人牙龈成纤维细胞在可降解膜支架上的附着生长及穿透性研究

目的 对体外培养的人牙龈成纤维细胞在两种可降解膜支架上的附着性与穿透性进行评价。为进一步构建组织工程化人工牙龈以修复牙龈缺损及纠正牙龈萎缩提供必要的实验依据；方法 可吸收性支架采用GC膜和Gorg密度播种在两种支架膜上进行培养；定期分别用LDH试剂盒测定附着在支架上的细胞数，在光学显微镜下计数膜下透过的细胞数并求出细胞透过率；结果 人牙龈成纤维细胞在GC膜支架上比在Gore-resolut支架上具有较高的附着率和穿透率（有统计学显意义）；结论 GC膜状支架具有良好的生物相容性和细胞亲和性。其结构。孔径和降解速率有助于人龈成纤维细胞的三维附着生长，适宜进一步作为体内构建组织工程化人工牙龈的支架材料。     

羟基红花黄色素A与芍药苷联合用药对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)与芍药苷联合用药对急性局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠的协同保护作用,并探讨其作用机制.方法 110只雄性SD大鼠,随机分为6组:HSYA组(5.0 mg/kg)、芍药苷组(5.0 mg/kg)、HSYA与芍药苷联合用药组(合用组,各5.0 mg/kg)、银杏内酯组(5 mg/kg)、模型组和假手术组.采用改良线栓法复制大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注模型.脑缺血1h再灌注6h后进行神经功能缺失评分及尾静脉注射给药;给药7d后进行神经功能缺失评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;免疫组化(IHC)法检测磷酸化Akt1蛋白的表达量的变化情况.结果 与假手术组比较,模型组大鼠治疗前评分明显高于假手术组,差异具有统计学意义(P＜0.01),说明造模成功;与模型组比较,银杏内酯组、合用组、芍药苷组和HSYA组能不同程度地抑制大鼠体质量下降(P＜0.05,P＜0.01),改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能缺失症状(P＜0.05,P＜0.01),降低皮质区神经细胞的损伤程度,减小脑梗死面积(P＜0.05,P＜0.01),促进磷酸化Akt1蛋白的表达(P＜0.01);HSYA组、芍药苷组、银杏内酯组磷酸化Akt1蛋白的表达较合用组低(P＜0.01).结论 HSYA与芍药苷联合用药对脑缺血再灌注大鼠的脑损伤具有一定的协同保护作用,二者联合用药的作用优于单独用药,可能与二者联合用药发挥活血化瘀与神经保护作用有关.     

胃肠道恶性肿瘤围手术期肠内免疫营养的应用研究

目的：评价肠内免疫营养对胃肠道恶性肿瘤患者术后免疫功能、炎症反应、营养状态、术后并发症的影响。方法：将60例胃肠道恶性肿瘤患者随机分为两组（每组30例）。两组患者围手术期（术前5d、术后7d）分别接受肠内免疫营养（免疫营养组）和等氮等热量的普通肠内营养（普通营养组），于术前5d和术后1、4、8d分别检测各组患者免疫、炎症反应及营养指标、前白蛋白明显高于普通营养组（P＜0.05），炎症指标CRP明显低于普通营养组（P〈0.05）免疫营养组的术后总并发症发生率、感染性并发症发生率和住院天数明显低于普通营养组（P〈0．05）。结论：围手术期肠内免疫营养可在术后早期提高胃肠道恶性肿瘤病人的免疫功能，减轻手术创伤后的应激反应程度，提高胃肠道恶性肿瘤病人的内脏蛋白浓度。显著降低胃肠道恶性肿瘤病人的术后感染性并发症发生率和术后总并发症发生率，缩短住院时间。     

护理套件预防经外周静脉置入中心静脉导管相关感染的效果

目的探讨护理套件在预防经外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheter,PICC)相关感染中的应用效果。方法选取2010年1月至2012年12月在上海市第一人民医院行PICC置管术的患者共1745例,将2010年1月至2011年1月收治的687例患者作为非护理套件组,将2011年2月(我院开始使用中心静脉置管术护理套件进行PICC导管的维护)至2012年12月收治的患者1058例作为护理套件组,两组患者均按照标准进行PICC置管及维护,分析并比较两组患者导管穿刺部位感染和导管相关性血流感染(catheter-related blood stream infection,CRBSI)的发生率。结果使用护理套件组患者的导管穿刺部位感染和导管相关血流感染的发生率均低于非护理套件组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论使用统一的护理套件可减少PICC患者CRBSI及导管穿刺部位感染的发生。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠血浆血小板活化因子含量的影响

