盐皮质激素受体基因多态性与妊高征相关性研究

目的探讨中国人群中盐皮质激素受体基因(MR)外显子3上A760G多态性与妊高征的相关性.方法以人外周血DNA为模板,通过聚合酶链式反应-等位特异性寡核苷酸杂交(PCR-ASO)方法测定95例随机妇女、101例正常孕妇、60例妊高征妇女的MR外显子3上A760G多态性频率.结果MR外显子3上A760G多态性位点中A等位基因和C等位基因在正常孕妇组中分别为83.17%与16.83%,在妊高征组中分别为84.17%与15.83%,在随机人群组中分别为86.84%与13.16%.结论中国人群中MR基因外显子3上存在A760G多态性,该多态性与妊高征不存在相关性.     

CYP2C9基因多态性与药物代谢

肝细胞色素CYP2C9催化一系列药物在体内的生物转化。CYP2C9基因多态性形成的个体差异是相关药物代谢差异的主要原因，本综述了CYP2C9基因的主要多态性类型在不同人群中的分布状况以及多态性与相关药物代谢的关系。     

ATPase 抑制因子1是与HCMV pUL23蛋白相作用的宿主蛋白分子-酵母双杂交技术筛选与鉴定

目的： 利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒相互作用的宿主蛋白分子,为探讨人巨细胞病毒pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据。方法: 利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,以获得与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用的宿主蛋白分子,再通过回交试验和体外GST-pulldown试验验证两者之间的相互作用。结果: 酵母双杂交筛选得到宿主蛋白分子ATPase inhibitory factor 1（ATIF1）,回交试验和体外GST-pulldown试验再次确认ATIF1能够与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用。结论: pUL23确实能够与ATIF1相互作用,它们之间的相互作用可能为研究pUL23在病毒生活周期发挥的功能提供依据。     

Prosaposin基因哺乳动物细胞表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立

目的构建前凋亡因子prosaposin的哺乳动物细胞表达质粒,转染NIH3T3细胞,建立稳定转染prosaposin的细胞系。方法采用PCR方法扩增prosaposin的开放阅读框,酶切后的PCR扩增产物和退火后的人工合成的c—Myc抗原表位标签,共同克隆至pcDNA3．1（＋）哺乳动物细胞表达载体中,构建pcDNA—Psap—Myc融合表达质粒。用脂质体将经过验证、测序的pcDNA-Psap—Myc质粒转染NIH3T3细胞,通过G418筛选建立稳定过表达prosaposin的NIH3T3细胞系。采用RT-PCR和western blotting方法,检测prosaposin在稳定转染的N1H3T3细胞系中的表达。结果成功构建了pcDNA-Psap-Myc融合表达质粒．建立了稳定过表达prosaposin的NIH3T3细胞系。RT—PCR和Western blotting结果表明,构建的稳定细胞系中成功表达prosaposin—Myc融合蛋白。结论Prosaposin哺乳动物细胞表达质粒的成功构建和稳定转染NIH3T3细胞系的建立,为进一步体外研究prosaposin蛋白的功能及其与其他分子间的相互作用奠定了基础。     

乙型肝炎病毒聚合酶与UXT蛋白的潜在相互作用鉴定

目的研究乙肝病毒聚合酶(HBV Pol)在肝细胞内潜在的相互作用的蛋白质因子,为揭示HBV Pol发挥功能的分子机制,进一步了解HBV在细胞内复制的机制提供依据。方法构建重组诱饵质粒pGBKT7-Pol,利用GAL4酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库得到与HBV Pol相互作用的蛋白质因子,再通过GST-Pull down验证蛋白间的相互作用。结果酵母双杂交筛选得到宿主蛋白Ubiquitously Expressed Transcrip(tUXT),GST-pull down确证蛋白间的相互作用。结论 UXT为一潜在的与HBV Pol相互作用的肝细胞蛋白质因子,这可能为研究HBV Pol在病毒生活周期中的功能提供线索。     

蛋白激酶C神经保护作用的研究进展

蛋白激酶C属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员,在各种生命现象中发挥着重要的作用。它调控细胞整个生长周期,表达异常会对神经细胞造成毒性,甚至导致细胞凋亡。本文介绍蛋白激酶C在调控神经细胞增殖与凋亡、发挥神经细胞损伤保护及抑制神经毒性中的作用,进一步探讨其可能的分子作用机制,为了解蛋白激酶C在神经系统疾病中的作用提供参考。     

光固定化藻蓝蛋白对内皮细胞生长的影响

从钝顶螺旋藻中提取、纯化藻蓝蛋白，并采用光固定法固定藻蓝蛋白到组织培养聚苯乙烯膜上，合成表面活性修饰材料；研究材料对内皮细胞生长的影响。     

限制性酶切位点多态性在家族性高胆固醇血症（FH）基因诊断中 …

利用长链ＰＣＲ技术从人白细胞基因ＤＮＡ中分离到一个长为５．０ｋｂ的ＰＣＲ产物片段，限制性内切酶切证实该片段是ＬＤＬ受体基因外显子１５－内含子１５－外显子１６片段，利用该片段中存在ＰｖｕⅡ酶切位点多态性，对一个家族性高且固醇血症家族进行基因连锁分析，证明该技术可以快速，简便地应用到家族性高胆固醇血症的基因诊断中。     

携带人生长抑素2型受体的腺病毒载体的构建和表达

目的： 构建表达SSTR2的重组腺病毒载体，用于胰腺癌的基因治疗。 方法: 构建重组腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2，通过脂质体与腺病毒骨架质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞，经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad-SSTR2。通过PCR鉴定Ad-SSTR2。经293细胞扩增，纯化制备高滴度病毒感染液。以病毒感染液感染人胰腺癌细胞capan-2，应用免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。 结果: 成功构建腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2，与pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞获得了重组腺病毒Ad-SSTR2，以Ad-SSTR2基因组DNA为模板同时扩增出了人SSTR2 cDNA基因片段和腺病毒骨架基因片段。Ad-SSTR2感染capan-2 48 h后，免疫印迹检测到SSTR2蛋白的表达。 结论: 表达人SSTR2的重组腺病毒载体构建成功，并在胰腺癌细胞中得到正确表达，为SSTR2基因治疗胰腺癌奠定了基础。     

RNase P对人巨细胞病毒mRNA的体外靶定切割研究

目的探讨棱酶P对HCMV UL97 mRNA的体外切割能力.方法以人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)磷酸转移酶mRNA序列为靶设计extemal guide sequences(EGS),共价结合到大肠杆菌来源M1 RNA中,构建成M1GS-T5核酶.对其进行UL97基因亚克隆片段转录产物的体外切割实验.结果该核酶在一定离子浓度下具对UL 97mRNA片段产生特异切割能力.结论新构建得到的核酶MIGS-T5具特异性切割活性,可发展为一种抗病毒试剂.