银杏苦内脂B对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织NF-κB p65、IκBα mRNA表达的影响

目的 观察NF-κB p65、IκBα mRNA在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺组织中的表达以及银杏苦内脂B(BN52021)对其表达的影响.方法 180只Wistar大鼠随机分为对照组(NC组)、ANP模型组(ANP组)、BN52021治疗组(BN组),每组大鼠分别在术后1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h 6个时间点处死,抽血测定血淀粉酶含量,取胰腺组织行病理学检查,RT-PCR法检测NF-κB p65、IκBα mRNA表达.结果 血清淀粉酶和病理学改变符合ANP.BN52021能降低ANP大鼠的血清淀粉酶含量和改善胰腺的病理损害.ANP组和BN组NF-κB p65 mRNA均呈双峰改变,第1峰在1 h,第2峰分别在24 h和12 h,6 h时降至最低.ANP组NF-κB p65 mRNA表达在2 h、3 h、12 h和24 h较NC组显著增加(P ＜ 0.05或0.001),仅在1 h时较BN组有显著差异(P ＜ 0.041),其他时间点无显著差异;但较NC组各时点显著升高(P ＜ 0.05或0.001).ANP组IκBα mRNA表达仅在24 h点较NC组明显增加(P = 0.000),BN组在1 h、6 h和12 h较ANP组显著增加(P ＜ 0.01),在1 h、12 h和24 h也较NC组显著增加(P ＜ 0.01).结论 NF-κB p65 mRNA在ANP大鼠胰腺组织表达上调,IκBα mRNA仅在造模后24 h时表达上调.BN52021可能通过上调IκBα mRNA的表达,破坏NF-κBp65 mRNA和IκBα mRNA的平衡,从而发挥其治疗作用.     

犬重症急性胰腺炎血浆内毒素和炎性介质的变化及血小板活化因子受体拮抗剂的干预

 目的动态观察重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)后血浆内毒素(Lipopplysaecharide,LPS)、血小板．拮化因子(PlaIelet-activating factor,PAF)、磷脂酶A2(Phospholipase A2,PIA2)和中性粒细胞弹性蛋白酶(Neutrophil elastase,NE)的变化,以及一种新型PAF受体拮抗剂-E 5880的干预效果。方法选健康杂种犬28只,体重10～15 kg,雌雄不限,随机分为5组：假手术组(n=5),SAP组(n=6),二甲亚砜(DMSO)组(n=5),SAP+E 5880预防组(n=6)和SAP+E 5880治疗组(n=6)。用5％牛磺胆酸钠混合液诱导SAP组,以0.9％NaCl磷酸盐缓冲液或DMSO取代5％牛磺胆酸钠混合液诱导假手术对照组和DMSO对照组。SAP+E 5880预防组在SAP诱导前30 min静推E 5880,剂量10 mg／kg。SAP+E 5880治疗组在SAP诱导后6h静推E 5880,剂量10 mg／kg,此后按5 mg／kg每12 h静推1次。结果SAP导致血浆LPS、PAF、PLA2、NE水平明显升高。预防或治疗性给予E 5880均可显著降低SAP后LPS、PAF、PEA2、NE水平,且血浆PAF水平的变化与血浆LPS、PLA2、NE水平呈显著正相关(P＜0.01)。结论SAP可引起LPS、PAF、PEA2、NE等炎性介质大量释放,而这些炎性介质正是介导SAP后全身性炎症反应甚至多器官功能损害的重要机制;预防或治疗性应用E 5880可明显降低血浆LPS、PAF、PLA2、NE水平,从而保护SAP后因这些炎性介质介导的胰腺外脏器损伤。     

急性胰腺炎促炎因子和抗炎因子变化的动态观察

目的：探讨促炎细胞因子和抗炎细胞因子在急性胰腺炎（AP）发病过程中动态变化的意义。方法：应用ELISA法检测48例病人血液中促炎细胞因子（TNFα、IL-1β、IL-6、IL-8）和抗炎细胞因子（IL-10、IL-1 ra)。结果：AP病人血液中促炎细胞因子和抗炎细胞因子在早期持续显著升高（与正常对照组相比P＜0.05),其后逐渐下降,并与临床症状变化的时相一致。结论：促炎细胞因子和抗炎细胞因子的动态变化可能对急性胰腺炎的发生发展具有重要作用。     

天津市中西医结合肝病学会2015年度学术年会会议纪要

天津市中西医结合肝病学会2015年度学术年会于2015年12月26日在天津举办.此次会议邀请国内知名专家就肝病的临床研究进展、原发性肝癌、肝硬化、儿童脂肪肝、非酒精性脂肪肝以及慢性乙型肝炎和丙型肝炎的治疗指南等内容进行专题报告,与会专家和200多名参会代表进行了学术交流.     

