水痘—带状疱疹病毒与单纯疱疹病毒—1对脑神经细胞的致病性

水痘-带状疱疹病毒(VZV)是一种常见病毒。资料显示至少有95%的成人感染。初次感染 VZV 以后,病毒可在部分机体内潜伏。当机体免疫功能受到破坏或抑制。病毒可从潜伏状态下复活,进而引起中枢神经系统的感染。临床 VZV 脑炎多见于免疫功能异常的患者。单纯疱疹病毒(HSV)为散发性病毒性脑炎的主要病原之一,易感人群与 VZV 感染存在一定差异。为了观察在没有体内免疫因素影响下,VZV 和 HSV 对脑神经组织的致病性。实验采用体外脑神经细胞感染,以比较两种病毒对中枢神经系统的致病特点。     

水痘—带状疱疹病毒的分离

自11例临床水痘患者的水疤液中分离到3株VZV病毒,电镜显示病毒为一有包膜、直径约160nm的圆形颗粒,在感染的细胞内见嗜酸性包涵体,病毒在2BS细胞及RK_(13)细胞中出现细胞病变,鸡胚中不形成痘斑,用ELISA法和间接免疫荧光法证明与人VZV特异性抗体及患者血清中的LgM产生特异性反应。     

朊病毒病临床病理学诊断

朊病毒病是一类能造成动物和人类中枢神经系统慢性损害的致死性疾病，这种疾病不仅具有传染性，部分病例还具有家族遗传性。该疾病表现为海绵样脑病，如羊痒病、疯牛病、震颤病、克－雅氏病等。由于朊病毒病在人类具有不同的临床特征，确诊主要依赖组织病理学、病理性基因及相关的免疫学诊断     

风疹病毒在BALB/c小鼠体内的感染与分布

用BALB/c小鼠形成风疹病毒感染模型,小鼠经尾静脉感染RVGOS_(-10)株10~6TCID_(50),每只0.5ml,病毒血症持续约一周,感染后第4天达最高滴度,为10~(6.3)TCID_(50)/0.25ml,间接免疫荧光及间接酶标染色法观察小鼠组织切片,感染后不同时间,病毒对小鼠各脏器可形成广泛的侵害,抗原主要分布于胞桨,病毒分离结果与之吻合,感染后第18天,心、眼、肺中的病毒滴度分别为10~(5.2),10~(5.6),10~(5.5)TCID_(50)。     

风疹病毒分离株在人脑神经细胞中的形态与形态发生

观察风疹病毒(RV)分离株在人的神经细胞中形态和形态发生过程。方法利用超薄切片电子显微镜技术对自行分离的RV JR 23株在人脑神经细胞中的形态与形态发生过程进行了研究。 结果RV JR23袜感染人脑神经细胞24h后,可在细胞浆的核周围观察到病毒相关结构,包括电子致密颗粒,10nm,核衣壳样结构,15～25nm,“包涵体”样结构,“条纹”样结构伴随核衣壳样颗粒,并逐渐增多。96h可见完整病毒颗粒,192h达到高峰。病毒颗粒呈圆形,由单层脂质膜包绕,直径60～80nm。病毒在双层核膜中间装配,然后披上单层核膜而成熟,核膜破碎后释放入细胞浆。病毒颗粒多见于核周围。结论RV JR23株能在人神经细胞中广泛增殖,其形态发生有独特的方式。     

