常染色体显性多囊肾组织差异表达基因的初步研究

目的应用基因芯片技术及最新公共数据库，筛选常染色体显性多囊肾组织中差异表达的基因，对其进行功能分类，并对其中1条基因利用原位杂交技术进行验证。方法将代表8398条人类基因的PCR产物制成基因芯片。将等量的多囊肾组织和正常肾组织mRNA分别用Cy5、Cy3荧光标记，逆转录合成cDNA探针，混合后与上述基因芯片杂交。扫描杂交信号荧光强度，找出差异表达基因，对获得的基因进行分子生物信息学分析。并对其中的上调表达基因IGF1 mRNA进行原位杂交，验证基因芯片结果的准确性。结果（1）在进入研究的8398条基因中，共发现357条差异表达基因。94条基因在多囊肾组织中低表达，263条基因高表达；（2）上调表达基因主要属于原癌基因，细胞骨架蛋白和运动相关蛋白，凋亡相关蛋白，细胞信号和传递蛋白，细胞因子；下调表达基因主要属于抑癌基因，DNA结合、转录和转录因子，细胞信号和传递蛋白，参与代谢的基因；（3）IGF1 mRNA原位杂交结果与芯片结果一致。结论基因表达谱芯片可快速、高效地筛选差异表达基因；多囊肾病的发生、发展中存在着多种不同功能基因表达调控的改变。     

抗多囊蛋白1氨基端单克隆抗体的制备和鉴定

目的 :用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白 1胞外区氨基端的单克隆抗体 (mAb) ,并对其特异性进行鉴定。方法 :以肾组织总RNA为模板 ,用RT PCR扩增多囊蛋白 1胞外区氨基端的编码基因PKD1cDNA。将该基因克隆到融合蛋白表达载体pQE3 0中 ,转染大肠杆菌M15。以异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达多囊蛋白 1胞外区氨基端的组氨酸融合蛋白 (PC1 e2 ) ,用亲和层析法纯化。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠 ,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株Sp2 / 0进行细胞融合 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,有限稀释法进行单克隆化。mAb的特异性用间接ELISA和Westernblot鉴定。结果 :克隆到两个编码多囊蛋白 1氨基端的cDNA片段 (50 2bp和 471bp)。构建的表达质粒经酶切和DNA测序证实 ,为所需要的质粒。表达出相对分子质量 (Mr)分别为 1980 0和 1890 0的融合蛋白 ,经Westernblot鉴定 ,均为多囊蛋白 1的融合蛋白。用Mr 为 1890 0的融合蛋白免疫小鼠 ,得到杂交瘤细胞株 7B1。Westernblot分析表明 ,该细胞株分泌的mAb能特异地与多囊蛋白 1氨基端结合。结论 :本实验表达了PKD1多拷贝区所编码的PC1 e2 ,成功地制备了抗多囊蛋白 1胞外区N端的mAb。     

中枢神经系统不同部位来源的神经干细胞在体外生长特性的比较

目的 比较相同发育阶段中枢神经系统不同部位来源的神经干细胞在体外的生长特性。方法 胚胎小鼠(E14)于无菌条件下分别分离并收集皮层、纹状体、间脑、中．后脑和脊髓,各部分制备成单细胞悬液,接种在添加有纤维细胞生长因子(FGF)的无血清培养液内,神经干细胞克隆生成后,经免疫细胞化学方法鉴定细胞特性,并在相同条件下进行传代,相差显微镜下观察克隆生成和细胞的迁移特性。结果 在添加有纤维细胞生长因子的无血清培养液中,少量接种的单个细胞会增殖并形成悬浮于细胞培养液中的细胞克隆。这些克隆具有生成新克隆并分化成神经元和胶质细胞的能力。在相同发育阶段,皮层、纹状体、间脑均可生成悬浮的克隆,其中皮层生成的速度最快,纹状体、间脑较慢,中．后脑、脊髓生成克隆的速度最慢;生成克隆后,皮层克隆的贴壁能力最差,贴壁的克隆少有细胞从其底部迁出,纹状体、间脑克隆较易贴壁,贴壁克隆底部有明显的细胞迁出,中．后脑、脊髓生成的克隆不易悬浮,很快贴壁,在贴壁克隆的底部有大量的细胞迁出。结论 在无血清培养液中,神经干细胞可在体外增殖、传代并分化生成神经元和胶质细胞,不同部位来源的神经干细胞在体外生成克隆的速度和细胞迁移性不同,这可能同体内特定部位细胞的发育特性有关。     