氧化苦参碱诱导慢性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的实验研究

 目的 观察慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)大鼠胰腺细胞凋亡的病理学改变,探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对CP的治疗作用.方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为:阴性对照组(n=10)、模型组(n=10)、苦参组(n=10)和激素组(n=10).模型组、苦参组、激素组采用Matsumura等[1]方法制备CP模型,阴性对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水;模型组与激素组于模型制备后分别给予OM和地塞米松治疗.于相应时相点处死大鼠,取血取组织.酶学方法测定血清淀粉酶、透射电镜对胰腺细胞进行形态学观察、TUNEL技术检测细胞凋亡指数.结果 模型组、激素组大鼠胰腺细胞出现明显的线粒体嵴不清、染色质浓缩、细胞核裂解等细胞凋亡特征,出现新月形小体;苦参组、激素组凋亡率(22.6%±4.9%,24.5%±6.1%)显著高于阴性对照组/模型组(1.2%±0.3%,13.4%±7.8%),P<0.05.结论 OM具有明显的诱导胰腺细胞凋亡的作用,明显改善胰腺炎病变程度.     

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠血浆TNFα的影响

 目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNFα)的水平变化,探讨银杏苦内酯B(BN52021)对SAP的治疗作用.方法 选用Wistar大鼠45只,随机分成SAP模型组(SAP,n=15),BN52021治疗组(BN,n=15)和阴性对照组(NC,n=15).前两组以5%牛磺胆酸钠逆行注入主胰管制成SAP模型,制模15 min后,SAP组经股静脉以0.5 ml/100 mg注射生理盐水;BN组以BN52021(5 mg/kg)代替生理盐水静注;NC组仅做剖腹术.制模后1 h,6 h和12 h分别采血,应用ELISA技术测定血浆TNFα水平.结果 在1 h时相点,SAP组血浆TNFα水平(420.67±262.22 pg/ml)与BN组(403.88±177.92 pg/ml)、NC组(369.62±39.73 pg/ml)相比,均不具有显著性差异(P＞0.05);在6 h、12 h时相点,SAP组血浆TNFα水平(856.33±207.25 pg/ml,961.56±415.49 pg/ml)较NC组(369.14±16.28 pg/ml,416.43±26.54 pg/ml)明显升高(P＜0.05);BN组(415.15±88.08 pg/ml,692.06±69.31 pg/ml)较SAP组明显降低(P＜0.05).结论 实验证明SAP大鼠血浆TNFα水平明显升高,BN52021对SAP大鼠具有明显的治疗效果,使其血浆TNFα水平显著下降.     

原发性胰腺癌中p16基因突变及其蛋白表达的研究

目的：探讨p16基因与胰腺癌发生的关系。方法：采用PCR基础缺失分析，PCR－SSCP及免疫组织化学方法检测28例胰腺癌组织，相应癌旁组织和4例正常胰腺组织中p16基因缺失，突变及其蛋白表达状况，并结合临床病理资料进行分析，结果：28例原发性胰腺癌组织中4例发生p16基因纯合缺失。5例发生p16基因突变，p16基因变异频率为32．1％，28例癌旁组织和4例正常胰腺组织中未发现纯合缺失及突变。p16基因变异频率与淋巴结转移（P＜0．025），转移淋巴结个数（P＜0．01）及临床分期（P＜0．05）密切相关。28例原发性胰腺癌的癌组织，癌旁组织和4例正常胰腺组织p16蛋白阳性表达率分别为57．1％（16／28），85．7％（24．28）和100％（4／4），癌组织中p16蛋白阳性表达率与组织学分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．05），转移淋巴结个数（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．05）密切相关。结论：p16基因变异及其蛋白失表达可能是胰腺癌发生发展过程中重要因素之一，而且二者均可作为评估胰腺癌恶性程度及其侵袭能力的有用指标，存在p16基因变异及蛋白失表达的原发性胰腺癌具有更强的恶性潜能。     

