复合扩增荧光标记STR-PCR定量检测无关供体脐带血移植后供受体嵌合状态

近年来，脐带血移植(CBT)治疗血液系统良、恶性疾病取得较大进展，无关供体脐带血已成为造血干细胞的重要来源。但由于脐血中有核细胞数量少，CBT多数HLA不全相合，增加了植入失败及移植物被排斥的可能。临床需要一种敏感可靠的方法检测移植后供体细胞嵌合状态，以早期判断植入与排斥。我们2002年4月对1例重型再生障碍性贫血(SAAⅡ)患儿实施HLA不全相合的CBT，并应用复合扩增荧光标记STR-PCR结合毛细管电泳的方法，首次定量检测了CBT后供体细胞嵌合率(DC)，现报告如下。     

非清髓性造血干细胞移植临床研究

目的 探讨非骨髓清除性(非清髓)造血干细胞移植(NST)治疗血液病疗效及毒性。方法 16例血液病患者,供体为其HLA配型完全相合的同胞,供体动员方案为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)300μg/12h×5天。预处理方案为氟拉达宾(Fludara)30mg·m-2·d-1×6天,马利兰(Bu)4mg·kg-1·d-1×2天;抗淋巴细胞免疫球蛋白(ALG)12～15mg·m-1·kg-1×4天,阿糖胞苷(Ara-C)500mg/d×4天或环磷酰胺(CTX)50mg·kg-1·d-1×2天)。单用环孢菌素A(CSA)3mg·kg-1·d-1预防移植物抗宿主病(GVHD)。移植后常规不用造血生长因子。结果 均顺利完成预处理及移植治疗。并发症发生率低,程度较轻,移植后+12天(中位时间)造血重建,14例已达供体完全或接近完全嵌合。随访120～485天,总存活率为87.5％。结论 NST能有效治疗多种血液病(包括恶性血液病),为血液病治疗提供又一安全有效的新策略。     

慢性粒细胞白血病的分子生物学特征与临床研究进展

Ｐｈ染色体是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的细胞遗传学标记，而ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排则为ＣＭＬ的分子基础。ＢＣＲ、ｃ－ａｂｌ基因重排及ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的结构，转录和表达是ＣＭＬ发病的关键环节．随着分子生物学技术的迅猛发展，对ｂｃｒ／ａｂｌ重组基因的研究日益深入有可能最终阐明ＣＭＬ的发病机制，并在临床上对ＣＭＬ诊断、分型、鉴别、预后判断及治疗等均有极其重要的指导意义．目前已在尝试利用分子生物学技术在基因水平根治ＣＭＬ，这项技术为治疗ＣＭＬ开辟了一条新途径。     

侵袭性NK细胞白血病并发多器官衰竭一例并文献复习

 目的　提高对侵袭性NK细胞白血病（ANKL）及并发多器官功能衰竭（MOF）的认识。方法　报道1例罕见ANKL的诊断、治疗经过并结合文献复习讨论。结果　患者经骨髓、免疫表型等检查确诊ANKL,发病及治疗过程中并发MOF（肝、肾、心、肺等）、代谢性酸中毒、肿瘤溶解综合征、弥漫性血管内凝血（DIC）。予VP方案化疗和相应对症治疗曾一度好转,但很快死于呼吸、循环功能衰竭。结论　ANKL易发生髓外浸润,并发MOF,病情凶险,预后差。     

增加地西他滨剂量治疗高危组骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病20例分析

目的探讨增加地西他滨剂量治疗高危组骨髓增生异常综合征(MDS)及急性髓系白血病(AML)的疗效。方法收集2009年9月至2012年1月在苏州大学附属第一医院高危组MDS及AML患者20例,静脉滴注地西他滨20 mg/m2,每日1次,连用5 d治疗,然后行骨髓检查,根据患者骨髓增生程度、原始细胞数、骨髓小粒饱满情况,结合患者的一般情况、不良反应,酌情增加使用地西他滨,分析治疗1个疗程后缓解率和总反应率。结果 MDS患者1个疗程完全缓解(CR)+骨髓CR为3例(75%),总反应3例(75%);AML患者1个疗程CR+骨髓CR 3例(18.8%),总反应8例(50.0%),其中初治患者1个疗程CR+骨髓CR 1例(25.0%),总反应3例(75.0%),复发及难治患者1个疗程CR+骨髓CR 2例(16.7%),总反应5例(41.7%)。累积2年生存率为42%。结论剂量增加的地西他滨可被安全应用于高危组MDS及AML,1个疗程缓解率较高,值得进一步探索。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性对造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的影响