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)对脊髓损伤(SCI)大鼠血浆血小板活化因子(PAF)含量的影响及BYHWD的中枢神经保护作用机制。方法:采用Allen’s打击法制作中度SCI模型,应用SPF级Wistar大鼠,随机分为4组:正常组和3个模型组,即模型组、BYHWD组、金纳多组,每组16只大鼠。模型组大鼠分别给予蒸馏水、BYHWD、金纳多水溶液,正常组给予蒸馏水,灌胃治疗2周后,采用双抗体夹心法(ELISA法)检测血浆PAF含量,并在造模前至造模后3周对SCI大鼠进行运动功能评分。结果:造模1周后给药前BYHWD组、金纳多组与模型对照组动物运动功能评分显著低于正常对照组(P<0.01),但3组间差异无统计学显著性。给药后1周、2周检测结果与模型组比较,BYHWD和金纳多组运动功能评分显著高于模型组,低于正常组(P<0.01);两个给药组间差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第3周末模型组PAF含量明显升高,BYHWD组可明显降低SCI大鼠血浆PAF含量,其抑制作用较金纳多明显,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。结论:BYHWD可明显改善SCI大鼠后肢运动功能,减少SCI大鼠内源性PAF含量,发挥对损伤脊髓的保护作用,其降低SCI大鼠血浆中PAF含量与改善其后肢运动功能相关。     

补阳还五汤含药血清对缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡影响的正交试验研究

【目的】观察补阳还五汤对缺氧缺糖（oxygen-glucose deprivation, OGD）损伤PC12细胞凋亡的影响,筛选补阳还五汤中抑制OGD损伤PC12细胞凋亡的主要药味。【方法】将补阳还五汤中7种单味药即黄芪、赤芍、当归尾、地龙、川芎、桃仁、红花作为实验因素,每个因素选取有或无2个水平,按L8（27）正交试验表安排试验。采用OGD细胞模型,运用中药血清药理学方法和流式细胞术技术,以细胞凋亡率为评价指标,利用直观分析和方差分析法,比较空白血清组（有氧+含糖培养基+空白血清）、模型组（缺氧+无糖培养基+空白血清）和补阳还五汤（缺氧+无糖培养基+含药血清）以及各拆方对OGD损伤PC12细胞凋亡的影响。【结果】与空白血清组比较,模型组PC12细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0．01);与模型组比较,补阳还五汤组的凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0．01)。正交试验分析显示：补阳还五汤中对OGD损伤PC12细胞凋亡具有显著性影响的药味为桃仁、红花、赤芍(P<0．01),其余药味作用不显著(P>0．05),含赤芍的拆方细胞凋亡率低于不含赤芍的拆方。【结论】补阳还五汤具有抑制OGD损伤PC12细胞凋亡的作用,其中发挥作用的主要药味为赤芍。     

便携式脊柱侧凸牵引器具的设计及研制

[目的]根据多点牵引的理念,设计出包括横向推顶和纵向牵引的便携式脊柱侧凸牵引器具,实现两组矫正力的合力完成牵引,达到提高牵引的舒适度和患者对牵引得到依从性的目的。[方法]课题组提供设计的理念和图纸,由专业人员制作牵引床。[结果]按照课题组既定的理念设计出了由纵向牵引系统和横向推顶系统组成的新型便携式脊柱侧凸牵引器具,通过应力仪和压力感受器,并由电子显示仪显示和计算牵引力。[结论]新型便携式脊柱侧凸牵引器具,通过合力完成牵引,牵引过程中患者舒适,不良反应少,牵引床操作简便,占用空间小,牵引力的显示清晰且可控,便于对牵引效果进行分析和研究。     

