1，25-二羟维生素D3对高糖环境下人肾小管上皮细胞维生素D受体及血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的观察1,25-二羟维生素D,[1,25-（OH）2D3]对高糖状态下人近端肾小管上皮细胞（HK-2）维生素D受体（VDR）以及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）表达的影响。方法体外培养HK-2细胞,实验分为对照组（糖浓度5．5mmol／L）、甘露醇组（19．5mmol／L）、高糖组（糖浓度25．0mmoL／L）、高糖＋1,25-（OH）,D,组（浓度1．0×10^-6、1．0×10^-7、1．0×10^-8mol／L）和高糖＋1,25-（OH）2D3＋siRNAVDR干扰组,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测VDRmRNA表达,Westernblotting检测VDR蛋白表达,双荧光素酶报告基因系统检测VDR基因转录活性,放射免疫法检测AngⅡ含量。多个样本间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用g检验。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性均明显降低（分别为1．34±0．22比2．47±0．31、0．51±0．06比1．14±0．13、0．51±0．21比1．42±0．28,均P〈0．05）。1,25-（OH）2D3上调高糖条件下HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性,且呈浓度依赖性（分别为1．964-0．31比1．34±0．22、0．934-0．08比0．51±0．06、1．12±0．23比0．51±0．21,均P〈0．05）。与对照组相比,高糖使HK-2细胞分泌AngⅡ增加[（88±10）比（17±2）ng／L,P〈0．05]。1,25-（OH）2D3浓度依赖性下调高糖诱导的AngII高表达[（44±5）比（884-10）ng／L,P〈0．05]。利用RNA干扰诱导VDR基因沉默后,1,25-（OH）2D3不能下调高糖诱导的AngⅡ高表达[（87±12）比（88±10）ng／L,P〉0．05]。结论1,25-（OH）2D,可能通过VDR介导的方式负性调节高糖环境下人肾小管上皮细胞AnglI表达,从而对糖尿病肾脏疾病的进展起到延缓作用。     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体的表达

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠在不同时期其血清脂联素和脂联素受体(AdipoR)在肾脏组织的表达水平.方法 64只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(分别为2、6、10、12周,共8组):实验组大鼠32只,一次性空腹腹腔注射STZ 60 mg/kg,诱导糖尿病大鼠模型;对照组大鼠32只,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液.分别于糖尿病大鼠成模后第2、6、10、12周两组各取8只,测体重、肾重、空腹血糖、24 h尿白蛋白定量;心内采血,离心取血清,检测血肌酐,空腹血清胰岛素;ELISA方法检测血、尿脂联素浓度.取左肾常规病理组织行糖原染色,在光镜下观察肾脏的病理组织学改变,免疫组化SP法检测肾脏2种受体AdipoR1和AdipoR2表达.结果 (1)实验组6、10、12周大鼠血清和尿脂联素高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且血清脂联素与24 h尿白蛋白排泄率、尿脂联素呈正相关(r值分别为0.806、0.696,均P＜0.01);尿脂联素与24 h尿白蛋白定量呈显著正相关(r=0.728,P＜0.01);逐步回归分析提示血清脂联素受24 h尿白蛋白定量影响最大(β=0.806,P＜0.01);(2)免疫组化半定量分析显示,AdipoR1和AdipoR2在正常大鼠肾组织中均有表达,主要分布于肾小管上皮细胞和肾小球内皮细胞.实验组造模成功6周时肾脏组织AdipoR1和AdipoR2表达,与对照组比较表达有所增强(F值分别为11.68、23.20,均P＜0.01),且与血清脂联素呈显著正相关(r值分别为0.666、0.684,均P＜0.01).结论 血清和尿脂联素水平与糖尿病肾病病程和AdipoR呈正相关,推测脂联素通过AdipoR直接作用于肾脏,尤其是作用于肾小管,在1型糖尿病肾脏病变中发挥保护作用.     

