缺血缺氧再灌注不同损伤程度人脐静脉内皮细胞变化与清开灵的干预效应(英文)

背景:“毒损脑络”是急性脑血管病的主要病机,以脑微血管损伤为主要表现。目的:建立不同缺氧缺血再灌注时间的细胞模型及施加药物干预,观察清开灵注射液对不同损伤程度人脐静脉内皮细胞ECV304的保护作用。设计:以培养的细胞为观察对象的随机对照实验。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科。材料:实验于2002-02/04在北京中医药大学附属东直门医院中心实验室完成。实验用人脐静脉内皮细胞ECV304随机分为7组,即正常组、缺氧6h再灌注12h对照组、缺氧24h再灌注12h对照组、缺氧24h再灌注12h低浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h高浓度清开灵组、缺氧6h再灌注12h中浓度清开灵组。清开灵注射液主要成分为牛胆酸、猪去氧胆酸、黄芩苷、栀子总苷等。方法:缺血再灌注模型的制作:①从培养箱中取出培养的细胞,缺氧6h再灌注12h对照组、缺氧24h再灌注12h对照组分别吸除原培养液,换入无糖Earle’s液,细胞放入缺氧槽中37℃缺血缺氧培养。缺氧6h再灌注12h对照组培养6h,缺氧24h再灌注12h对照组培养24h后,分别吸去无糖Earle’s液,换入无血清1640液后置于37℃CO2培养箱中再灌注培养12h。②缺氧24h再灌注12h低浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h高浓度清开灵组分别在缺氧24h再灌注12h对照组造模的基础上,向各自培养液中加入质量浓度为5,10,20mg/L的清开灵对细胞进行培养。③缺氧6h再灌注12h中浓度清开灵组在缺氧6h再灌注12h对照组造模的基础上,向培养液中加入质量浓度为10mg/L的清开灵。④细胞存活率以四唑盐比色试验测定,乳酸脱氢酶漏出率用乳酸脱氢酶试剂盒测定,细胞凋亡率行碘化吡啶染色后用流式细胞仪检测,Cellquest软件进行分析。主要观察指标:①细胞形态学观察结果。②各组细胞存活率、乳酸脱氢酶漏出率及细胞凋亡率。结果:①细胞形态学观察:正常组细胞密集,贴壁良好,伸展充分,细胞表面光滑,有较多的分裂期细胞,细胞长满底面,呈典型的“铺路石征”;缺氧6h再灌注12h对照组及缺氧24h再灌注12h低浓度清开灵组细胞形态改变不明显;缺氧24h再灌注12h对照组细胞较稀疏,脱壁较多,可见大量肿胀变圆的损伤细胞及破碎细胞的碎片,贴壁细胞皱缩明显,可见伪足,分裂期细胞少;缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组细胞贴壁良好,表面光滑,未发生皱缩,可见分裂期细胞。②各组ECV304细胞存活率:与缺氧24h再灌注12h对照组比较,缺氧24h再灌注12h低浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组均显著升高犤(42.5±2.8),(72.9±8.0),(80.3±12.7)%,P均<0.01犦,而缺氧24h再灌注12h高浓度清开灵组则显著下降至(10.1±0.4)%,P<0.01。正常组为100%。③各组ECV304细胞乳酸脱氢酶漏出率:与缺氧24h再灌注12h对照组比较,缺氧24h再灌注12h低浓度清开灵组、缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组均显著升高犤(6.6±1.4),(2.4±1.4),(2.4±0.5)%,P均<0.01犦,而缺氧24h再灌注12h高浓度清开灵组则显著升高至(16.1±2.2)%,P<0.01。正常组为(2.2±1.0)%。④各组ECV304细胞凋亡率:与缺氧6h再灌注12h对照组比较,缺氧6h再灌注12h中浓度清开灵组明显升高犤(2.2±0.5),(1.5±0.4)%,P<0.05犦;与正常组比较,缺氧24h再灌注12h对照组、缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组均显著升高犤(0.9±0.2),(5.5±2.5),(9.9±4.3)%,P均<0.01犦;并且缺氧24h再灌注12h中浓度清开灵组比与缺氧24h再灌注12h对照组升高更明显(P<0.01)。结论:①清开灵注射液对不同程度缺血再灌注损伤的ECV304细胞均有保护作用,但随着损伤程度的不同而表现为两种相反的保护形式。②对于缺血6h再灌注12h此类受损伤较轻的ECV304细胞,主要表现为降低细胞的凋亡率;而对于缺血24h再灌注12h此类缺血再灌注损伤较重的ECV304细胞,则增加细胞的凋亡率,使坏死的细胞减少。③与坏死细胞相比,凋亡细胞不发生溶酶体、线粒体及胞膜的破裂,没有内涵物的外泄,故不引起周围细胞的次级损伤,从而提高了细胞存活率,起到保护大多数细胞的作用。     

