短发夹RNA诱导survivin基因缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响

目的研究应用载体表达短发夹 RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人 T 淋巴细胞白血病细胞株 Jurkat 细胞 survivin 基因的表达,探讨 survivin 基因表达缄默对 Jurkat 细胞凋亡和增殖的影响。方法构建针对 survivin 基因的 shRNA 重组质粒并转染至 Jurkat 细胞,分别用多重 PCR和 Western blot 法检测瞬时转染和稳定转染细胞 survivin 基因 mRNA 和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨 survivin shRNA 转染对细胞生长和增殖的影响。结果多重 PCR 结果示与无功能(对照组)shRNA 处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA 瞬时转染和稳定转染细胞 surivivin 基因 mRNA 表达均显著下降,抑制率分别为66.675% 和60.69%(P<0.05);Western blot 结果显示 survivin shRNA 瞬时转染和稳定转染细胞survivin 蛋白表达水平亦显著降低,抑制率分别为63.41% 和60.18%(P<0.05)。流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞的凋亡率显著增加,分别为(22.41±2.83)% 和(20.73±2.56)%(与对照组比较,P均<0.05),细胞倍增时间显著延长。生长曲线显示稳定转染细胞的生长显著减慢。结论shRNA 重组质粒介导的 RNA 干扰能明显抑制 Jurkat 细胞 survivin 基因 mRNA 和蛋白产物的表达,诱导细胞凋亡和生长抑制。     

β catenin和E cadherin表达预测早期胃癌切除术后复发的临床意义#br# #br#

目的探讨β 连环蛋白（β catenin）和上皮型钙黏蛋白（E cadherin）对早期胃癌（T1～2N0期）患者行根治术后复发的预测价值。 方法选择2012年7月至2014年6月期间在遂宁市中心医院行手术切除的早期胃癌组织样本366例,随访患者复发情况。采用免疫组化染色法检测胃癌组织β catenin和E cadherin表达,及其表达与胃癌临床病理特征的关系。多因素Logistic回归模型分析影响复发的独立危险因素。 结果随访期内共有42例患者复发,复发和未复发患者在病理类型、浸润深度、分化程度、受教育程度以及居住地之间差异存在统计学意义（P＜005）。366例患者中221例β catenin高表达,150例E cadherin高表达,且β catenin和E cadherin表达与浸润深度、分化程度以及复发情况密切相关（P＜005）。多因素Logistic回归分析结果显示,浸润深度、β catenin和E cadherin异常表达是胃癌术后复发的独立因素（P＜005）。复发胃癌患者中β catenin和E cadherin表达无相关性（r=-0033,P=0836）。 结论β catenin和E cadherin表达异常可作为早期胃癌患者术后复发的预测指标,有助于筛选术后复发的高危患者。     

在不同应激状态下MDM2基因对Jurkat细胞的作用

【目的】探讨MDM2基因在不同应激状态下对T细胞性白血病细胞株Jurkat增殖、凋亡和基因表达的影响。【方法】采用RNA干扰下调白血病细胞株Jurkat MDM2基因表达后，用Western blot、流式细胞术等方法检测Jurkat细胞在不同应激状态下的变化。【结果】无应激状态下，MDM2基因表达下降后，Jurkat细胞增殖减慢，细胞周期表现一定程度的G1-s阻滞；E2F1表达明显降低超过78％，p65表达下调超过58％；细胞损伤后，MDM2表达下调可导致细胞损伤修复减慢，增强紫外线和甲氨喋呤诱导凋亡作用，导致甲氨喋呤作用下Rb和Bax基因的表达相对增加。【结论】在不同应激状态下，MDM2基因表达下降广泛影响Jurkat细胞的增殖、凋亡和基因表达等生物学特性，提示MDM2基因有可能作为T细胞性白血病治疗的潜在新靶点。     

沉默BIRC7基因的Jurkat稳定细胞系建立

【目的】通过RNA干扰技术（RNAi）建立稳定性BIRC7基因沉默的Jurkat实验细胞模型。【方法】应用pSilencer4．1-CMVneo构建BIRC7shRNA表达载体，采用脂质体将载体导人Jurkat细胞，利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后，行RT-PCR和Westernblot等技术检测细胞BIRC7表达水平。【结果】成功筛选出分别携带二种重组shRNA表达的Jurkat细胞系。与对照组细胞相比，转染BIRC7 shRNA的细胞BIRC7 mRNA表达下降约〉70％，BIRC7蛋白表达减少〉60％。生长曲线显示生长速度减慢，细胞倍增时间延长，细胞凋亡率增加。【结论】稳定转染重组BIRC7 shRNA表达载体能有效干扰BIRC7基因表达，表明RNAi技术可以成为研究BIRC7基因功能的有效工具。BIRC7有可能成为T-淋巴母细胞性白血病／淋巴瘤治疗的潜在新靶点。     