带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄的临床意义

【目的】回顾性分析带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄的疗效及并发症的防治。【方法】术前充分准备,术中行食管狭窄扩张术后,在胃镜直视下准确置入带膜镍钛记忆合金支架,术后观察其对吞咽困难的治疗效果及并发症的防治。【结果】87例患者均顺利置入带膜镍钛记忆合金支架,吞咽困难症状得到缓解或消失,近期疗效显著,也提高了患者的生存质量,并延长了生存时间;主要并发症为胸骨后疼痛和胃食管反流,无大出血和穿孔等严重并发症发生。【结论】带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄是安全有效的。     

氧化苦参碱对TGF-β1诱导的PANC-1细胞Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响

目的研究氧化苦参碱(OM)对接受转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胰腺导管癌PANC-1细胞中Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。方法以TGF-β1刺激PANC-1细胞模拟胰腺纤维化模型,并观察给予OM干预对Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。通过细胞转染技术将Gli1及Smad3的RNA干扰质粒转染入PANC-1细胞;通过Western blotting技术检测Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达,ELISA技术检测纤连蛋白(FN)和I型胶原(Co L-I)在细胞培养上清中的表达。结果与对照组相比,PANC-1细胞接受TGF-β1刺激后Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著升高;与TGF-β1组相比,OM和TGF-β1共同处理组Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著降低。转染Smad3干扰质粒后,Gli1、α-SMA、FN和Co L-I表达显著下降。与TGF-β1组比较,转染Gli1干扰质粒后加TGF-β1组α-SMA、FN和Co L-I表达显著降低。结论 OM可能通过调节PANC-1细胞TGF-β1/Smad3/Gli1通路发挥抗胰腺纤维化作用。     

缺血预处理抑制大鼠胰腺移植缺血再灌注胰腺细胞凋亡：活性氧与线粒体DNA修复酶的作用

背景：在胰腺移植过程中冷、热缺血均可导致移植胰腺缺血再灌注损伤,所导致的腺泡上皮细胞凋亡是造成移植胰功能不全的重要因素之一,缺血预处理是一种有效的内源性保护方式,其机制研究一直是器官移植的热点。 目的：观察缺血预处理（IPC）对大鼠胰腺缺血再灌注损伤时的细胞凋亡的影响,探讨线粒体DNA修复酶OGG1和氧化应激在其中的变化规律及可能机制。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-9/2009-4在武警医学院生理学与病理生理学教研室完成。 材料：健康雄性SD大鼠50只,其中20只为供体,10只为假手术组,另20只糖尿病造模后分为缺血再灌注组和缺血预处理组,每组10只。 方法：假手术组（Sham）只行开、关腹手术。缺血再灌注组（IR组）和缺血预处理组（IPC）行异位全胰十二指肠移植术。I/R组对应供体大鼠于获取供胰前以4℃ UW液灌洗20 min;IPC组对应供体大鼠于获取供胰前阻断腹主动脉5 min,再灌注5 min,共2次。供胰均控制热缺血时间为15 min,冷缺血（4℃ UW液中保存）时间为180 min。 主要观察指标：再灌注后12 h检测血浆淀粉酶、血糖浓度及Caspase-3,-9活化水平,流式细胞法检测腺泡细胞凋亡率,罗丹明123法检测线粒体膜电位,二氯荧光素法检测线粒体过氧化氢产生速率,高效液相色谱法检测线粒体DNA中8-oxodG含量,荧光定量PCR法检测OGG1 mRNA的表达,Western-blotting法检测细胞色素C释放、磷酸化Akt及线粒体OGG1蛋白表达水平。 结果：与IR组比较,IPC组线粒体膜电位、OGG1 mRNA、线粒体OGG1蛋白及磷酸化Akt蛋白表达均显著升高（18.75±2.09 vs 23.79±2.52,143.7±18.4 vs 268.1±20.3,35.29±7.86 vs66.81±8.90,58.5±6.1 vs189.4±19.5,均P<0.05）。血浆淀粉酶、血糖、线粒体过氧化氢产生速率、线粒体DNA8-oxodG含量、Caspase-3,-9活化水平、腺泡凋亡率及细胞色素C释放均显著降低（3972.40±275.43 vs 2546.95±214.78,12.3±1.6 vs 8.7±1.8,6.94±1.03 vs 4.40±0.72,0.0283±0.0057 vs 0.0190±0.0034,5.59±0.41 vs 2.65±0.37,4.80±0.15 vs 2.19±0.31,36.8±5.7 vs 22.3±3.2,100±0.0 vs 43.5±5.9,均P<0.05）。 结论：缺血预处理可降低线粒体氧化应激,提高Akt磷酸化水平,从而上调OGG1表达,减少线粒体DNA氧化损伤,抑制腺泡细胞凋亡,减轻移植胰缺血再灌注损伤。