活化血小板对内皮细胞TFPI表达影响及机制研究

目的探讨活化血小板对内皮细胞表达TFPI影响及机制研究。方法建立活化血小板与人脐静脉内皮细胞的共孵育体系(细胞比例10∶1),应用RT-PCR检测内皮细胞组织因子抑制物(TFPI)表达的变化。结果活化血小板与内皮细胞共孵育8h后,TFPImRNA的表达无明显变化。结论活化血小板通过CD40与CD154信号传递途径并不能增强内皮细胞TFPI的表达。     

组织蛋白酶B在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨组织蛋白酶B(CB)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及临床意义.方法 通过免疫组织化学SAB法检测NSCLC组织蛋白酶B在50例非小细胞肺癌标本中的表达水平.结果 Ⅲ～Ⅳ期肺癌组织组织蛋白酶B阳性表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌(P＜0.01);随着分化程度由高分化、中分化至低分化,组织蛋白酶B阳性表达率明显增加,差异均有显著性(P＜0.05);伴有淋巴结转移者,组织蛋白酶B阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(P＜0.01).结论 组织蛋白酶B可作为判断非小细胞肺癌淋巴结转移潜能和预后的辅助指标.     

GPⅡb~(R995A)点突变对受体亲合力及PP125~(FAK)磷酸化的影响

目的:为了进一步探讨血小板膜(GPⅡb)胞内段在信号传递中的作用。方法:选择表达GPⅡb~(R995A)Ⅲa的CHO细胞为研究对象,以正常人血小板和表达GPⅡbⅢa的CHO细胞为对照,应用流式细胞术、免疫沉淀、western blot-ting等方法检测PAC-1且结合能力和PP125~(FAK)磷酸化。结果:GPⅡbⅢa CHO细胞几乎不结合PAC-1,而GPⅡb~(R995A)ⅢaCHO细胞结合PAC-1明显增加;GPⅡbⅢa CHO细胞只有在粘附纤维蛋白原后才有FAK磷酸化,GP血b~(R995A)Ⅲa CHO细胞在悬浮时即有微弱的FAK磷酸化。结论:本研究提示GPⅡb~(R995A)点突变能改变受体的低亲合力状态,使受体具有高亲合性;该突变还介导细胞内信号传导,引起非配体结合的FAK磷酸化。     

GP73通过p53信号通路调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡

目的 探讨高尔基蛋白73(GP73)对乳腺癌细胞MCF-7的增殖、凋亡的影响及相关机制.方法 利用干扰及过表达GP73质粒转染乳腺癌细胞MCF-7,并利用CCK-8检测处理后细胞的增殖能力,利用流式细胞术方法检测处理组细胞的凋亡水平,利用qRT-PCR和Western印迹法测定GP73和p53 mRNA和蛋白的表达.采用qRT-PCR测定20例临床乳腺癌和癌旁组织中GP73和p53的mRNA水平,并分析乳腺癌组织中GP73和p53的mRNA水平的相关性.结果 过表达GP73后MCF-7较对照组增殖能力上升(P＜0.05),凋亡水平下降(P＜0.05);干扰GP73后MCF-7增殖能力下降(P＜0.05),凋亡率升高.同时过表达GP73和p53的乳腺癌细胞较单独过表达GP73的MCF-7细胞的增殖能力下降,凋亡水平上升.乳腺癌组织中GP73和p53 mRNA表达也呈负相关(r=-0.528,P＜0.01).结论 GP73可能通过p53信号通路调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡.     

全反式维甲酸诱导白血病细胞分化对brd7基因表达的影响

为了探讨brd7基因与白血病细胞分化的关系及其在白血病细胞分化中的作用,本研究采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60和K562细胞系分化,通过Wright-Giema染色在显微镜下观察细胞形态学变化,应用流式细胞术分析细胞分化抗原CD11b的表达,以鉴定细胞分化程度,并在此基础上通过Western blot检测brd7基因在诱导分化前和细胞分化过程中蛋白表达水平的变化。结果发现,ATRA具有抑制HL-60细胞生长的作用,并可诱导HL-60细胞向粒系分化,在ATRA诱导细胞分化过程中HL-60细胞表面CD11b的表达水平逐渐上调,BRD7蛋白表达随着HL-60细胞的分化而增加;ATRA对K562细胞无诱导分化作用,brd7的表达也无明显变化。结论:随着HL-60细胞的分化,brd7基因表达上调,其机制有待进一步阐明。     

