静息心率与代谢综合征关系的队列研究

目的 探讨静息心率（RHR）与MS发病的关系。方法 采用整群抽样方法,选择河南省某农村地区≥18岁常住居民为研究对象。2007年7-8月和2008年7-8月进行问卷调查、体格检查、血糖及脂质谱检测。2013年7-8月和2014年7-10月进行与基线相同内容的随访。结果 在平均6年的随访期间,MS累积患病率为21.89%（1 933/8 829）,其中男性为16.78%（664/3 957）,女性为26.05%（1 269/4 872）;控制潜在的混杂因素后,以基线RHR<60次/min组为参照,RHR 60～69、70～79、80～89和≥90次/min组发生MS的OR值（95%CI）分别为1.24（0.95～1.60）、1.42（1.10～1.84）、1.63（1.24～2.15）和1.62（1.16～2.27）,其中男性分别为1.12（0.81～1.55）、1.23（0.88～1.71）、1.42（0.97～2.07）和1.84（1.09～3.11）,女性分别为1.46（0.93～2.29）、1.70（1.09～2.65）、1.99（1.25～3.16）和1.78（1.06～2.98）。结论 女性MS发病风险高于男性且升高的RHR增加MS发病风险。应制定针对RHR升高的成年人群尤其是女性的MS综合干预策略和措施。     

日本血吸虫（中国大陆株）表达基因的EST序列测定及同源性分析

目的 运用表达序剜标签技术(EST方法),从Sj cDNA库中分离、鉴定和鉴定血吸虫表达基因序列。方法 应用EST方法,从Sj cDNA库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序列送入NCBl GenBank进行同源性检索,并对检索结果进行分析。结果 分离了46个Sj cDNA克隆,并对18个克隆cDNA插入片段的PCR进行直接序列分析,获得了16个EST序列。其中13个EST序列为GenBank中已知的血吸虫基因序列．3个未发现明显同源(score<200)基因序列。结论 采用EST-PCR直接序列分析方法可大量获得血吸虫表达基因EST序列,为进一步开展日本血吸虫（中国大陆株）表达基因的研究奠定了基础。     

日本血吸虫卵黄铁蛋白基因免疫小鼠的保护性研究

目的 研究日本血吸虫卵黄铁蛋白基因DNA免疫小鼠诱导的保护性免疫力。方法 将构建的日本血吸虫卵黄铁蛋白基因真核表达重组质粒pLXSN-Fer l经左右腿肌肉注射BALB/c小鼠,共免疫2次,间隔2周。末次免疫后5周以血吸虫尾蚴攻击感染,攻击感染后6周计数成虫负荷及肝组织虫卵数和死亡卵百分比。设空质粒免疫组为对照组。结果 pLXSN-Fer l免疫小鼠,诱生的IgG亚类主要是IgG2a和IgG2b;免疫组可产生较高水平的IgA和IFN-γ应答。pLXSN-Fer l免疫小鼠诱生一定程度的减虫率34.08%,减卵率36.33%,死亡卵百分比为30.13%。结论 pLXSN-Fer l免疫小鼠能产生较明显的保护性免疫力,值得进一步深入研究。     

甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶基因遗传进化分析

【目的】 了解季节性H1N1流感病毒与2009年新型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因的遗传进化关系,探讨甲型H1N1流感病毒的遗传变异规律&#65377;【方法】 分别从2006年和2009年流感病人标本中分离并鉴定出季节性HIN1流感病毒和新型H1N1流感病毒,用RT-PCR技术扩增了病毒NA基因全序列,并对其分子进化和重要功能位点的遗传变异进行了分析&#65377; 【结果】 2009年新型H1N1流感病毒与2006年季节性HIN1流感病毒比较,NA基因的同源性较低(77.9% ~ 78.8 %),与世界各地不同年代代表株及WHO推荐的1979 ~ 2010年季节性流感疫苗株比较,NA基因的同源性也较低(78.1% ~ 79.3%),但与WHO推荐的2009年新型H1N1流感疫苗株比较同源性则高达99%以上;系统进化分析结果表明,2009年新型H1N1流感病毒NA基因与欧亚猪流感病毒株A/swine/Belgium/1/1983的亲缘关系最近;并发现自2005年以来季节性H1N1流感病毒NA基因的某些抗原位点和神经氨酸酶活性位点已发生了变异&#65377;【结论】 2009年新型H1N1流感病毒NA基因可能来源于欧亚猪流感病毒;接种季节性流感疫苗不能对本次流行的新型流感产生有效的免疫保护作用;季节性H1N1流感病毒在流行过程中NA基因已发生了一定的变异,有必要持续跟踪和监测病毒的变异情况&#65377;     

对学龄儿童营养状况的宏观监测

对学龄儿童营养状况的宏观监测ＴｈｅＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇｉｎＥｌｅｍｅｎｔａｒｙＳｃｈｏｏｌｃｈｉｌｄｒｅｎ周俊梅何志谦１苏宜香１（华南理工大学食品工程系，广州５１０６４１）ＺｈｏｕＪｕｎｍｅｉ，ＨｅＺｈｉｑｉａｎ，ＳｕＹｉｘｉ...     