卡瑞利珠单抗联合白蛋白紫杉醇和卡铂治疗晚期食管癌的临床研究

目的 分析卡瑞利珠单抗联合白蛋白紫杉醇和卡铂治疗晚期食管癌的临床效果。方法 选择2020年1月—2021年10月安徽医科大学第一附属医院医院东城院区收治的晚期食管鳞状细胞癌患者96例,按随机抽签法分为对照组（48例）和治疗组（48例）。对照组患者静脉滴注注射用紫杉醇（白蛋白结合型）和卡铂注射液治疗,第1、8天滴注注射用紫杉醇（白蛋白结合型）,125 mg/m²;第1天静脉滴注卡铂注射液,200～400 mg/m²。治疗组在对照组基础上静脉滴注注射用卡瑞利珠单抗,第1天,200 mg/次,每3周1次。21 d为1个周期,两组治疗2个周期。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者生存期、免疫功能指标、肿瘤标志物、血清炎症因子水平及程序性死亡-配体1（PD-L1）和肿瘤错配修复缺陷（dMMR）水平。结果 治疗后,治疗组24个月无进展生存（PFS）率、总生存率（OS）、客观缓解率（ORR）、疾病控制率（DCR）、疾病进展时间（TTP）均明显高于对照组（P＜0.05）。治疗后,两组T淋巴细胞（T_总）、Th、Th/Ts、自然杀伤细胞（NK）、树状突细胞（DC）、DC/单核巨噬细胞（PBMC）水平明显升高,而抑制性T细胞（Ts）、糖类抗原19-9（CA19-9）、癌胚抗原（CEA）、角蛋白19片段抗原21-1（CYFRA21-1）、鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）、TNF-α和IL-8水平明显降低（P＜0.05）,且治疗组这些指标水平明显好于对照组（P＜0.05）。治疗后,治疗组PD-L1水平降低,而PD-L1＋/dMMR水平升高（P＜0.05）,且患者预后良好组PD-L1水平降低、PD-L1＋/dMMR占比升高（P＜0.05）。结论 卡瑞利珠单抗联合白蛋白紫杉醇和卡铂治疗晚期食管癌可改善晚期食管鳞状细胞癌患者的肿瘤标志物水平,抑制炎性反应,提升免疫功能,提高患者的生存率。     

浅谈高校临床肿瘤学教学中的几个问题

随着肿瘤发病率的不断增加,临床肿瘤学教学越来越重要。安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科提出肿瘤学教学需强调：肿瘤系慢性病,需长期、合理的治疗;病理诊断至关重要;循证医学、综合治疗与个体化治疗不可缺少;关注病人疼痛、心理;分子靶向治疗系肿瘤学的研究方向。通过具体实践,发现采用多种教学形式综合授课可有效提高学生的学习兴趣。     

子宫颈粘膜相关淋巴组织淋巴瘤6例临床病理分析

目的：探讨子宫颈粘膜相关淋巴组织淋巴瘤（MALT-ML）的临床病理特征。方法：分析6例临床表现。病理常规染色及ABC法免疫组化染色。结果：6例均为B细胞性；CCL细胞型和淋巴浆细胞型4例，大细胞型2例。结论：大多数子宫颈MALT-ML为低度恶性，手术为首选治疗方法；若发生大细胞转化，则预后差。     

微波固定组织对超微结构影响的电镜观察

目的：观察微波照射固定对组织细胞器结构的影响，方法：将大鼠肝组织分别浸泡在生理盐水、０．２５％戊二醛、２．５％戊二醛、５戊二醛液体中，按不同时间进行微波照射固定后，常规制片，电镜观察。结果：ＭＩ时间≤２０ｓ，液体的温度≤２５℃，肝细胞内各有形成分均有一煊膨胀。ＭＩ时间≥６０ｓ，液体的温度≥４５℃时，肝细胞内各有形成分不同程度破坏，其中戊二醛各组较生理盐水组严重，且戊二醛组中，戊二醛浓度越高，对细胞     

丹皮酚诱导人食管癌Eca-109裸鼠移植瘤凋亡的机制探讨

目的通过观察用药后COX-2、Bcl-2和Survivin的变化,探讨丹皮酚(paeonol,Pae)诱导Eca-109食管癌裸鼠移植瘤凋亡的机制。方法体外培养食管癌Eca-109细胞,裸鼠皮下接种Eca-109细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,36只荷瘤裸鼠随机分为6组,分别为模型对照组、Pae不同剂量组(25、50、100、200mg·kg-1)和阳性药对照组(cisplatin,CD-DP,5mg·kg-1)。治疗2wk后处死裸鼠,剥取瘤体称瘤重并计算抑瘤率。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞凋亡。免疫组化S-P法检测移植瘤组织COX-2、Bcl-2和Survivin的表达。结果Pae50、100和200mg·kg-1组和CDDP5mg·kg-1组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为23·54%、27·91%、34·46%和58·71%,与模型组比较差异均有显著性(P<0·05orP<0·01)。TUNEL染色可发现棕褐色的凋亡细胞呈散在或片状分布,Pae各剂量组的凋亡指数(apoptosis index,AI)分别为(11·02±2·58)%、(19·80±2·77)%、(24·48±4·35)%和(27·13±4·39)%,与模型组(4·81±0·83)%比较,差异均有显著性(P<0·05orP<0·01)。免疫组化结果显示,Pae能明显抑制移植瘤组织COX-2、Bcl-2和Survivin的表达(P<0·05 or P<0·01)。结论Pae能抑制Eca-109食管癌裸鼠移植瘤生长、诱导凋亡而发挥抗肿瘤作用,其机制可能与下调COX-2的表达并抑制Bcl-2和Sur-vivin的表达有关。     

氟比洛芬酯脂微球注射液治疗难治性癌症疼痛的临床观察

目的观察氟比洛芬酯脂微球载体注射液治疗难治性癌症疼痛的疗效和副作用。方法37例已使用麻醉性止痛药效果不佳的患者,每日静脉注射50 mg/5 ml氟比洛芬酯脂微球载体注射液,同时合并使用麻醉性止痛剂。分别就其疗效及不良反应等方面进行评价。结果氟比洛芬酯脂微球载体注射液治疗难治性癌症疼痛的总有效率为91.9%(34例/37例)。未见腹痛、消化道出血等副作用,也未见便秘、恶心、呕吐、嗜睡等不良反应。结论氟比洛芬酯脂微球载体注射液治疗难治性癌症疼痛疗效好,不良反应发生率低,在中、重度疼痛时,本药用于麻醉性止痛药治疗过程中的疼痛有良好效果。