  目的 探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）基因的多态性对造血干细胞移植后巨细胞病毒（CMV）感染的影响。方法 选择2005年10月至2011年5月行造血干细胞移植供受体138对,移植前采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）对供受体KIR基因分型,移植后2周起,每周采用荧光免疫组化法检测移植后患者外周血CMVpp65抗原,分析在CMV阳性组和CMV阴性组,供受体抑制性和激活性KIR基因以及供受体KIR单体型频率的差异。结果 供受体KIR基因频率分布和供受体AA,AB,BB单体型频率分布差异无统计学意义。供体2DS2、2DS4*003-007基因在CMV阳性组频率明显低于CMV阴性组（8%比16%,P=0.0420;3%比13%,P=0.0050）,受体KIR基因在CMV阳性组和阴性组频率的差异无统计学意义。供体BB单体型CMV感染率明显低于AA单体型（36.84%比64.38%,P=0.0299）,受体各单体型间CMV感染率差异无统计学意义。多因素分析发现2DS4*003-007,BB单体型与CMV感染有关。结论 供体KIR 基因多态性与造血干细胞移植后CMV感染相关。        

异基因造血干细胞移植术后并发癫痫14例临床分析

目的:分析造血干细胞移植术后癫痫的发病原因,探讨防治措施.方法:回顾性分析异基因造血干细胞移植218例临床资料,对术后并发癫痫患者的资料进行分析总结.结果:218例异基因造血干细胞移植术后发生癫痫14例,发病率为6.42%,死亡5例,病死率达35.7%;移植后癫痫的发生诱发因素为药物,颅内出血,水钠代谢失常及酸碱失调,糖尿病低血糖,感染及移植相关性血栓微血管病,移植物抗宿主病(GVHD)也常与癫痫相伴.结论:异基因造血干细胞移植术后患者并发癫痫预后差,积极处理诱发因素是防治癫痫最重要的措施.     

化疗联合自体DCIK细胞治疗急性白血病的临床研究

目的:采用体外培养的树突状细胞(Dendritic cell,DC)致敏、细胞因子诱导激活的杀伤细胞(Dendritic Cells with Cytokine-induced Killer,DCIK)治疗急性白血病患者,探讨DCIK细胞过继免疫治疗的临床疗效及安全性。方法:采用血细胞分离机分离患者外周血中单个核细胞,在体外诱导培养成DCIK细胞,流式细胞术检测外周血淋巴细胞免疫表型,MTT法检测DCIK细胞对人红白血病细胞K562的杀伤活性。经过质量检定合格后,回输给患者。观察输注期间的不良反应,治疗结束后定期复查患者血液学及遗传学缓解情况。结果:①回输给患者的细胞群中,CD3+CD56+细胞占(38.62±9.32)%,其对白血病细胞株K562的杀伤率为(57.6±2.9)%,回输后患者外周血CD8+、CD56+细胞百分比分别为(36.93±5.78)%、(41.94±13.15)%。②21例患者共接受50例次DCIK细胞治疗,1例接受9疗程治疗,1例接受7疗程治疗,2例接受4疗程治疗,1例接受3疗程治疗,4例接受2疗程治疗,11例接受1疗程治疗。自DCIK细胞回输开始,随访至2009年11个月底,中位随访时间14个月(2～44),3年总生存率(Overall survival,OS)、3年无事件生存率(Event free survival,EFS)分别为(61.9±18.5)%、(43.1±15.7)%。13/21例(61.9%)持续缓解,中位持续缓解时间为17个月(2～44),共8例复发(1例分子水平复发,7例血液学复发)。③21例患者中,DCIK细胞治疗时处于第1次缓解(First complete remission,CR1)期15例,11例持续缓解,4例复发;≥第2次缓解(Second complete remission,CR2)期6例,4例复发,2例持续缓解。④所有患者输注过程安全,无输注相关不良反应,无心电图及肝肾功能损害。结论:DCIK细胞治疗明显改善急性白血病的临床症状,是一种安全有效的治疗方法。     

CAR-T细胞桥接异基因造血干细胞移植治疗复发/难治急性B淋巴细胞白血病的临床分析

目的研究嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)细胞治疗桥接异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗复发/难治急性B淋巴细胞白血病(R/R B-ALL)的疗效及安全性。方法回顾性分析2017年1月至2019年5月于苏州大学附属第一医院行CAR-T细胞治疗桥接allo-HSCT的50例R/R B-ALL患者的临床资料,分析CAR-T细胞治疗前、后及allo-HSCT前不同骨髓微小残留病(MRD)水平患者总生存(OS)率、无事件生存(EFS)率、累积复发率(CIR)、移植相关死亡率(TRM)。结果全部患者共行55例次CAR-T细胞治疗,CAR-T细胞治疗反应率、严重细胞因子释放综合征(CRS)发生率分别为92%、28%。未发生治疗相关死亡。CAR-T细胞输注至allo-HSCT的中位时间为54(26～232)d。CAR-T细胞输注后中位随访637(117～1097)d,1年OS、EFS率分别为(80.0±5.7)%、(60.0±6.9)%。移植后1年CIR、TRM分别为(28.0±0.4)%、(8.0±0.2)%。CAR-T细胞输注后及allo-HSCT前骨髓MRD<0.01%患者1年...