绞股蓝皂甙对痴呆小鼠学习记忆能力影响及机制

目的 探讨绞股蓝皂甙（GPM）改善痴呆小鼠学习记忆能力的作用及机制。方法 使用D-半乳糖联合亚硝酸钠、三氯化铝复制老年性痴呆（SDAT）小鼠模型,随机分为6组：对照组、模型组、GPM 50、150、250 mg/kg组、多奈哌齐组（阳性对照）;连续给药3个月,采用水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力、试剂盒法检测小鼠脑组织中抗氧化指标及β-淀粉样前体蛋白（APP）含量。结果 与对照组比较,模型组小鼠潜伏期及首次穿越平台时间[分别为（18.76±2.32）、（15.27±1.42） s]延长,在原平台活动时间[（6.08±1.17） s]缩短;与模型组比较,GPM 250 mg/kg组小鼠潜伏期、首次穿越原平台时间[分别为（7.58±1.93）、（8.17±0.68） s]明显缩短,在原平台活动时间[（12.55±2.07） s]延长。与对照组比较,模型组小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）活力[分别为（200.91±28.28）、（3.89±0.71） U/mg]明显下降,丙二醛（MDA）水平[（6.51±0.63） nmol/mg]上升;与模型组比较,GPM 250 mg/kg组小鼠脑组织中SOD、GSH-Px活力[分别为（305.97±98.65）、（11.62±2.52） U/mg]明显上升,MDA水平[（2.29±0.95） nmol/mg]下降,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组比较,模型组小鼠脑组织中sAPPα表达[（1.869±0.12） ng/g]下降,Aβ₄₂表达[（6.668±0.647）μg/g]升高;与模型组比较,GPM 250 mg/kg组小鼠脑组织中sAPPα[（2.097±0.11） ng/g]升高,Aβ₄₂[（5.812±0.632）μg/g]下降,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 绞股蓝皂甙具有改善痴呆小鼠的认知能力作用,其机制可能与其减轻脑组织抗氧化损伤、减少Aβ表达有关。     

局部解剖学教学中PBL教学模式的实践与思考

为培养创造型、实用型医学人才,近2年来,我们在局部解剖学教学中进行了以PBL为核心的教学改革,并获得了较好的效果。与传统教学模式比较,PBL教学模式能明显优化学生的学习态度,能明显提高学生"自主学习、分析问题、解决问题"的能力,能明显提高学生的专业学习成绩。     

膈神经阻滞入路相关解剖结构

目的:对膈神经阻滞入路相关结构及其毗邻关系进行了解剖观测,为膈神经阻滞入路和预防并发症的发生提供解剖学基础。方法:实验于2003-12/2004-12在郧阳医学院解剖学教研室完成。由郧阳医学院解剖学教研室提供24具尸体,男20具,女4具。对48侧尸体头、颈、胸部的标本与膈神经穿刺入路相关结构及其毗邻关系进行了解剖观测。结果:①膈神经进针的深度:皮肤至膈神经(胸锁乳突肌外侧缘上距其锁骨头25～30mm头侧为进针点)为26.0±0.3(21～30)mm。②膈神经与胸膜顶,肺尖、胸导管等结构毗邻的关系:胸膜顶的体表投影,胸膜顶的内侧界距胸骨柄上缘中点两侧均为10～19(14.2±0.3)mm。胸膜顶的外侧界与胸锁关节之间的距离左侧为43～70(55.3±0.6)mm。右侧为51～80(57.5±0.6)mm。胸膜顶的最凸点与锁骨之间的距离左侧为11～29(21.6±0.4)mm,右侧为11～39(26.5±0.5)mm。左侧锁骨上缘点位于胸锁关节外侧为19～28(22.5±0.3)mm,右侧为13～29(23.0±0.4)mm。胸膜顶的外侧界距颈正中线两侧均为50～90(72.1±0.8)mm,肺尖与颈正中线两侧均为31～52(38.1±0.4)mm。胸导管在颈动脉鞘后方,椎动脉、椎静脉及膈神经前方弓形入静脉角,胸导管末端的弓高平均为5.2～12.5mm。③膈神经与副膈神经、颈交感干联系的观测结果:颈交感干与膈神经和副膈神经联系的出现率为43.6%,主要与膈神经相联系,与副膈神经则较少。它们与颈下神经节联系最多为60.4%,其次与颈中神经节为17.5%。此外也有与椎动脉神经节、锁骨下袢、颈中、下神经节之间相联系,于此可见膈神经在颈部与交感干有广泛的联系。结论:为膈神经穿刺的入路进针深度和预防并发症的发生提供了解剖学参考依据。     

指屈肌腱指段生物力学研究

目的：探讨指屈肌腱指段生物力学特性。方法：取新鲜成人尸体的示、中、环、小指各20指，分别采用拉伸实验和冲击实验方法进行生物力学测试分析。结果：①拉伸试验：指段的中部是强度危险区；②冲击试验：快负荷时，指段强度小于骨质；慢负荷时，指段强度大于骨质。结论：肌腱指段在负荷下，除表现有粘弹特性外，还表现出速度依赖性；其机械性能随负荷速度的不同而变化。     

