脐血CD34+细胞体外诱导分化为成熟巨核细胞及产出血小板

背景：据作者查新检索,国外尚无通过体外诱导干细胞生成具有功能的血细胞并形成产品的报道。 目的：体外诱导脐血CD34+细胞向成熟巨核细胞分化,并观察血小板产出情况。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2004/2006在湘雅医院及湘雅三医院中心实验室完成。 材料：脐带来源于足月妊娠健康产妇,由湘雅医院提供。 方法：免疫磁珠法分选脐血CD34+细胞,按5×107 L-1密度接种于24孔培养板,加入含L-谷氨酰胺、铁饱和的人转铁蛋白、CaCl2、胰岛素、去离子牛血清白蛋白及重组人血小板生成素的StemPro-34无血清培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下向巨核细胞诱导培养14~21 d。吸取细胞培养液,离心取上清,再次离心弃上清,余下物质即为细胞培养液中比重较小的血小板样颗粒。同法分离正常富血小板血浆中的血小板。 主要观察指标：培养细胞与上清液中血小板样颗粒的形态变化、免疫组织化学染色结果、显微及超微结构观察,血小板聚集情况及CD41的表达。 结果：培养第10天,巨核细胞诱导培养体系中出现丝状物质,并有血小板样颗粒产生,第16 天达高峰;培养细胞强阳性表达血小板特异性抗原GP Ⅱb Ⅲa;光镜观察培养细胞呈成熟巨核细胞形态,但也可见幼稚巨核细胞样,巨核细胞旁可见血小板样颗粒;电镜观察培养细胞大多呈成熟巨核细胞形态,少量呈凋亡状态,上清液中血小板样颗粒与富血小板血浆中的血小板大小、超微结构基本一致,有的血小板表面光滑,有的则呈现不规则表面。上清液中血小板样颗粒与正常富血小板血浆中的血小板均能对凝血酶产生聚集反应,流式细胞仪检测两者具有同样的CD41高表达率。 结论：脐血CD34+细胞能在体外诱导生成高纯度且成熟的巨核细胞,并产出血小板。     

血细胞形态学MCAI课件教学效果观察

目的 探讨MCAI课件在血细胞形态学教学中的应用价值。方法 利用自制MCAI课件与传统教学方法进行对比研究，并通过理论与技能考核评估教学效果。结果 该课件在很大程度上调动了学生的学习兴趣和积极性，提高了教学时效，提高了学生的学习能力及实践技能。结论 本课件在血细胞形态学教学中有重要作用，值得推广和应用。     

TEG预测化疗后骨髓抑制血小板减少患者出血风险的价值

目的:探讨血栓弹力图(TEG)预测及评估化疗后骨髓抑制血小板减少患者出血风险的临床价值。方法:回顾性分析惠州市第一人民医院及湘雅三医院2015年10月至2018年2月收治的化疗后骨髓抑制患者350例,根据临床有无出血症状将患者分为出血组132例与无出血组218例,记录患者血常规、凝血四项、TEG结果。结果:(1)出血组患者最大振幅(MA)、血小板计数(PLT)低于无出血组,差异具有统计学意义(P0.05);(2)对出血组TEG各项指标与凝血指标及PLT相关性分析,反应时间(R)与纤维蛋白原(FIB)呈负相关(r=0.818,P0.05),且相关性较强。MA与FIB呈较弱的正相关(r=0.230,P0.05)。MA值与PLT呈较强的正相关(r=0.768,P0.05),相关性较强。其余指标间无明显相关性(P0.05)。结论:TEG中MA值结合血小板数量能更好预测化疗后骨髓抑制血小板减少患者出血风险。     

如何上好骨髓细胞学实验探讨

骨髓细胞学实验课是实验诊断学的重要组成部分之一,但由于骨髓细胞形态变化多端,学生难以掌握。就中南大学湘雅三医院在骨髓细胞学实验课教学过程中的一些做法和体会进行简要总结以提高骨髓细胞学实验课的教学质量。     

低龄多发性骨髓瘤一例并文献复习

目的 提高对低龄多发性骨髓瘤的认识,减少其误诊率和漏诊率.方法 分析1例19岁多发性骨髓瘤患者的实验室检查结果及治疗,并进行相关文献复习.结果 患者首先表现为皮肤紫癜,血细胞沉降率明显增快,免疫球蛋白明显增高;后出现骨痛,放射性核素扫描全身骨显像示胸骨、肋骨、脊柱等多处骨质代谢异常;骨髓穿刺涂片显示大量异常原始浆细胞和幼稚浆细胞,成熟红细胞呈缗钱状分布.结论 对于皮肤紫癜伴有血细胞沉降率明显增快、免疫球蛋白明显增高、不能用过敏性紫癜等引起紫癜的常见疾病解释者,即使是低龄患者,亦应警惕MM的可能性.     