王国斌教授“五脏相关论”学术思想总结

王国斌教授根据中医基础理论和中医诊断之精髓,结合自己多年的临床经验,形成了自己的学术思想,提出"五脏相关论"。"五脏相关论"即在诊疗疑难杂症的过程中,应五脏兼顾,不可偏废。"五脏相关论"是对中医五行学说的整体统一论思想的总结与升华。同时,又是中医诊断学整体审察原则的具体体现。王教授将该思想应用于临床实践,对疾病的辨证论治起到了全面科学的指导作用。具体体现在"治肝当固肾""治心当顾脾""治脾亦治心肾""治肺当理脾""治肾亦治脾"五个方面。可见,临床运用"五脏相关论"治疗乙型肝炎、肝硬化、胃脘痛、肠易激惹综合征、咳嗽、椎间盘突出症等多种临床疾病疗效显著。     

"心肾不交"理论探讨

"心肾不交"是中医学理论的重要内容,对临床具有积极的指导意义,但目前对该理论的认识与研究不够深入.本文基于病理表现形式,以及阴阳、水火、升降、精血、神志、表里、经络等对心肾不交理论进行探究,以期挖掘其内涵,拓宽其理论外延,为相关临床应用提供有益参考.     

补肾类方药及中药有效成分抗衰老的作用机制研究进展

衰老是一个涉及多个方面包括脏腑器官、细胞组织以及多种年龄相关性疾病的生命阶段。中医认为肾虚与衰老密切相关,补肾在延缓衰老方面发挥着重要作用,中药可以多途径、多靶点、多功效地起到延缓衰老的作用,文章查阅文献归纳了补肾类方药及中药有效成分在延缓衰老研究中的作用机制,包括调节氧化应激、调节内质网应激、调节细胞凋亡、调节免疫反应、促进干细胞增殖与分化、神经保护作用等,以期为中药抗衰老的研究提供借鉴。     

中医望诊在乳腺疾病中的相关应用探讨

乳腺疾病是当今妇科的常见病和多发病,且发病率逐年升高,若未经及时诊治,则有发生恶变的风险,因此准确而高效的诊断方法对于乳腺病的检出与辨治具有重要临床价值。中医望诊具有无创、简便、高效等优点,将该方法广泛应用于乳腺病的临床诊断中,可以直观地查知疾病状况,预测病情变化趋势,有效指导临床治疗。此文通过查找古代书籍中关于乳腺病望诊的记载及近年的相关文献资料,从望乳房表面色泽的改变、皮肤凹陷、橘皮样改变、菜花样改变、慢性窦道方面分析概述,探讨中医望诊在乳腺病诊治中的优势,以期为现代乳腺病的诊断提供有益参考,并进一步推动中医传统诊法与西医诊断技术深入结合,从而切实提高乳腺病诊断的准确率。     

小檗碱对LPS诱导神经元损伤的作用机制研究

为探究小檗碱(berberine, Ber)对LPS诱导的神经元损伤及腺苷一磷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)-mTOR-p70核糖体蛋白S6激酶(ribosomaiprotein S6 kinase, S6K)信号通路的影响,MTT法筛选最佳的Ber处理HT22神经元浓度。将HT22细胞分为NC组、LPS组、Ber+LPS组和AMPK抑制剂Compound C(Com.C)+Ber+LPS组。FACS检测HT22细胞凋亡率;qRT-PCR法检测HT22细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量;DCFH-DA荧光探针检测HT22细胞中活性氧类(reactive oxygen species, ROS)含量;TBA法、比色法和WST-1法分别检测HT22细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的含量;Weste...     