海马注射Aβ_(1～40)诱导大鼠记忆减退及其脑内细胞周期蛋白A的异常表达

目的 :探讨 β -淀粉样蛋白 (β -amyloid ,Aβ1～ 40 )毒性作用能否导致成年大鼠脑内神经元表达细胞周期相关蛋白 ,以及细胞周期相关蛋白表达与神经损伤及记忆减退之间的关系。方法 :运用行为学测试、免疫组化、积分光密度分析等手段对Aβ1～ 40 多肽片段双侧海马注射的大鼠脑进行研究。结果 :Aβ1～ 40 注射 7d后大鼠记忆明显减退 (P <0 .0 5 ) ,且大鼠脑内细胞周期蛋白A(cyclinA)在神经元异常表达 ,但术后 2 1d时cyclinA的表达有所降低。结论 :Aβ1～ 40 可导致成年大鼠脑神经元表达细胞周期相关蛋白 ,大鼠脑内神经元细胞周期相关蛋白的异常表达与阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease,AD)相关病理改变存在关联     

体外神经元培养中Aβ1～40诱导cyclin A的异常表达

阿尔茨海默病（AD）是一种进行性神经退行性疾病,以严重记忆减退和认知障碍为主要临床表现。AD主要病理表现是细胞外的老年斑形成,细胞内的神经纤维缠结的出现,以及神经细胞和突触数量的减少。近年来在探索AD发病机制和病理改变的过程中,发现AD病人脑内的神经元中出现细胞周期相关蛋白（cyclin A、cyclin B1等）的异常表达,且异常表达的细胞周期相关蛋白可能与AD神经元的病理改变有关联。为此,我们在体外培养神经细胞时,加入Aβ1-40多肽片段,进行细胞周期相关蛋白和神经细胞损伤的分析。     

雌激素对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元Nogo-A和Nogo受体表达变化的影响

目的探讨雌激素对淀粉样β蛋白(Aβ1-40)诱导大鼠海马神经元Nogo-A和Nogo受体表达变化的影响。方法于雄性SD大鼠双侧海马注射Aβ1-40,颈部皮下植入可持续释放60d的17β-雌二醇片剂(E2),60d后取脑行冰冻切片,采用抗Nogo(N-18)多克隆抗体和Nogo受体抗体免疫组织化学染色法和免疫阳性细胞计数法检测Nogo-A和Nogo受体表达变化。结果正常大鼠海马和大脑皮质神经元胞核Nogo(N-18)免疫反应呈强阳性;海马CA1区可见深染的Nogo受体阳性反应神经元广泛分布,胞质、胞核内有棕黄色阳性反应颗粒。与正常对照组比较,阿尔茨海默病(AD)模型组Nogo-A免疫阳性细胞数明显增多;海马Nogo受体阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数减少。E2处理组Nogo-A的表达量降低和Nogo受体表达量升高均与正常对照组相似。安慰剂处理组Nogo-A的表达量和Nogo受体染色结果与AD模型组相似。结论AD大鼠海马神经元存在着Nogo-A表达上调和Nogo受体表达下调,可能与AD的病理改变有一定的联系。雌激素可使上述二者恢复至正常水平,对AD有一定治疗作用,其作用机制尚需进一步探讨。     

吡咯喹啉醌与神经干细胞的增殖

背景:目前国内外学者主要应用生长因子样物质来促进神经干细胞的分裂与增殖,所以作者推测吡咯喹啉醌小分子化合物也能促进神经干细胞的分裂增殖。目的:体外观察氧化还原酶辅酶吡咯喹啉醌促进鼠成体神经干细胞增殖的作用。方法:体外培养Wistar胎鼠成体神经干细胞成球体后,于培养液中加入1×10-8mol/L吡咯喹啉醌,对照组加入同等剂量的Hanks溶液。应用流式细胞仪测细胞周期增殖率,应用免疫组化法和WesternBlot测周期蛋白激酶(CDK2)和周期蛋白激酶抑制剂(P27)的表达。结果与结论:与对照组相比,吡咯喹啉醌处理16h和24h后,S期和G2期细胞数的比例显著增高,而细胞的凋亡率降低;CDK2蛋白的表达显著增强,而P27的表达显著降低。结果显示低浓度的吡咯喹啉醌即能促进鼠成体神经干细胞的增殖。     

嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠海马生长相关蛋白-43表达的影响

目的探讨嗅成鞘细胞(OECs)与神经干细胞(NSCs)共移植对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马生长相关蛋白(GAP)-43表达的影响。方法雄性SD大鼠双侧穹隆-海马伞切断,建立AD大鼠模型。实验动物分为4组:NSCs移植组、NSCs与OECs共移植组、AD模型组、正常对照组,每组30只。从SD胎鼠(孕16～18d)取材,在体外分别培养和共培养OECs与NSCs,并将共培养的OECs与NSCs移植于AD大鼠大脑侧脑室;观察各组大鼠行为学、宿主脑海马GAP-43和NOS阳性神经元表达的变化。结果①NSCs与OECs共移植组潜伏期明显缩短、通过平台次数明显增加,与NSCs移植组、AD模型组差异有统计学意义(P<0.05)。②反转录聚合酶链反应(RT-PCR)与Western Blot分析,NSCs与OECs共移植组宿主脑海马GAP-43mRNA和GAP-43蛋白的表达量高于NSCs移植组、AD模型组(P<0.05)。③NSCs与OECs共移植组NOS阳性细胞(22.2±1.7)较NSCs移植组(13.1±1.9)、AD模型组(7.1±0.9)明显增多(P<0.05)。结论嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植能促进宿主脑海马GAP-43的表达,其可能在AD大鼠中枢神经系统损伤时具有促进神经再生和修复的作用。