用.     

RNA干扰MRP2表达逆转结肠癌细胞对长春新碱的耐药性

目的 构建MRP2基因的真核表达载体pGenSil-1-MRP2-siRNA,并观察其转染人结肠癌耐长春新碱细胞株HCT-8/V前后MRP2基因和ABCC2蛋白表达变化以及对化疗药物敏感性变化.方法 设计MRP2特异性siRNA的序列,克隆至pGenSil-1质粒中,测序鉴定后,用脂质体将重组质粒转染至HCT-8/V细胞中,用定量RT-PCR和Western blot检测MRP2的表达,MTT实验测定pGenSil-1-MRP2-siRNA和长春新碱对HCT-8/V细胞增殖抑制作用.结果 在结肠癌耐药细胞HCT-8/V中,RNAi明显抑制了MRP2 mRNA及蛋白的表达,在相同浓度化疗药物的作用下,RNA干扰组细胞凋亡比例显著高于对照组(P<0 01),表明细胞耐药性显著下降,对药物敏感性显著增高.结论 成功构建了MRP2的siRNA真核表达载体,并且对结肠癌耐药细胞MRP2的表达有明显抑制作用,取得良好的逆转耐药效果.     

两种梅毒血清学方法的检测和评价

目前检测梅毒的方法主要有病原学、血清学检测。本实验采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验（TPPA）2种方法进行梅毒螺旋体检测并比较两者之间的灵敏度、特异性,以为临床提供较为准确的实验诊断依据。     

肿瘤患者外周血活化血小板测定及其临床意义

目的:比较不同疾病状态下活化血小板测定值的差别及使用阿司匹林防治血栓的效果.方法:采用流式细胞仪测定126例肿瘤患者和60例非肿瘤患者外周血活化血小板CD62p和CD63的表达量,以及服用阿司匹林后的变化.结果:肿瘤患者外周血的活化血小板CD62p和CD63的表达量明显高于非肿瘤患者(P<0.05),有血栓形成的肿瘤患者外周血的活化血小板CD62p和CD63的表达量明显高于无血栓形成的肿瘤患者(P<0.05),有血栓的肿瘤患者的活化血小板经过阿司匹林干预治疗后明显下降(P<0.05).结论:测定活化血小板可以预测肿瘤患者存在高凝状态风险性的大小.同时,服用小剂量肠溶阿司匹林可以降低外周血活化血小板CD62p和CD63的值.