微低温超极化停跳对犬心肌细胞线粒体的保护作用

[目的]从心肌细胞线粒体改变的角度,比较超极化停跳和去极化停跳(钾停跳)的心肌保护效果.[方法]18只纯种比格犬,体质量8.5～15 kg,随机分为实验组和对照组,实验组10例,对照组8例.全麻后建立体外循环模型.阻断主动脉后从主动脉根部灌注停跳液20 mL/kg,全心缺血45 min后,恢复灌注60 min.实验组的停跳液为温血(34℃)尼可地尔(含尼可地尔400 μmol/L),对照组的停跳液为传统的4℃高钾停跳液(含钾22 mmol/L),停跳后两组心脏均局部冰敷以保持低温.心脏停跳期间若出现心电活动,则追加停跳液首量的三分之一.在主动脉阻断前、主动脉阻断40 min、主动脉开放30 min,用活检针穿刺取右室全层心肌行电子显微镜检查,每个标本随机选取6个视野照片,用图象分析系统分析计算线粒体的面积和周长,并计算得出线粒体体积密度、比表面和单位面积线粒体计数.检验水准α=0.05.[结果]两组中各有1例因主动脉阻断不全而被剔除,其它各例在实验中均无须追加停跳液.每组3个时间点之间、两组间线粒体的体积密度(volumedensity,V/V)、比表面(R8v)和单位面积线粒体计数的变化均无统计学意义(P＞0.05).[结论]在我们的实验方案下,超极化停跳和高钾停跳都能有效地保护心肌细胞线粒体,且两种方法具有相似的保护效果.     

黄色人工晶状体对兔视网膜光损伤的保护作用

目的混合光照射下,比较普通PMMA人工晶状体和黄色人工晶状体在兔视网膜光损伤中有无差别。方法采用超声乳化人工晶状体植入术将普通PMMA人工晶状体和黄色人工晶状体分别植入两组兔眼内,在相同的光照条件下进行视网膜光损伤照射。通过眼底检查、ERG检查及形态学检查比较二者视网膜的变化。结果普通PMMA人工晶状体眼出现严重的视网膜光损伤,表现为眼底水肿、功能异常及形态学异常,黄色人工晶状体眼仅出现电镜下所见的视网膜光损伤。结论黄色人工晶状体的抗视网膜光损伤作用强于普通PMMA人工晶状体。     

核黄素反应性脂质沉积性肌病治疗前后肌肉病理比较:一例报告并文献复习

目的观察核黄素反应性脂质沉积性肌病治疗前后肌肉组织变化。方法对1例核黄素反应性脂质沉积性肌病患者随访10年,比较左卡尼汀治疗前后临床表现和肌肉病理变化,并行电子转移黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)基因突变分析。结果患者具有脂质沉积性肌病的主要表现,四肢乏力、抬头费力、吞咽困难等;血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平明显升高;肌电图呈肌源性损害;肌肉病理观察可见大量脂质沉积;ETFDH基因突变分析呈杂合突变。经左卡尼汀治疗数年后恢复正常生活和工作,肌肉组织活检呈正常形态。结论脂质沉积性肌病患者经适当治疗后,不仅临床症状可完全缓解,而且可逆转肌肉病理改变。     

一种新型透射电镜样品半自动无级脱水装置

本文介绍一种新型透射电镜样品半自动无级脱水装置，其部件构成简单、合理，使用操作简便，而且省时、省力和省试剂，同时减少脱水过程对样品的损伤。     

无心跳供体中供肝微循环的动态变化

目的 探讨不同热缺血时间下大鼠无心跳供体肝组织微循环的变化规律，预测供肝耐受热缺血的安全时限。方法 实验动物按供肝热缺血时间分别为0、15、30、45、60min，随机分为5组。然后按各组条件分别作原位肝移植．对肝移植术后各组血清透明质酸(HA)的水平进行动态检测，以及观察肝组织微循环超微结构的动态变化。结果 在热缺血30min以内，移植肝组织复流后能逐渐恢复至正常的微循环结构和功能。热缺血45min，复流后大部分肝血窦腔可逐渐恢复通畅。但部分血窦仍充满较多的膜浆泡和血细胞积滞；热缺血45min以前各组术后3d血清HA可基本恢复。热缺血60min，复流后内皮细胞损伤不但不能恢复，且出现加重、扩大趋势。结论 供肝经受30min以内热缺血损伤，肝组织微循环的变化处在可复性阶段。45min的热缺血时间可能县供肝微循环功能耐受热缺血损伤的极限．热缺血60min以后．呈现不可逆性的微循环障碍．     

新型缺血再灌注模式诱导小鼠心肌细胞凋亡

目的 探讨联用垂体后叶素(以下简称Pit)及硝酸甘油(NG)造成缺血再灌注损伤,诱导小鼠心肌细胞凋亡的实验条件及有关机制.方法 以昆明种小鼠为实验对象,单纯经腹腔注入20μ/kg的Pit者为Pit组:30min后再注入10mg/kg的NG者为Pit和NG联用组,记录两组0,5,20,33,60min的心电图(以下简称ECG).80min取出小鼠心脏,用透射电镜及DNA琼脂糖胶电泳观察心肌凋亡的发生.结果 ECG表明在5min及33min前后,t波高度发生显著变化(P<0.05),电泳出现凋亡特征性梯带,电镜下可观察到染色体浓集、边聚等心肌细胞凋亡的特征性变化.结论Pit和NG联用能有效地诱导小鼠心肌凋亡,其机制可能与缺血再灌注损伤有关.     