Role of β2-adrenoceptor-β-arrestin2-nuclear factor-κB signal transduction pathway and intervention effects of oxymatrine in ulcerative colitis

Objective:To investigate the β2-adrenoceptor(β2AR)-β-arrestin2-nuclear factor-κB(NF-κB) signal transduction pathway and the intervention effects of oxymatrine in a rat model of ulcerative colitis.Methods: Forty SD rats were randomly divided into four groups,which included the normal control group,the model group, the mesalazine group and the oxymatrine treatment group,with 10 rats per group.Experimental colitis induced with trinitrobenzene sulfonic acid(TNBS) was established in each group except the normal control group.The rats in the oxymatrine treatment group were treated with intramuscular injection of oxymatrine 63 mg/(kg·d) for 15 days and the rats in the mesalazine group were treated with mesalazine solution 0.5 g/(kg·d) by gastric lavage for 15 days. The rats in the normal control group and model group were treated with 3 mL water by gastric lavage for 15 days. Diarrhea and bloody stool were carefully observed.Histological changes in colonic tissue were examined on day 7 in 2 rats per group that were randomly selected.The expression of β2AR,β-arrestin2 and NF-κB p65 in colon tissue and spleen lymphocytes were detected with immunohistochemistry and Western immunoblotting techniques on day 16 after fasting for 24 h.Six rats died of lavage with 2 each in the normal control,the model group and the mesalazine group;and were not included in the analysis.Results:The rats in the model group suffered from looser stool and bloody purulent stool after modeling.But in the oxymatrine and mesalazine groups,looser stool and bloody purulent stool reduced after treatment.And the colonic wall in the model group was thickened and the colon length shortened.The colon mucosa was congested in multiple areas with edema,erosion,superficial or linear ulcer and scar formation,while the intestinal mucosa injury reduced in the mesalazine and oxymatrine groups(P<0.01).In colonic mucosa and in spleen lymphocytes,compared with the normal control group,the expression of NF-κBp65 were significantly increased(P<0.01) in the model group while the expressions ofβ2AR andβ-arrestin2 were significantly decreased(P<0.01).Compared with the model group,the expression of NF-κBp65 was significantly decreased in the mesalazine group(P<0.01) and oxymatrine treatment group(P<0.01) while the expressions of β2AR and β-arrestin2 were significantly increased(P<0.01).There were no statistically significant differences in the expression of β2AR,β-arrestin2 and NF-κBp65 between the mesalazine group and oxymatrine group(P>0.05).Conclusions:The β2AR-β-arrestin2-NF-κB signal transduction pathway participated in the pathologic course of ulcerative colitis.Oxymatrine attenuated ulcerative colitis through regulating the β2AR-β-arrestin2-NF-κB signal transduction pathway.     