哈蟆油对雌性衰老大鼠子宫组织p16和cyclinD1蛋白表达的影响

目的 探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16和正性调控因子cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠生殖器官衰老机制.方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生素E(VE组)、哈蟆油高剂量组(OR-H组)、中剂量组(OR-M)、低剂量组(OR-L组),每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注射42 d,建立亚急性衰老模型.另取雌性青年大鼠8只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组.第15天开始灌胃给药,给药时间28 d.给药结束后,免疫组化法检测衰老大鼠子宫组织p16和免疫印迹法检测cyclinD1蛋白的表达情况.结果 雌性衰老大鼠子宫组织免疫组化结果表明,子宫组织p16阳性染色多为胞浆着色,见于子宫内膜、上皮细胞胞浆、子宫间质腺体腺上皮细胞胞浆,外膜上皮也有表达,弥漫性、灶性分布均有.D-gal组p16阳性细胞积分与空白组比较升高(P＜0.01).OR各剂量组与D-gal组相比,p16阳性细胞积分降低,差异有显著性(P均＜0.01).免疫印迹法结果表明D-gal组子宫组织cyclinD1蛋白表达与空白组比较降低,差异有显著性(p＜0.01).OR-H、M、L组cyclin D1蛋白表达与D-gal组比较,表达均升高(P值均＜0.01),OR-H组尤为明显.结论 应用OR可以减缓衰老子宫组织结构的损伤,改善衰老子宫萎缩和衰老程度,OR可降低雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16蛋白的高表达,同时显著提高细胞增殖正性调控因子cyclinD1蛋白的表达,促进衰老雌性大鼠子宫细胞增殖.哈蟆油延缓雌性生殖器官衰老作用可能通过调控子宫p16-cyclinD1信号通路来促进有关增殖调控蛋白表达发挥延缓衰老作用.     

人胚胎骨骨膜来源成骨细胞的分离培养与生物学特性

背景：胚胎骨来源成骨细胞因其低免疫原性和高增殖与成骨活性有可能成为适用于骨组织工程方法异体骨组织缺损修复的种子细胞。冻存复苏后的生物学特点是否能进行进一步临床应用研究有待证实。 目的：建立人胚胎骨骨膜来源成骨细胞的分离培养、保存方法,观察骨膜来源成骨细胞生物学特点。 设计、时间及地点：细胞形态学与生物学特性实验研究,于2005-04/2006-05在天津市口腔医院细胞与组织工程实验室完成。 材料：细胞来源为5月龄自然流产胎儿,产妇及家属知情同意,无菌条件下取长骨骨膜组织。 方法：采用组织块法对成骨细胞进行原代培养,传代培养细胞液氮冻存3~6个月后,选择不同代次细胞复苏培养。 主要观察指标：通过形态学、超微结构,细胞增殖曲线,钙结节Von kossa法染色以及细胞内碱性磷酸酶定量检测与钙钴法染色确定其增殖与成骨活性。 结果：组织块法培养骨膜来源成骨细胞第6天即可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。苏木精-伊红染色密集融合的成骨细胞与细胞外基质显示转化为脊样骨组织结构排列。经统计学分析定量检测成骨细胞碱性磷酸酶活性与细胞密度有线性正相关关系。液氮冷冻保存后复苏培养复层成骨细胞钙钴法碱性磷酸酶染色阳性率在45%以上,超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞。 结论：胚胎骨骨膜来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性。深低温液氮冻存成骨细胞复苏后仍能连续传代增殖并具有良好的成骨代谢活性,能够体外借助细胞外基质形成骨样结构。     

哈蟆油对D-半乳糖致雄性衰老大鼠肝脏组织STAT3蛋白的影响

哈蟆油(Oviductus Ranae,OR)为蛙科动物中国林蛙雌蛙的输卵管,采制经干燥而得.味甘、成,性平.归肺、肾经,具补肾益精、养阴润肺的功效,是一种扶正固本的药物,为我国特产的动物中药材.现代药理实验表明,哈蟆油可延长果蝇寿命,灌服哈蟆油能使小鼠肝、脑过氧化脂质含量下降.明显提高D-半乳糖所致雌性衰老模型小鼠体内雌激素水平,延长小鼠动情期:增加其卵巢和子宫指数,改善卵巢和子宫的病理改变,降低卵巢子宫中MDA含量,提高其SOD活力,能够延缓雌性小鼠生殖衰老,增强生殖器官抗氧化作用,从而改善其萎缩和衰老程度.