牙釉基质蛋白诱导牙釉质的再矿化研究

目的研究牙釉基质蛋白对牙釉质再矿化的影响。方法将利于与蛋白结合的羧基基团,通过紫外光辐射接枝在牙釉质缺损表面,加入到含SD大鼠牙釉基质蛋白的磷酸盐琼脂-醋酸钙溶液体系中,应用扫描电镜观察牙釉质表面经处理后的形态学改变,进而分析牙釉基质蛋白对羟基磷灰石晶体的组成和形貌的调控作用。结果在添加牙釉基质蛋白的凝胶体系中,牙釉质缺损表面可以见到羟基磷灰石生长晶体,晶体表现出了良好的结晶度,组成上为含有少量CO32-取代的羟基磷灰石晶体。结论在37℃恒温水浴,添加牙釉基质蛋白的凝胶体系中,牙釉基质蛋白对羟基磷灰石晶体的成核及生长有重要模板作用,证明牙釉基质蛋白能够诱导牙釉质再矿化。     

可降解材料的制备及应用研究进展

随着组织工程的发展,对于组织工程支架材料的要求越来越高,而生物可降解材料是组织工程支架材料中目前研究较多的一类材料,它是一类生物相容性好,植入体内后能在体液、酶、细胞等的作用下发生降解,变成小分子物质被吸收或通过新陈代谢排出体外的材料。目前研究的生物可降解材料的种类很多,如:胶原、纤维蛋白、甲壳素及其衍生物、天然珊瑚等的天然材料,也包括聚乳酸、聚乙醇酸、聚原酸酯等合成材料。 众所周知要合成一种全新的、完全符合组织工程支架要求的新材料难度很大,但利用材料的表面改性、接枝共聚或者复合可以改善某些材料性能,使其性能更有利于组织细胞的培养和繁殖,同时还可利用适当的方法调节材料的降解速率。     

壳聚糖对肝素微胶囊性能的影响

背景:壳聚糖、海藻酸钠是良好的天然的微胶囊制备材料,在组织工程中应用广泛。本课题组以往制备的抗凝血材料主要是运用材料的惰性以及模仿血管内壁的液晶态,而本实验是在此基础上,利用低分子肝素的生物抗凝活性及其他特异性能,对肝素进行微胶囊化,以期使肝素在体内的释放达到一种缓释的效果。目的:以天然的壳聚糖、海藻酸钠为微胶囊的包囊材料,对低分子肝素进行微胶囊化,以保证肝素在体内的稳定性,分析壳聚糖含量对肝素微胶囊性能的影响。设计:开放性实验。单位:广州暨南大学材料科学与工程系。材料:实验于2004-10/2005-06在暨南大学材料科学与工程系生物材料实验室完成。肝素(山东福瑞达生物化工有限公司,分子量<5000);壳聚糖(脱乙酰度≥90%,黏度<100cps,上海伯奥生物科技有限公司);海藻酸钠(青岛明月海藻工业有限公司);乳化剂为Span80,CaCl2均为国产化学纯。方法:①肝素-壳聚糖微胶囊的制备:取一定量肝素水溶液乳化于石蜡油中,充分搅拌使反应体系呈乳液状,然后使整个体系升温到50℃并维持20min。然后缓慢滴加20g/L壳聚糖水溶液,使体系升温到60℃,再滴加戊二醛,并使反应体系于80℃保持1h。离心分离,过滤洗涤,除去残留有机物,烘干。②肝素-海藻酸钠-壳聚糖微胶囊的制备:取一定量的海藻酸钠和肝素水溶液乳化于石蜡油中,充分搅拌使反应体系呈乳状液,维持20min。然后缓慢滴加含有不同浓度壳聚糖的CaCl2水溶液,保持30min。离心分离,过滤洗涤,除去残留有机物,烘干。③测定药物含量与包封率,确定肝素标准曲线,测定肝素微胶囊体外缓释情况。主要观察指标:①壳聚糖溶液浓度对肝素-壳聚糖微胶囊制备的影响。②戊二醛用量对肝素-壳聚糖微胶囊制备的影响。③海藻酸钠溶液浓度对肝素-海藻酸钠的影响。④壳聚糖浓度对肝素-海藻酸钠-壳聚糖微胶囊制备的影响。⑤不同材料包裹的肝素微胶囊的体外释放情况。⑥肝素含量与包封率的测定结果。⑦肝素微胶囊扫描电镜观察结果。结果:①随着壳聚糖溶液初始的增大,产物颜色加深,颗粒度增大,但颗粒的均匀性和成球性提高。②戊二醛用量增大,产物颜色加深,且使产物相互黏着严重。未与壳聚糖作用的戊二醛也可以自身固化而呈不规则颗粒物。③随着海藻酸钠浓度的改变,产物的成球特性没有明显的变化。④随着壳聚糖浓度的增加,成球性好,但当浓度达到一定程度时,微球之间有相互黏结的现象。将壳聚糖的浓度控制在质量比为2%较好。⑤随着壳聚糖含量的增大,肝素的释放速度变慢。⑥当微囊中的壳聚糖含量质量比达到20%时,肝素的包封率可以达到58%。单纯利用壳聚糖包埋肝素,肝素的包封率可以达到79.9%。⑦含有壳聚糖的微胶囊表面比较致密,同时随着戊二醛含量的增大,微胶囊会粘连在一起。结论:壳聚糖在一定浓度下对微胶囊的均匀性和成球性存在影响,壳聚糖的用量可以改变肝素的包封率,且随着壳聚糖用量的增加肝素的包封率随之提高,同时肝素的缓释速率相应降低。     