构建缓慢释放碱性成纤维细胞生长因子的脱细胞羊膜人工活性真皮

背景：目前人工皮肤替代品的种类较多,各有优缺点,仍然没有一种理想的产品应用于临床。目的：探讨构建一种可以缓慢释放碱性成纤维细胞生长因子的新型人工活性真皮的可行性。方法：组织块法培养幼儿包皮成纤维细胞;采用酶-去垢剂法制备人脱细胞羊膜;双相法制备碱性成纤维细胞生长因子-明胶-壳聚糖缓释微球;缓释微球黏附于脱细胞羊膜上;三四代成纤维细胞培养于负载缓释微球的脱细胞羊膜上。结果与结论：制备的脱细胞羊膜为白色半透明状薄膜有较高的孔隙率,空隙不规则,孔径大小为10-100nm,无细胞毒性;碱性成纤维细胞生长因子-明胶-壳聚糖缓释微球分散较均匀,呈球形,粒径均匀,球体表面比较光滑,载药率为20ng/g,包封率为80.5%,体外药物缓释曲线显示药物控释效果良好;成纤维细胞在支架表面爬行生长良好,层粘连蛋白表达较对照组高。表明将成纤维细胞种植于负载碱性成纤维细胞生长因子-明胶-壳聚糖缓释微球的脱细胞羊膜上,缓释微球能较好地黏附于脱细胞羊膜表面。     

腋窝副乳腺的临床分型微创手术治疗:附68例报告

目的 探讨进行临床分型对微创治疗腋窝副乳腺的意义。 方法 对68例（116侧）腋窝副乳腺根据（1）脂肪/腺体比例（2）腺体相对位置,两项内容将腋窝副乳腺临床分为3型,分别采用吸脂、小切口腺体切除或乳腔镜技术微创治疗,观察手术及临床效果。 结果 临床分型各组间手术时间有统计学差异,出血量、引流量等无统计学差异。切口均Ⅰ期愈合,疤痕微小、隐蔽。 结论 对腋窝副乳腺临床分型后,采取不同术式进行微创治疗明显缩短手术时间,达到微创及美学效果,值得临床推广应用。       

静脉滴注不同剂量奥美拉唑对危重患儿胃内pH及不良反应的影响

目的：比较不同剂量奥美拉唑静脉滴注对危重患儿胃内pH及不良反应的影响。方法：选取我院2014年12月至2017年12月儿科综合重症监护室收治的应激性溃疡危重患儿80例,按随机数表法分为A、B两组各40例,A组患儿给予静脉滴注0.5 mg/kg奥美拉唑,B组患儿给予静脉滴注1.0 mg/kg奥美拉唑,观察两组患儿用药后48 h内胃内pH及pH>4的时间百分比和不良反应发生情况。结果：静脉滴注奥美拉唑后,24 h内B组患儿各时间段胃内pH>4的时间百分比、胃内pH均高于A组,但差异无统计学意义（P>0.05）。24~48 h B组患儿胃内pH>4的时间百分比为85.7%,显著高于A组的60.2%,差异有统计学意义（P<0.05）。B组患儿出现20例上消化道出血,A组出现15例上消化道出血,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：静脉滴注剂量0.5 mg/kg和1.0 mg/kg的奥美拉唑在24 h内均未对危重患儿胃内pH实现足够碱化。静脉滴注1.0 mg/kg奥美拉唑24~48 h的胃内pH时间百分比较高。两种给药剂量均未对患儿造成明显不良反应。     

精制蝮蛇抗栓酶治疗脑血栓形成30例临床观察

应用精制蝮蛇抗栓酶溶栓治疗30例脑血栓患者,经临床观察结果总有效率为96.7％,急性期起效时间少于3天者为76.3％,基本治愈率为73.6％,明显优于恢复期与后遗症,病程短,病灶单发者用药疗效佳,药物副作用小。     

健康教育在老年骨质疏松性髋部骨折护理中的应用

目的:加强健康教育在老年性骨质疏松性體部骨折患者中的应用,提高患者自身及监护人的健康教育意识,减少患者数量的增加,提高生活质量。方法:对我院在就诊的100例骨质疏松性髓部骨折老年患者采取随机分组的方法分为两组,分别为观察组与对照组,每组50人。给予对照组常规护理方法,观察组即在常规诊治的基础上增加健康教育,比较二者之间的护理效果与满意度的差异。结果:通过调查发现,老年患者对健康教育知识的了解甚少,造成老年人骨质疏松性骨折的原因有多种,但最常见的还是营养缺乏,钙供应不足以及在监护人疏忽下的跌倒为主。另外观察组的效果明显优于对照组,并且满意度同样高于对照组。结论:经过观察发现在老年患者中普及健康教育是非常必要的,另外其在老年骨质疏松性髋骨骨折的护理中效果极佳,满意度高,值得推广。