Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响

目的 研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响,探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调存分娩发动中的作用机制.方法 构建腺病毒siRNA-calponin-1质粒,转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响;同时用Rhodamine-Phailoidin标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白(F-actin),荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测.结果 实验组与空载体组、空白对照组比较,子官平滑肌细胞的运动能力明显下降(P<0.05),细胞增殖能力及凋亡率无明显差异(P>0.05);空载体组与空白对照组比较,差异无统计学意义P>0.05).实验组子宫平滑肌细胞中F-actin的含量减少,排列松散、不规则、微丝较细;空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin微丝明显增多增粗、呈束状平行排列.结论 体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡,并可引起子宫平滑肌细胞F-actin的形态变化与重排.此结果提示:妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin的重排,可能是导致分娩发动的重要机制之一.     

子痫前期产妇胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度的变化

目的:研究子痫前期产妇胎盘床低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)蛋白的表达与母体外周血血管性假血友病性因子(von Willbrand Factor, vWF)浓度的变化,并探讨它们在子痫前期发病机制中的作用.方法:选取正常妊娠产妇、子痫前期轻度及子痫前期重度产妇各20例,采用Western印迹方法检测胎盘床HIF-1α蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测母体外周血vWF的浓度;Spearman相关分析比较两者的相关性.结果:HIF-1α蛋白在子痫前期重度组胎盘床中的表达最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.001).vWF浓度在子痫前期重度组母体外周血中最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度呈正相关(r_1=0.65,P＜0.001);母体外周血vWF浓度与子痫前期的病情程度呈正相关(r_2=0.61,P＜0.001).结论:HIF-1α和vWF可能在子痫前期的发生和发展中起协同作用.     

TNFR1和TNFR2与子宫内膜异位症发病的关系

目的 从基因和蛋白水平探讨肿瘤坏死因子受体1(TNFRl)和2(TNFR2)在子宫内膜异位症(简称内异症)发病中的作用.方法 采用原位杂交及免疫组化SABC法检测50例内异症患者(内异症组)在位及异位子宫内膜TNFRI mRNA、TNFR2 mRNA和TNFR2蛋白的表达,并与35例对照组在位内膜进行比较.结果 TNFR1 mRNA、TNFR2 mRNA在内异症组在位、异位内膜的光密度值分别低于对照组(P<0.05);TNFR2蛋白在内异症组在位、异位内膜及对照组间两两比较差异均无显著性(P>0.05).TNFR1 mRNA、TNFR2 mRNA和TNFR2蛋白在内异症组Ⅰ～Ⅱ和Ⅲ～Ⅳ期间差异均无显著性(P>0.05).三者在内异症组和对照组月经周期的增生期与分泌期差异亦无显著性(P>0.05);但TNFR1 mRNA、TNFR2 mRNA在内异症组增生期、分泌期光密度值分别低于对照组同期水平(P0.05).结论 内异症在位内膜TNFR1表达降低可能在内异症的发病中起重要作用;TNFR2可能起协同作用.     

腔镜在优化妇产科临床教学中的作用

妇产科临床教学一直是困扰教师的难题,腔镜是近十余年发展的新兴技术,由于其具有微创,直观录像等优点,近年我院将其合理应用在临床教学,发现能增加教学的生动性、趣味性,调动了学生学习的主动性与积极性,培养了学生的临床思维能力,优化了妇产科临床教学。     

子痫前期蜕膜组织差异蛋白的筛选与鉴定

目的应用蛋白质组学方法筛选子痫前期差异蛋白,探讨差异蛋白与子痫前期发生的可能关系.方法收集5例正常足月妊娠妇女和5例足月子痫前期重度患者胎盘母面及宫壁上的蜕膜组织,提取总蛋白.双向凝胶电泳技术对总蛋白进行分离,考马斯亮兰染色,获得蛋白质图谱.用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异蛋白,随机选取8个差异蛋白质点进行胶内酶解,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术获得肽质量指纹谱,搜寻蛋白质数据库鉴定蛋白质并进行初步分析.结果获得了正常妊娠及子痫前期重度患者蜕膜组织双向电泳凝胶图谱,蛋白质点子痫前期组为(436±13)个点,正常妊娠组为(425±16)个点,图像分析结果显示表达丰度相差2倍以上的差异蛋白质点有14个,它们在子痫前期中均表现下调.随机选取的8个蛋白质点均成功得到鉴定,它们分别是膜联蛋白-V,血红蛋白β链,Rho-GDP解离抑制剂1,氯离子细胞内通道蛋白1,原肌球蛋白4,平滑肌蛋白2202,α1-抗胰蛋白酶和纤维蛋白原β链.结论子痫前期重度患者蜕膜组织中存在差异蛋白,这些蛋白质在子痫前期的发病过程可能起重要作用.     

"方法比事实更重要"--在医学本科课堂教育中的几种教学方法运用浅论

本文介绍了目前医学教育的几种方法及应用情况，分析了它们的优缺点，认为医学本科教育的关键是教学生学会学习。     

稽留流产患者绒毛滋养细胞AAH的表达

目的:研究天冬氨酰-(天冬酰胺酰)β-羟化酶(AAH)在稽留流产患者及正常早孕妇女绒毛组织中的表达定位及差异.方法:选取经B超及β-HCG动态监测证实为稽留流产患者50例作为研究组,其中有已知可能原因者20例为研究组1,未知原因者30例为研究组2.选取同期经B超证实胚胎存活,在门诊要求行人工流产的早孕妇女20例作为对照组.根据稽留宫内时间长短不同将研究组分为≤4周组和>4周组.应用免疫组织化学方法比较各组绒毛滋养细胞中AAH的表达.结果:AAH在稽留流产患者及正常早孕妇女绒毛组织滋养细胞胞浆及胞核表达,稽留流产患者绒毛滋养细胞中AAH表达明显低于正常早孕妇女(P<0.05).有已知原因及未知原因稽留流产患者之间AAH表达无显著差异(P>0.05).稽留流产患者胚胎稽留宫内时间长短不同,AAH表达亦无显著差异(P>0.05).结论:AAH在滋养细胞胞浆及胞核中的低表达可能导致稽留流产的发生.     

紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及其意义

背景：Occludin蛋白是否在人早孕期胚泡植入中发挥作用,目前尚不能确定。目的：探讨紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及意义。方法：早孕的正常人流绒毛组织和稽留流产绒毛组织各30例,用半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在各组绒毛组织中的表达。结果与结论：紧密连接蛋白Occludin主要表达在于绒毛外的合体滋养细胞的胞浆,胞核和少许间质,细胞滋养细胞Occludin表达低。半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在正常人流和稽留流产绒毛组织中均有表达,前者的表达低于后者,但差异无显著性意义（P〉0.05）。说明紧密连接蛋白Occludin在绒毛组织有表达,细胞滋养细胞Occludin低表达可能是细胞滋养细胞极性消失的原因之一,参与细胞滋养细胞浸润能力形成,但胚胎发育停滞并不单是细胞滋养细胞侵润能力不足引起。     

改"传统模式"为"问题式"的妇产科见习带教

见习是医学生由理论走向临床的过渡阶段,改革"传统模式"为"问题式"的妇产科见习带教能适应现代医学生的思维模式,提高学习成绩(P＜0.05),改善心理状态,为培养高素质的医学人才打下坚实的基批.     

子宫内膜异位症腹腔液中细胞因子变化的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis，EM)的发病机制迄今尚不完全清楚，研究表明盆腔局部免疫环境的改变在EM的发生发展中起关键作用。本文主要就近年EM腹腔液中细胞因子的研究予以综述。