黔北人群MTHFR基因A1298C位点多态性与非综合征性唇腭裂的相关性研究

目的探讨黔北人群MTHFR基因A1298C位点的多态性及其与非综合征性唇腭裂的相关性。方法采用PCR和测序方法对45个对照组和60个NSCL/P病例组核心家系MTHFR基因A1298C位点进行扩增和测序;对样本群体进行Hardy-Weinberg遗传检测,对两组人群进行基因型频率、等位基因频率比较及OR分析;对病例组进行HHRR和TDT检验。结果对照组和病例组均符合Hardy-Weinberg平衡法则(P0.05);对照组与病例组子代和父亲的A1298C位点基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义(P0.05),而两组的母亲A1298C位点基因型及等位基因频率分布有统计学差异(P0.05),母亲携带C突变等位基因可能有利于降低子代罹患唇腭裂的风险;病例组双亲与子代的基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P0.05);MTHFR基因A1298C多态性与非综合征性唇腭裂无显著相关性(P0.05)。结论 MTHFR基因A1298C位点多态性可能与黔北地区人群区非综合征性唇腭裂的发生没有相关性。     

血管紧张素Ⅱ1型受体表达对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)在高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤中的作用及分子机制。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞,分为正常对照组、高糖组、高糖+血管紧张素Ⅱ1型受体小干扰RNA组、高糖+小干扰RNA阴性对照组。采用免疫印迹法检测受体AT1R、脂联素受体1(AdipoR1),炎性因子核转录因子(NF-κB)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1)及纤维化标记物α-肌动蛋白(α-SMA)、纤维结合蛋白(FN)的表达;采用免疫沉淀法检测AT1R-AdipoR1二聚化在肾小管上皮细胞中的形成,共聚焦显微镜下观察AT1R、AdipoR1在肾小管上皮细胞中的共定位关系。结果研究发现,在高糖刺激下,大鼠肾小管上皮细胞中AdipoR1表达无改变,AT1R表达明显增加(P0.05);炎性因子NF-κB、MCP-1、MIP-1α表达显著上调(均P0.05);纤维化标记物α-SMA、FN表达显著升高(均P0.01)。研究还发现,大鼠正常肾小管上皮细胞中存在AdipoR1-AT1R二聚化,且在高糖刺激下AdipoR1-AT1R二聚体表达较正常对照组明显升高。在转染血管紧张素Ⅱ1型受体小干扰RNA后,AT1R-AdipoR1二聚化明显减少,且明显抑制AT1R表达(P0.05),并使肾小管上皮细胞炎性因子NF-κB、MCP-1、MIP-1α表达显著下调(均P0.05),使纤维化标记物α-SMA、FN表达明显降低(均P0.05)。结论高糖刺激下,AT1 R通过促进AT1 R-AdipoR1二聚化,介导肾小管上皮细胞炎性损伤及诱导肾小管上皮细胞凋亡,促进其纤维化的发生发展。     

改良深板层角膜移植术治疗斑块状角膜营养不良二例

2009年1月,我院连续收治斑块状角膜营养不良的患者2例.在患者知情同意的情况下对其3只眼施行了改良的深板层角膜移植术,现报告如下. 例1女,28岁.因双眼视力进行性下降5年,于2009年1月6日就诊于我院.既往身体健康.否认家族性眼病史.     

七氟醚复合骶管阻滞用于腹腔镜斜疝手术的麻醉效果分析

目的评价七氟醚复合骶管阻滞用于腹腔镜下小儿疝囊高位结扎术的效果。方法选择经腹腔镜行小儿疝囊高位结扎术患儿40例,性别不限,年龄1~3岁,体重8~18kg,ASA分级Ⅰ-Ⅱ级。采用随机数字表法将患儿分为七氟醚复合骶管阻滞组（S组）和氯胺酮基础麻醉＋静脉全麻组（K组）,每组20例。于麻醉诱导、术中维持、麻醉苏醒各时期记录患儿血流动力学变化,记录诱导、苏醒时间和不良反应。结果与K组比较,S组患儿诱导、苏醒时间缩短（P〈0.05）;两组患儿术中麻醉效果均满意,血流动力学平稳,麻醉苏醒期S组不良反应明显少于K组。结论七氟醚复合骶管阻滞可安全有效的应用于腹腔镜下小儿疝囊高位结扎术。     

C-反应蛋白与急性冠脉综合征的关系

目的：探讨C-反应蛋白（CRP）与急性冠脉综合症（ACS）的关系。方法：采用免疫比浊法测定126例ACS患者和100例健康对照者的外向学清CRP水平。结果：ACS组的血清CRP水平明显高于对照组，而急性心机梗塞组血清CRP水平显著高于不稳定性心绞痛组。结论：CRP是ACS危险因素。     

老年人打鼾与颈动脉斑块的相关性研究

目的:探讨老年人打鼾与颈动脉斑块的关系。方法:对纳入本研究的67例打鼾者和61例健康查体者进行统一鼾症调查问卷及颈动脉超声检查,并对颈动脉斑块的相关危险因素进行多因素Logistic回归分析。结果:不打鼾者61例,轻度打鼾者18例,中度打鼾者24例,重度打鼾者25例,4组患者颈动脉斑块的检出率分别为19.7%、44.4%、62.5%和84.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。影响颈动脉斑块的Logistic回归结果,校正其他因素后显示中、重度打鼾为颈动脉斑块的危险因素,其OR(95%CI)值依次为4.378(1.181-16.225)、19.572(3.316-115.528)。结论:老年人中、重度打鼾与颈动脉斑块的患病率增加有关,是颈动脉斑块的危险因素。     