急性髓系白血病骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D mRNA的表达与意义

本研究探讨糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(glycosylphosphatidilinoditol-specific phospholipase D,GPI-PLD)在急性髓系白血病病人骨髓单个核细胞中的表达及其意义。采用半定量RT-PCR和酶转化底物的百分率的方法检测急性髓系白血病初发组、难治复发组、缓解组与正常对照组骨髓单个核细胞GPI-PLD酶活性和mRNA表达,并比较它们之间的差异。结果显示:急性髓系白血病初治组骨髓单个核细胞GPI-PLD mRNA表达和GPI-PLD活性分别为1.86±0.32、(46.96±7.15)%;缓解组分别为1.26±0.29和(33.36±5.13)%;难治复发组分别为1.79±0.19和(44.31±7.22)%;而正常对照组分别为1.27±0.23和(35.38±5.15)%。初治组和难治复发组的GPI-PLD活性与mRNA表达均明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(p0.01);而缓解组与正常对照组之间比较,差异无统计学意义(p0.05)。结论:GPI-PLD活性和mRNA表达水平变化一致;初治组和难治复发组急性髓系白血病病人骨髓单个核细胞GPI-PLD活性与mRNA表达水平明显高于正常组。GPI-PLD是否在白血病的发生、发展过程中发挥一定作用,有待进一步研究。     

血小板膜受体多态性与血栓性疾病

血小板膜受体具有高度多态性,其分子基础是受体基因变异,受体基因变异可导致受体功能缺陷,临床上导致出血;也可以不影响受体功能,但与血小板同种免疫反应密切相关。90年代以来,诸多研究认为受体多态性与血栓形成有关。本文综述了血小板膜受体多态性的组成、结构及其与血栓性疾病的关系等方面的研究进展。     

血小板无力症患者血小板GPⅡbⅢa受体亲和力的改变及临床意义

目的探讨血小板无力症(Glanzmann's Thrombasthenia,GT)患者血小板聚集功能异常的可能机制.方法采用Westem印迹分别检测正常人、GT患者及其父母血小板CPⅡbⅢa的含量,流式细胞术分析血小板膜CPⅢa的表达和血小板结合活化型单抗PAC-1的能力.结果与正常人相比,GT患者GPⅡbⅢa明显减少,其血小板结合PAC-1的能力亦明显低下.结论GPⅡbⅢa激活受阻可能为部分GT患者血小板聚集功能障碍的分子基础.     

速力菲治疗缺铁性贫血的疗效观察

目的　观察速力菲治疗缺铁性贫血的疗效。方法　将 12 4例缺铁性贫血患者随机分为治疗组与对照组 ,治疗组 (6 4例 )给予速力菲 0 1g ,每日 3次口服 ,对照组 (6 0例 )给予福乃得 1片每日 1次口服 ,疗程均为 4周。结果　治疗组起效速度、显效率明显高于对照组 ,且副作用明显低于对照组。结论　速力菲治疗缺铁性贫血起效快 ,疗效满意 ,不良反应少     

BRD7基因在急性白血病细胞中的表达及SNP分析

目的:探讨BRD7基因在急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞(BMNCs)中的表达水平及单核苷酸多态性(SNP)分布.方法:采用半定量RT-PCR方法检测52例AL患者及30例非恶性血液病对照的BMNCs BRD7基因的表达水平,并应用单链构象多态性加直接测序法检测BRD7基因点突变或SNP,分析BRD7基因与AL的相关性.结果:在52例AL患者和30例对照组患者中均存在BRD7基因表达.急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者BRD7 mRNA的相对表达量均高于对照组(P＝0.001;P＝0.037).BRD7基因编码区(447～844 bp)存在3个cSNPs,即C657A,C495T和A737G,其中C495T和A737G偶联发生.C657A多态性的基因频率在AL组和对照中差异无统计学意义.两个偶联的SNPs等位基因频率及基因型频率在AL组和对照中差异存在统计学意义(P＜0.01);但在AL组中3种基因型之间BRD7 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:BRD7基因在急性白血病患者细胞中表达上调.BRD7基因编码区(447～844 bp)2个偶联SNPs (C495T和A737G)与AL存在相关性,可能是AL的遗传易感因子之一.