吗啡对坐骨神经钳夹伤大鼠脊髓Ⅱ板层初级传入纤维终末突触重建的影响

目的 探讨吗啡能否促进大鼠受损伤的初级传人纤维终末在脊髓Ⅱ板层再生及其突触重建。方法 采用电镜定量方法计数吗啡组、生理盐水组和纳络酮吗啡组坐骨神经损伤后15d和30d，L4脊髓Ⅱ板层背根无髓传人纤维来源的Ⅰ型复合终末、背根有髓传人纤维来源的Ⅱ型复合终末和由中间神经元轴突和下行传导束轴突形成的简单终末。结果 吗啡组大鼠脊髓Ⅱ板层的Ⅰ型复合终末数比生理盐水组和纳络酮吗啡组明显增多，然而，Ⅱ型复合终末却比生理盐水组和纳络酮吗啡组少。3组大鼠脊髓Ⅱ板层的突触性终末总数，复合终末数和简单终末数没有差异。结论 吗啡能够促进大鼠脊髓Ⅱ板层受损伤的初级无髓传人纤维终末再生及其突触重建，这可能通过阿片受体介导。     

脑动脉平滑肌细胞培养

脑血管平滑肌的舒缩是引起脑血管疾病发生的重要病理变化。血管平滑肌细胞功能的调节依赖胞浆游离Ｃａ2 浓度。用共焦激光显微镜可以测试一个细胞内的Ｃａ2 动态 ,但所用细胞需粘附在培养皿上且不能被液体冲掉 ,因此即使使用原代细胞也需培养一段时间。如没有共焦激光显微镜 ,使用ＲＦ 5 0 0 0荧光分光光度计只能测定悬浮细胞内Ｃａ2 浓度的动态变化 ,这就需要大量的活细胞才能测试。因此必须建立脑血管平滑肌细胞培养方法。本实验用改进的组织贴块法培养牛脑血管平滑肌细胞 ,方法简便 ,经济 ,通过电镜鉴定 ,台盼蓝染色证实活细胞占 9…     

吗啡依赖大鼠背根节神经元胞体的光镜和电镜定量研究

在吗啡依赖条件下 ,观察了脊髓 板层发生轴突终末侧支生芽和建立新突触的背根节神经元的胞体是否出现相应的形态变化。应用光镜体视学方法 ,结合电镜观察和测量 ,比较吗啡依赖组与对照组背根节体积及其神经元胞体、胞核、核仁、粗面内质网和线粒体的体积变化。结果显示 :吗啡依赖组背根节体积与对照组比较未发现差异 ,背根节内的亮、暗两类神经元的胞体、胞核、核仁体积以及胞质内粗面内质网和线粒体体积也无显著性差异。结果表明 ,吗啡对大鼠背根节神经元胞体的形态结构没有明显的影响     

慢性压迫性颈脊髓损害的超微结构观察

目的:对颈脊髓慢性压迫性损伤的超微结构进行观察研究,探讨其病理生理机制。方法:短毛豚鼠12只,8只用于模型制备,4只为正常对照。建立颈脊髓慢性压迫动物模型,分别于术后4周、8周对实验动物进行运动功能及电生理评价,并分批处死动物取样切片,以日本东芝H-600型透射电镜(每次动物4只),与正常组进行对照。结果:术后4周脊髓前角运动神经元胞体肿胀,胞浆内粗面内质网排列尚规则,核糖体仅部分脱落,部分线粒体肿胀,线粒体嵴清晰。白质前索呈原发性脱髓鞘改变,髓鞘变薄排列松散,胶质细胞水肿,部分有脱髓鞘改变,轴索结构基本正常。脊髓内毛细血管腔变细,内皮细胞肿胀。术后8周脊髓前角神经元胞体缩小或固缩,核内染色质成团块状,粗面内质网排列紊乱,线粒体广泛肿胀,嵴模糊。白质侧索髓鞘排列松散,出现原发性脱髓鞘改变,前索广泛脱髓鞘改变,部分轴索出现变性、坏死等改变。脊髓内毛细血管腔闭塞,内皮细胞凋亡变性。结论:来自前方的颈脊髓慢性压迫性损害,早期主要引起脊髓前索的原发性脱髓鞘改变。随着压迫程度的加重和时间的延长,逐渐出现脊髓内血供障碍、脊髓前角运动神经元退变、前索轴突变性等不可逆性改变。