流式细胞术在诊断血小板无力症中应用价值

目的：探讨流式细胞术（flow cytometry,FCM）对诊断血小板无力症（Glanzmann's Thrombasthenia,GT）的意义。方法：采用流式细胞术及Western印迹分别检测正常人、GT患者及其父母血小板膜GPⅡb和GPⅢa的表达。结果：与正常人相比，GT患者GPⅡbⅢa明显减少，其父GPⅢa亦减少（P＜0．01），其母GPⅢa无差异性（P＞0．5）。结论：FCM是诊断GT的一种简单、灵敏而可靠的方法，而且它还可用于GT的家系分析。     

组织因子途径抑制物与缺血性脑血管病

凝血系统在缺血性脑血管病的发生发展过程中发挥着重要作用。组织因子途径抑制物作为一 种生理性抗凝物质,即外源性凝血途径起始步骤的生理性抑制物,与缺血性脑血管病的关系密切。文 章重点介绍了组织因子途径抑制物在缺血性脑血管病中的变化、作用机制及其临床治疗前景。     

血栓性疾病诊断的策略和方法

血栓性疾病是指因为动脉、静脉或微循环血栓形成所引起的一类疾病 ,临床上非常常见 ,严重危害人们的健康和生命。对于血栓性疾病 ,临床诊断没有特异性 ,确诊必须依靠客观检查 ,近 10余年来随着血栓与止血领域研究的飞速发展 ,血栓性疾病的诊断方法发展很快 ,现简述如下 :临床诊断尽管临床诊断没有特异性 ,但详尽的病史、临床症状及体征资料仍有助于排除或者疑诊血栓性疾病。近来的研究[1] 发现 :根据临床表现和有无血栓形成的危险因素的存在患者患静脉血栓栓塞的可能性分为高、中、低度三级 (表 1)。Ｗｅｌｌｓ[2 ] 等的统计资料表明有典型…     

110例骨髓增殖性肿瘤患者JAK2 V617F突变及其与临床相关参数的关系

目的：分析110例骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者JAK2V617F突变情况及其与临床相关参数的关系。方法：收集湖南省人民医院2011年9至2012年7月及长沙地区另外3家医院2012年1-10月间接诊的MPN初诊患者骨髓标本共110例,包括真性红细胞增多症（PV）44例、原发性血小板增多症（ET）55例和原发性骨髓纤维化（PMF）11例,以同期2例健康志愿者的骨髓标本作为对照。PCR扩增并直接进行基因测序检测JAK2V617F基因突变情况,分析JAK2V617F突变与患者性别、疾病类型、年龄及外周血血红蛋白（Hb）含量、白细胞（WBC）和血小板（PLT）计数等的关系。结果：110例MPN患者JAK2V617F突变阳性率67．3％（74／110）。其中Pv、ET及PMF患者中JAK2V617F突变阳性率分别为70．5％（31／44）、70．9％（39／55）、36．4％（4／11）。JAK2V617F突变型PV患者的年龄、外周血WBC、PLT计数均高于野生型患者,JAK2V617F突变型ET患者的年龄、外周血WBC计数、Hb含量均高于野生型患者,JAK2V617F突变型PMF患者外周血Hb含量高于野生型患者（均P〈0．05）。结论：MPN患者JAK2V617F突变与患者发病年龄和血象指标有关联。     

急性心肌梗死患者凝血酶原基因G20210A变异频度分析

目的探讨FⅡG20210A突变在中国人群中的分布频率及其与急性心肌梗塞之间的联系.方法运用FⅡG20210A等位基因特异性引物PCR,结合限制性内切酶技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法检测97例急性心肌梗塞患者及107例正常人对照的FⅡG20210A基因频率.结果未检出1例FⅡG20210A基因突变者,提示被检病例及正常人FⅡG20210A基因变异频率为0.结论在中国人群中FⅡG20210A基因变异罕见甚至缺如.FⅡG20210A基因突变不足以成为中国人急性心肌梗塞的危险因素.