壳聚糖改性PVA膨胀海绵鼻腔填塞后鼻黏膜扫描电镜观察

目的 观察壳聚糖改性PVA膨胀海绵行兔鼻腔填塞后止血效果及鼻黏膜形态学变化.方法 22只新西兰白兔,2只作为正常对照,20只在行右侧颌鼻甲部分摘除后填塞壳聚糖改性PVA膨胀海绵,24 h后取出鼻腔填塞物,并分别于术后第3,7,14,30天处死动物,取出术区0.3 cm×0.3 cm大小黏膜上皮,扫描电镜下观察术区上皮变化.结果 20只白兔鼻腔填塞后均无鼻出血,24 h后取出鼻腔填塞物亦未见出血.扫描电镜观察术后第3天未见纤毛长出,术后第7天可见少量纤毛开始生长,术后第14天纤毛数量增多,排列较凌乱,术后第30天纤毛数量明显增多,排列较整齐.结论 壳聚糖改性PVA膨胀海绵止血效果可肯定且对鼻黏膜损伤有修复作用.     

吗啡复合罗哌卡因硬膜外腔术后镇痛对高血压病患者应激反应的影响

目的探讨吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛对高血压痛患者内皮素（ET），肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）的影响。方法40例拟行腹式全子宫切除术的高血压病患者随机分为两组：A组为对照组，术后根据需要间断肌注哌替啶镇痛；B组术后行吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛（PCEA）。采用放免法测定术前、术毕3h、术后24h及术后48h血浆ET、肾素活性（PRA）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度；监测心率、血压及VAS评分。结果B组术毕3h、术后24h及48h血浆ET值显著低于A组（P〈0．01），而且B组术毕3h及术后24h血浆PRA，AngⅡ值低于A组，B组术后收缩压（SBP）及VAS评分显著低于A组同期值（P〈0．01）。结论吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛，能有效减轻病人疼痛，抑制高血压患者ET、PRA和AngⅡ释放和应激反应，维持血流动力学稳定。     

壳聚糖/液晶复合水凝胶的制备及细胞相容性研究

 目的：基于仿生理念构建壳聚糖/液晶(CS/LC)复合水凝胶体系,通过观察复合水凝胶表面形貌和相分离结构、评价细胞相容性,探讨复合水凝胶体系中液晶微区结构形态对细胞行为的影响。方法：以CS为基底材料,复合具有一定流动和取向的羟丙基纤维素酯类LC,制备具有类生物膜结构的CS/LC复合基质,采用扫描电镜、X射线衍射等手段对复合材料进行表征分析,并进一步观察复合水凝胶对成纤维细胞活性的影响。结果：CS/LC复合水凝胶主要呈现非晶态,LC相以“岛屿”状态均匀分布于CS水凝胶基材中,与CS构成两相分离结构;细胞相容性实验表明复合水凝胶中嵌有连续分布的流动性LC畴有利于细胞的初始黏附与生长。结论：复合水凝胶的仿生结构及类组织黏弹性使其表现出良好的细胞相容性。     