高耐药洛菲不动杆菌分离株超广谱β内酰胺酶的基因变异

目的：探讨高度耐药的洛菲不动杆菌超广谱β内酰胺酶基因型及基因变异特征,分析基因变异对氨基酸序列及对超广谱β内酰胺酶可能产生的影响。方法：从下呼吸道感染的患者标本中分离得到3株高度耐药的洛菲不动杆菌超广谱β内酰胺酶阳性菌,PCR检测TEM、SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因,并对耐药基因进行全序列测定,比较不同菌株耐药基因及其编码氨基酸序列的变异特征。结果：2株耐药基因为TEM型,SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因均未检出,另1株5种耐药基因均未检出。2株TEM基因扩增序列分别长1012bp、1007bp,2株同源性为98.2%,在17个位点上存在碱基差异,TEM基因为832bp,编码277个氨基酸,两株间有8个氨基酸出现差异,差异主要位于天冬氨酸、甘氨酸和丝氨酸,这些氨基酸分别被组氨酸、精氨酸/丙氨酸、半胱氨酸取代。软件分析显示,2株TEM基因编码TEM型超广谱β内酰胺酶的等电点分别为5.479、5.083。 结论：山东济南地区高度耐药洛菲不动杆菌ESBLs耐药基因可见TEM型,不同临床分离株耐药基因存在不同程度的变异,这种变异使其编码的氨基酸序列发生改变,可能影响超广谱β内酰胺酶的某些特性,给耐药菌的检测带来影响。     

食物传播的病毒性感染

引起人类肠道疾病的病毒虽然很多,但英国的流行病学显示,食物传播的病毒性感染爆发只有一组病毒占有优势,即诺沃克样病毒(Norwalk-like virus)。诺沃克样病毒具有小的圆形病毒结构,属于萼状病毒科(Caliciviruses),在临床上引起喷射性呕吐和腹泻,这些病毒包括夏威夷病毒     

风疹病毒JR23株感染BALB／c小鼠脑组织的病理学特征

为研究风疹病毒（ＲＶ）ＪＲ２３株感染中枢神经系统（ＣＮＳ）的特性及病理学特征，ＢＡＬＢ／ｃ小鼠经腹腔感染ＲＶＪＲ２３株，并于感染后的第２１天取小鼠大脑及小脑组织，ＨＥ及免疫组织化学染色，观察鼠脑组织ＲＶ感染状态２及病变特征。结果显示，受感染的小鼠无明显的ＣＮＳ症状，病理学特征以大为质小灶性神经元变性坏死为主，病变神经元周围见增生的少突胶质细胞形成卫星现象。在神经元坯 中可见小胶质细胞增生，形成噬     

SARS病毒E蛋白基因与EGFP基因在BHK-21细胞中的融合表达

目的：构建SARS病毒E蛋白基因的真核表达载体，观察E蛋白基因在BHK-21细胞中的正常表达及定位。方法：用PCR方法扩增E蛋白基因，上、下游引物两端分别设计EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点，产物双酶切后定向克隆于pEGFP-N1载体，构建真核表达载体pEGFP-E，脂质体法转染BHK-21细胞，荧光显微镜观察E蛋白基因的表达。结果：经酶切和DNA序列测定鉴定，E蛋白基因正确插入到增强绿荧光蛋白EGFP基因上游，荧光显微镜显示E蛋白表达于细胞浆内，包膜上也有分布。结论：在BHK-21细胞中成功表达了SARSCovE-EGFP融合蛋白，蛋白定位于细胞浆内。     

风疹病毒JR_(23)株对中枢神经系统感染的体内和体外实验研究

目的　研究风疹病毒 (rubellavirus ,RV )JR2 3 株感染中枢神经系统 (CNS)特性。方法　RVJR2 3 株体外感染人胚脑神经细胞、腹腔感染Balb/c小鼠 ,观察JR2 3 株在人脑神经细胞的增殖和对不同免疫状态小鼠CNS的感染及由感染导致的神经病理学特征。结果　RVJR2 3 株在人胚脑神经细胞中无明显的致细胞病变作用 ,病毒在感染后的第 72h达最高增殖滴度 10 3 TCID50 /ml。病毒抗原主要分布在人脑神经细胞胞浆。各组小鼠感染RVJR2 3 株后无明显CNS症状 ,地塞米松、环磷酰胺和药物未干预动物组CNSRV感染率分别为 6 0 %、90 %、5 0 %。受RVJR2 3 感染的小鼠脑组织出现小灶性胶质细胞增生及神经元坏死。大脑全层均有病毒抗原的分布。结论　RVJR2 3 株在人脑神经细胞和Balb/c小鼠脑组织中均能形成感染 ,感染为非杀细胞性