1，25-二羟维生素D3对高糖环境下人肾小管上皮细胞维生素D受体及血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的观察1,25-二羟维生素D,[1,25-（OH）2D3]对高糖状态下人近端肾小管上皮细胞（HK-2）维生素D受体（VDR）以及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）表达的影响。方法体外培养HK-2细胞,实验分为对照组（糖浓度5．5mmol／L）、甘露醇组（19．5mmol／L）、高糖组（糖浓度25．0mmoL／L）、高糖＋1,25-（OH）,D,组（浓度1．0×10^-6、1．0×10^-7、1．0×10^-8mol／L）和高糖＋1,25-（OH）2D3＋siRNAVDR干扰组,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测VDRmRNA表达,Westernblotting检测VDR蛋白表达,双荧光素酶报告基因系统检测VDR基因转录活性,放射免疫法检测AngⅡ含量。多个样本间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用g检验。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性均明显降低（分别为1．34±0．22比2．47±0．31、0．51±0．06比1．14±0．13、0．51±0．21比1．42±0．28,均P〈0．05）。1,25-（OH）2D3上调高糖条件下HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性,且呈浓度依赖性（分别为1．964-0．31比1．34±0．22、0．934-0．08比0．51±0．06、1．12±0．23比0．51±0．21,均P〈0．05）。与对照组相比,高糖使HK-2细胞分泌AngⅡ增加[（88±10）比（17±2）ng／L,P〈0．05]。1,25-（OH）2D3浓度依赖性下调高糖诱导的AngII高表达[（44±5）比（884-10）ng／L,P〈0．05]。利用RNA干扰诱导VDR基因沉默后,1,25-（OH）2D3不能下调高糖诱导的AngⅡ高表达[（87±12）比（88±10）ng／L,P〉0．05]。结论1,25-（OH）2D,可能通过VDR介导的方式负性调节高糖环境下人肾小管上皮细胞AnglI表达,从而对糖尿病肾脏疾病的进展起到延缓作用。     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体的表达

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠在不同时期其血清脂联素和脂联素受体(AdipoR)在肾脏组织的表达水平.方法 64只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(分别为2、6、10、12周,共8组):实验组大鼠32只,一次性空腹腹腔注射STZ 60 mg/kg,诱导糖尿病大鼠模型;对照组大鼠32只,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液.分别于糖尿病大鼠成模后第2、6、10、12周两组各取8只,测体重、肾重、空腹血糖、24 h尿白蛋白定量;心内采血,离心取血清,检测血肌酐,空腹血清胰岛素;ELISA方法检测血、尿脂联素浓度.取左肾常规病理组织行糖原染色,在光镜下观察肾脏的病理组织学改变,免疫组化SP法检测肾脏2种受体AdipoR1和AdipoR2表达.结果 (1)实验组6、10、12周大鼠血清和尿脂联素高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且血清脂联素与24 h尿白蛋白排泄率、尿脂联素呈正相关(r值分别为0.806、0.696,均P＜0.01);尿脂联素与24 h尿白蛋白定量呈显著正相关(r=0.728,P＜0.01);逐步回归分析提示血清脂联素受24 h尿白蛋白定量影响最大(β=0.806,P＜0.01);(2)免疫组化半定量分析显示,AdipoR1和AdipoR2在正常大鼠肾组织中均有表达,主要分布于肾小管上皮细胞和肾小球内皮细胞.实验组造模成功6周时肾脏组织AdipoR1和AdipoR2表达,与对照组比较表达有所增强(F值分别为11.68、23.20,均P＜0.01),且与血清脂联素呈显著正相关(r值分别为0.666、0.684,均P＜0.01).结论 血清和尿脂联素水平与糖尿病肾病病程和AdipoR呈正相关,推测脂联素通过AdipoR直接作用于肾脏,尤其是作用于肾小管,在1型糖尿病肾脏病变中发挥保护作用.     

孕妇携带乙肝病毒与胎儿宫内感染研究

目的 探讨胎儿宫内感染与孕妇血清乙肝病毒标志物的携带状态、乙肝病毒DNA含量的相关性.方法 随机选择门诊产前检查乙肝表面抗原阳性的孕妇80例,并以10例正常孕妇为对照.用酶联免疫吸附试验测定法检测孕妇及其新生儿脐血血清中乙肝病毒标志物的5项指标,用荧光定量聚合酶链反应技术检测乙肝病毒DNA载量.结果 80例乙肝病毒携带孕妇新生儿脐血乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒DNA阳性检出率分别为17.50%、25.00%、15.00%;其中44例大三阳的孕妇体内乙肝病毒DNA载量均>103copies/mL,而31例小三阳的孕妇仅有1例体内乙肝病毒DNA载量>103copies/mL,经比较差异有统计学意义(X2=69.626,P<0.001);44例大三阳孕妇新生儿脐血乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒DNA阳性检出率分别为31.82%、45.45%、27.27%;而31例小三阳孕妇新生儿脐血乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒DNA阳性检出均为阴性,其乙肝病毒DNA载量均<103copies/mL,经比较差异均有统计学意义(X2值为12.127、19.215、10.065,均P<0.01).12例乙肝病毒DNA阳性的新生儿均由大三阳且乙肝病毒DNA载量>103copies/mL孕妇所分娩.结论 孕妇携带乙肝病毒大三阳和乙肝病毒DNA高载量(>103copies/mL)是母婴传播宫内感染的高危因素.