登革病毒3型病毒样颗粒在酵母体内的表达与鉴定

目的 探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-vLPs)的免疫原性.方法 用PCR法扩增登革病毒3型prME 基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33.对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-PAGE和Western blotting分析.用蔗糖密度梯度离心纯化表达的DENV3-VLPs并进行鉴定和电镜观察.结果 成功构建重组载体pGAPZaA-prME-D3,获得酵母转化子pGAPZaA-prME-D3/X33,并应用毕赤酵母表达了DENV3-VLPs,表达蛋白约50 000 Mr,电镜观察vLPs直径为20～50 am.结论 应用酵母表达系统成功表达了DENV-3 VLPs,经鉴定表明其具有免疫反应性,为后续免疫原性研究及四价登革vLPs疫苗的构建奠定了基础.     

登革病毒非结构蛋白NS1群特异性单克隆抗体的制备及初步应用

目的 制备登革病毒NS1群特异性单克隆抗体,建立可检测登革病毒1～4型NS1抗原的ELISA检测法,为登革热的早期快速诊断奠定基础.方法 应用毕赤酵母表达系统分泌表达登革病毒2型重组非结构蛋白NS1,以此为抗原免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养、间接ELISA筛选和亚克隆,获得能稳定分泌登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用所获得的单克隆抗体建立可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结果 从登革病毒2型NS1重组毕赤酵母(Pichia Pastoris-NS1)中获得了大量纯化的登革病毒重组NS1蛋白;经免疫小鼠、细胞融合、间接ELISA筛选及3次亚克隆后,最终获得2株能高效分泌抗登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D7B6B4和2D10E2F6,间接ELISA显示抗体效价高达1∶8 000～1∶16 000;ELISA及免疫荧光检测证实,其所分泌的抗体与1～4型登革病毒及其重组NS1蛋白均有特异性免疫反应,为登革病毒NS1群特异性单克隆抗体;两株单克隆抗体均为IgG2a亚类;初步建立了检测4个血清型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结论 成功研制出两株能高效分泌抗登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株.初步建立了可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA检测法.     

中国汉族人群apoBVNTR等位基因的多态性分析及其分型标准物的克隆制备

目的对中国汉族人群的apoB VNTR等位基因进行分布频率、序列结构等多态性分析,并通过分子克隆技术制备apoB VNTR等位基因分型标准物。方法通过PCR扩增并结合电泳、测序等方法分析人群apoB VNTR等位基因的多态性,并将该人群中得到的所有类型等位基因片段插入pUC重组质粒,经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后,制备出apoB VNTR等位基因分型标准物。结果所检测人群中共检测出16种apoB VNTR等位基因,发现核心序列存在变异体,并成功制备出分型标准物。结论对apoB VNTR的多态性分析应结合等位基因的分布频率与核心序列的结构,所制备的apoB VNTR等位基因分型标准物使apoB VNTR电泳法分型更加准确。     

日本血吸虫大陆株卵黄铁蛋白基因重组及其真核表达

目的 构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因（SjYolFer)的真核表达重组质粒pLYolFer,转染Hela细胞进行表达,并对表达产物进行鉴定。方法 用PCR法从日本血吸虫大陆株成虫cDNA文库中扩增目的基因片段,经RNA班点杂交显示转录差异。然后定向克隆人表达载体pLXSN。转染重组体到Hela细胞中进行表达,并用SDS-PAGE和Westernblot分析表达产物。结果 PCR扩增产物大小约600bp左右,与雌虫RNA的杂交信号明显强于雄虫,获得重组质粒pLYolFer,特异性表达产物约为21ku,能被日本血吸虫感染兔血清及小鼠血清识别。结论 为进一步免疫原性实验奠定了基础。     

尤瑞克林治疗动脉硬化性急性脑梗死的临床效果

目的观察尤瑞克林治疗动脉硬化性急性脑梗死的临床效果,为动脉硬化性急性脑梗死的治疗提供依据。方法选取2015年1月至2016年9月郑州市第二人民医院收治的120例动脉硬化性急性脑梗死患者,按照治疗方案将所有患者分为对照组(60例)和观察组(60例)。对照组患者接受常规治疗,观察组患者在常规治疗基础上加用尤瑞克林治疗,并对两组治疗前和治疗3周后的神经功能缺损程度、临床疗效及不良反应发生情况进行统计分析。结果治疗前两组NIHSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组患者治疗3周后的NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗总有效率为96.7%(58/60),高于对照组的76.7%(46/60),差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为8.3%(5/60),与对照组的8.3%(5/60)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论尤瑞克林治疗动脉硬化性急性脑梗死临床效果显著,可改善患者脑梗死后的神经功能缺损症状,且不会增加不良反应,有效改善患者预后,值得推广。