壳聚糖与Ⅱ型胶原复合制作组织工程软骨支架及其性能研究

目的探讨采用壳聚糖与Ⅱ型胶原复合制作新型组织工程软骨三维多孔支架的方法,并对其理化性能进行检测. 方法将精制88%脱乙酰度壳聚糖溶于0.2 mol/L醋酸溶液制成2%溶液,高纯度猪Ⅱ型胶原溶于0.5 mol/L醋酸溶液制成1%溶液,两者按4∶1(重量比)充分搅拌混合,采用冷冻干燥法制成壳聚糖与Ⅱ型胶原复合支架.采用碳化二亚胺/ N-羟基琥珀酰亚胺对支架进行交联,力学测定比较支架交联前后的强度变化,扫描电镜观察其超微结构,于2、4、6和8周经溶菌酶体外降解实验测定其体外降解性. 结果制备的复合支架成形良好,交联后其力学强度明显增加.扫描电镜显示壳聚糖与Ⅱ型胶原成分在支架内分布均匀,支架内孔洞相互连通似海绵状,孔径100～250 μm.各时间段复合支架体外降解较单纯壳聚糖支架快. 结论壳聚糖与Ⅱ型胶原复合成功地制作成了三维多孔复合支架.其理化性能及体外降解测定,可以作为支架载体,应用于组织工程软骨的构建.     

聚乳酸膜等离子接枝聚合聚乙烯基吡咯烷酮及表面性能研究

背景:由于聚乳酸表面亲水性差、缺乏天然分子识别位点等缺点而限制了其应用.通过复合、化学接枝等方法试图引进亲水性基团,但过程比较复杂,并应用大量有机试剂,影响材料的生物相容性.目的:利用低温等离子技术对聚乳酸进行表面改性,改善其亲水性.设计:对比观察.单位:暨南大学科学与工程系.材料:实验于2004-10/2005-10在广州人工器官和材料工程研究中心实验室完成.实验用主要材料:聚乳酸(Mr 29 000,山东医疗器械研究所),乙烯基吡咯烷酮(美国Acros公司,使用前经重蒸纯化).方法:通过改变不同的工作条件(功率=150 W,时间=3,2,1 min;功率=30 W,t=10,8,5,3,1 min)选择优化条件,然后通过气相法和常压液相法进行PLA-乙烯基吡咯烷酮接枝反应.主要观察指标:通过扫描电镜和原子力显微镜观察材料的表面形态;水接触角测量仪测定材料等离子处理和等离子接枝前后亲水性的变化;傅里叶变换红外光谱仪测定材料的结构变化;通过材料改性前后质量变化分析材料的接枝情况.结果:①扫描电镜显示等离子处理和接技后的材料表面呈现大小不一的气孔和沟痕.②接枝后的水接触角由原来的78°下降到50°.③傅里叶变换红外光谱图表征1750cm-1吸收峰的低波数侧1 637.19 cm-1出现新的吸收峰,该峰对应于聚乙烯基吡咯烷酮链段上酰胺基团中的羰基伸缩振动吸收.④聚乳酸膜材料经低温等离子处理后,材料的质量变化百分数为-0.6.结论:等离子处理和接枝后材料的亲水性有明显变化,材料表面呈现大小不一的气孔和沟痕.此表面有利于细胞的黏附.     

改性PLA材料在软骨细胞立体培养中的应用

[目的]观察改性PLA材料与不同载体材料对关节软骨细胞的吸附作用、对软骨细胞形态和功能的影响及其自身降解,为软骨组织工程学选择合适的支架材料提供实验基础.[方法]将甲壳素(chitin,CH)分别加入聚乳酸(PLA)、胶原(Co)中,制成三维支架;将软骨细胞与三维支架材料进行复合培养,以单纯PLA、胶原材料为对照;利用相差倒置显微镜、扫描电镜观察软骨细胞生长情况及材料降解情况.免疫组化试剂盒检测Ⅱ型胶原表达.[结果]在加入软骨细胞悬液后,PLA/甲壳素(P/CH)组、胶原/甲壳素(Co/CH)组三维支架均对软骨细胞有良好吸附作用,2～3 d开始良好吸附,4 d开始分裂增殖,6 d后开始在PLA/甲壳素材料伸出的侧枝上形成软骨样组织,3周后检测具透明软骨特性;而单纯PLA组亲水性差,对软骨细胞吸附性差;胶原海绵组则降解太快(4周).[结论]PLA/甲壳素复合材料对软骨细胞有良好吸附作用,且降解较慢;在上述材料中是软骨细胞立体培养良好的三维支架.     

新型PLA-PVP两亲性共聚物性能的初步研究

利用烯类单体甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)的羟基引发消旋-丙交酯(D,L-LA)开环聚合,制备了末端双键功能化的聚乳酸大分子单体(PLA-HEMA).将功能化的聚乳酸大分子单体与N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)共聚,合成了兼有亲水性PVP主链和疏水性PLA支链的两亲性接枝共聚物,这种亲-疏水性微相分离结构与人体内血管结构相似,非常有利于细胞的粘附和生长;而共聚物同时又具备PLA良好的力学性能,故可望在组织工程研究中得到广泛应用.