广西百色壮族大学生体脂肪率及其年龄变化研究

目的为了解壮族大学生体质状况,监测壮族大学生的身体成分。方法以在广西右江民族医学院就读的561名20～23岁壮族大学生为研究对象,采用国产的BC-532人体脂肪测量仪测量体脂肪率、内脏脂肪率、体水分率、基础代谢率,同时测量身高和体重。结果壮族大学生身高、体重、体脂肪率、内脏脂肪率、体水分率和基础代谢率,同一性别与前一年龄组相比较,除女生22～岁组与21～岁组相比较差异具有统计学意义(P<0.05)外,其余结果比较均无统计学意义,其中前3项及后2项男、女同一年龄组间比较,差异具有显著的统计学意义(P<0.01);高体脂肪率男、女生分别占男女生总数的5.06%和0.61%,低体脂肪率男、女生分别占男女生总数的20.25%和15.64%。结论内脏脂肪率,男生中有2.95%稍微超标,女生全部在标准范围内。倡导大学生应建立正确的饮食观念和健康的生活方式,并树立有规律的体育锻炼的意识。     

延长原发宫颈恶黑患者生存期的综述

恶性黑色素瘤(简称恶黑)是起源于上皮基底层黑色素细胞的恶性肿瘤.女性生殖道恶黑约占女性全身恶黑的3%,主要发生在外阴及阴道,原发于宫颈的恶黑则更为罕见.     

CA125阴性卵巢癌血清标志物差异蛋白质组学的研究

目的:通过二维差异凝胶电泳(2-DEDIGE)和基质辅助激光解吸离子化-飞行时间(MALDI-TOF/TOF)串联质谱差异蛋白质组学方法寻找CA125阴性卵巢上皮癌血清标志物,以提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度。方法:收集103例卵巢上皮癌,60例正常对照,63例卵巢良性肿瘤、63例盆腔良性病变的血清。按年龄匹配,选取6例CA125阴性卵巢癌和6例正常对照组的血清等容积混合。祛除血清高丰度白蛋白和IgG后进行2-DEDIGE。实验重复3次。通过DeCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点,MALDI-TOF/TOF鉴定差异蛋白质。分别用WesternBlot和ELISA方法验证获选的血清标志物。结果:(1)经2-DEDIGE实验得出有显著差异的蛋白质点41个,MALDI-TOF/TOF成功鉴定了其中的28个蛋白质点。上调最显著的蛋白质点为结合珠蛋白(haptoglo-bin,Hp),下调最显著的蛋白质为转铁蛋白(transferrin,Tf);(2)WesternBlot和ELISA验证结果显示,CA125阴性卵巢上皮癌血清Hp和Tf与正常对照有显著差异(P<0.001);(3)CA125+Hp+Tf联合检测(两者或两者以上阳性判断为阳性)诊断卵巢上皮癌的灵敏度和特异度高于CA125、Hp和Tf单独检测。结论:Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质,可作为卵巢上皮癌的血清标志物。CA125+Hp+Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度,有助于提高CA125阴性卵巢上皮癌的检出率。     

西宁地区延续护理对慢性心力衰竭患者康复的影响

目的：探讨西宁地区延续护理对慢性心力衰竭（CHF）患者康复的影响。方法：经青海省心脑血管病专科医院伦理委员会讨论批准该项研究。80例慢性心力衰竭（CHF）患者随机分为观察组和对照组各40例,观察组患者由专职护士运用延续护理服务,而对照组只进行药物治疗,随访6个月观察两组6min步行距离、心功改善及再入院情况。结果：与对照组相比,观察组6min步行距离延长心功能Ⅱ级患者（446.9±72.1）m比（318.8±65.3）m,心功能Ⅲ级患者（299.6±56.4）m比（228.2±51.5）m,心功能改善率提高（85.0%比62.5%）,再住院率降低（20%比45%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：延续护理的实施有利于提高患者对疾病的自我管理能力,从而改善CHF患者的心功能,提高运动耐量,降低再住院率,改善患者生活质量。     

五种新生儿动脉采血法穿刺方法的比较

由于新生儿的生理、解剖等原因,其对穿刺成功的要求很高。将桡动脉、足背动脉、颞浅动脉、头皮动脉及股动脉五种穿刺方法进行比较,探讨有效的穿刺方法。