RF6基因多态性与黔北人群非综合征性唇腭裂的相关性研究

目的 探讨黔北地区人群IRF6基因rs2235371和rs2235373 SNP位点的多态性及其与非综合征性唇腭裂的相关性。方法 采用PCR和测序方法对153个对照儿童和123个NSCL/P儿童的IRF6基因中2个SNP位点rs2235371和rs2235373进行扩增和测序;对样本群体进行Hardy-Weinberg平衡分析,比较2组人群的基因型频率、等位基因频率及OR分析;两位点连锁不平衡分析。结果 对照组与病例组人群rs2235371基因型均含有GG、GA和AA型,rs2235373位点均含有CC、CT和TT型。对于2个位点,对照组和病例组均符合Hardy-Weinberg平衡法则(P＞0.05)。2组人群中,rs2235371和rs2235373位点的等位基因和基因型差异均有统计学意义(P＜0.05);rs2235371位点GGvsGA的OR值(95%CI) =1.725(1.025～2.902),GGvsAA的OR值(95%CI) = 2.100(1.109～4.328);rs2235373位点CCvsTT的OR值(95%CI) = 2.263(1.348～5.015),CTvsTT的OR值(95%CI) = 2.061(1.108～2.169);(P＜0.05)。rs2235371和rs2235373位点存在连锁不平衡,GC单倍型是主要的单倍体型,对NSCL/P均有致病风险,OR值(95%CI)= 1.722(1.219～2.431), (P＜0.05)。结论 在黔北地区人群中,IRF6基因 rs2235371和rs2235373位点均具有多态性;rs2235371位点的GG基因型和rs2235373位点的CC、CT基因型与NSCL/P的发生有相关性;rs2235371和rs2235373位点存在连锁不平衡,GC单倍型对NSCL/P有致病风险。     

纤维蛋白胶在翼状胬肉切除联合无缝线羊膜移植术中应用的临床观察

目的 观察与探讨纤维蛋白胶在翼状胬肉切除联合羊膜移植术中应用的方式方法和临床效果.方法 筛选原发性翼状胬肉患者21人(26只眼),行胬肉切除联合羊膜移植术.所有患者随机分为无缝线组及缝线组:无缝线组11人(13只眼),术中将胬肉组织切除后,采用纤维蛋白胶黏合固定羊膜植片;缝线组10人(13只眼),以10-0尼龙缝线间断缝合固定羊膜植片.术后随访6个月,记录手术时间、术后症状和体征.并应用SPSS统计软件对两组结果进行分析.结果 无缝线组手术时间(13.6±3.5)min明显短于缝线组(22.3±5.2)rain(P<0.01).术后2周内(拆线前),无缝线组术眼疼痛、异物感和流泪等局部刺激症状均显著轻于缝线组(P<0.01).两组术后均未发生植片移位并发症.无缝线组术后羊膜植片贴附紧密,均于术后1周内迅速上皮化.缝线组术后有5只眼(38.5%)发生羊膜下积液,羊膜上皮化较无缝线组略迟,于术后8～ 10d完全上皮化.无缝线组羊膜愈合良好,局部无明显瘢痕发生;缝线组均出现不同程度的缝线刺激性瘢痕.术后6个月随访期内两组均未见胬肉复发.结论 在翼状胬肉切除联合羊膜移植术中使用纤维蛋白胶可替代手术缝线,使用方便,并明显缩短手术时间,减轻术后刺激症状,并利于羊膜愈合、减轻局部瘢痕,达到更好的美容目的 .     

肝癌细胞来源外泌体对肿瘤相关M2型巨噬细胞极化的影响

目的 探讨来源于肝癌细胞的外泌体对肿瘤相关巨噬细胞极化的影响，揭示肝癌形成新机制。方法 通过超速离心法分离肝癌细胞来源外泌体，透射电子显微镜、动态光散射粒度分析仪、蛋白免疫印迹法对外泌体表征进行鉴定；诱导巨噬细胞极化模型，实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法验证其极化状态。符合正态分布的计量资料两组间比较采用t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 透谢电子显微镜显示肝癌细胞来源外泌体为圆形或椭圆形囊泡结构，外泌体粒径大小为(172.65±2.34)nm,蛋白免疫印迹分析显示肝癌细胞来源的外泌体中标志蛋白TSG101和CD63呈高阳性表达。佛波酯15 ng诱导人源单核细胞巨噬细胞24 h贴壁后CD68表达显著增加(6.67±0.98 vs 1.00±0.25,t=11.20,P<0.001)。蛋白免疫印迹分析显示，相比对照组(L02来源外泌体组),HCC细胞来源外泌体(低、中、高3种剂量)诱导巨噬细胞表达M2型巨噬细胞标志物Arg-1、CD163均明显增加(P值均<0.05)。结论 肝癌细胞来源外泌体可促进巨噬细胞M2型极化。