检测DENV-2活病毒含量RTCA标准曲线法的建立

目的利用实时无标记细胞分析系统(real-time cellular analysis,RTCA)建立半数细胞指数时间(CIT50)与病毒滴度(TCID50)相关性的标准曲线,评估RTCA技术在监测2型登革病毒(DENV-2)感染BHK细胞后引发细胞病变效应(CPE)中的可行性和应用价值。方法检测不同培养条件下BHK细胞的CI值变化,筛选合适的初始细胞接种密度及血清浓度;应用RTCA分析已知不同TCID50滴度DENV-2感染BHK细胞的CIT50值,构建CIT50-TCID50标准曲线,计算回归方程;收集DENV-2感染C6/36细胞后第1~4d的培养上清(D1,D2,D3,D4),利用RTCA法和TCID50法分别检测上清中DENV-2滴度,分析CIT50-TCID50标准曲线法的灵敏度和可行性。结果 BHK细胞以初始接种密度为2×104个/孔,血清浓度为2%的培养条件为最佳;不同滴度DENV-2感染后BHK细胞的生长曲线均左移,CIT50与TCID50间呈线性负相关,线性方程为y=-7.007x+75.546(R2=0.9854);不同时间感染C6/36细胞培养上清中病毒含量(logTCID50/mL):RTCA标准曲线法为4.90±0.05(D2)、6.18±0.20(D3)、6.04±0.10(D4);传统TCID50法为0(D1)、6.25±0.49(D3)、5.87±0.35(D4)。结论利用RTCA技术建立的CIT50-TCID50标准曲线法,可用于已知DENV-2在BHK细胞的定量检测,结果较TCID50法更客观,且该法操作便捷且灵敏度高,为评估DENV-2感染性活病毒颗粒的毒力提供了新的技术手段。     

变异链球菌乳酸脱氢酶与霍乱毒素B亚单位嵌合表达质粒的构建和表达

目的:构建含变异链球菌乳酸脱氢酶(LDH)和霍乱毒素B亚单位(CTB)嵌合原核表达质粒,并诱导表达融合蛋白。方法:应用PCR技术扩增LDH编码基因ldh和CT编码基因ctxB,定向克隆至原核表达质粒pET32a(+)上,通过限制性内酶切、PCR和序列测定分析鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达融合蛋白。结果:PCR扩增得到了ldh和ctxB;构建的质粒pET-LDH/CTB经KpnⅠ、XhoⅠ双酶切和目的基因PCR检测,均得到1.4 kb大小的片段,与预计目的基因片段大小相同;质粒pET-LDH/CTB中插入的ldh序列与GeneBank中ldh比较同源性为98%,ctxB的同源性达99%,插入的相位正确;经IPTG诱导表达了约70×103的蛋白。结论:成功构建了变异链球菌LDH和CTB嵌合表达质粒pET-LDH/CTB,并正确表达融合蛋白。     

5例肺癌脑转移误诊分析

肺癌脑转移的病人,临床表现以偏瘫、失语和头痛头昏等神经系统功能损害为首发症状并非少见。由于医师对疾病的原因重视不够,检查不仔细,因此,经常导致误诊.为了引起重视,本文将我科误诊为脑血栓的5例肺癌脑转移病例(临床情况见附表)如下:     

颈肋综合征3例

颈肋综合征(Cervical rib syndrome)是由 willshire 氏于1860年详细描述,1958年由 Rob 和 Standeuen 氏把颈肋综合征归类于胸出口综合征(Thoracic OutletSyndrome)的一种。本综合征临床症状较为复杂,其发病机制一般认为是由于臂丛神经和锁骨下血管遭受畸形颈肋压迫,本文根据三例颈肋综合征病例的临床表现,结合文献资料现讨论如下:例1:男26岁。从1978年5～6月间,患者常感双上肢有麻木异样感,双手握拳无力,手指伸直困难。天气变冷时,两手发凉苍白。不久患者发现自己两手部肌肉萎缩。在     

有氧训练、腹式呼吸和气功对轻度COPD患者的康复作用

目的:观察和比较有氧训练、腹式呼吸和气功锻炼对早期轻度慢性阻塞性肺病(ChronicObstructivepulmonarydisease,COPD)患者的康复作用。方法 :临床诊断轻度COPD患者62例 ,分有氧训练(n=20)、腹式呼吸(n=18)和气功锻炼(n=24)3组 ,观察康复训练6个月后6min走距离及步行末Brog评分、健康感、肺功能及临床疗效。结果 :3种方法都能降低6min走Brog评分以腹式呼吸和有氧训练为显著 ,提高健康感积分以有氧训练和气功锻炼为著。3种方法临床疗效分别为70 %、33.3 %和75 %。结论 :有氧训练、腹式呼吸和气功锻炼对轻度COPD患者有较好的康复作用 ,有氧训练和气功锻炼能减少上呼吸道感染或用药 ,对轻度COPD患者尤显重要     

血液病患者血小板参数及其直方图的临床意义

新型血液分析仪器的推广使用，使临床上的血小板检测由以往单一的计数发展到目前多项参数测定，如血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)以及血小板分布图。笔者就血液病患者血小板参数及其直方图的临床意义进行探讨，现报告如下。     

膝关节骨关节炎MRI表现

目的：评价MRI在膝关节骨关节炎临床诊治中的价值。方法：对127例184个受累膝关节骨关节炎MRI各序列图像进行分析。结果：所有膝关节均表现不同程度MRI异常信号改变,15个仅表现为单纯软骨下骨质水肿．27个表现为I级软骨损伤,35个表现为Ⅱ级软骨损伤,40个表现为Ⅲ级软骨损伤,67个表现为Ⅳ级软骨损伤,82个关节间隙不均匀变窄,103个膝关节存在轻一中等度滑膜增厚,少一中等量关节腔积液。软骨损伤MRI分别表现为高信号软骨内异常低信号影．软骨面毛糙、缺损、完全缺失、骨赘形成。软骨下骨单纯水肿在T1wI上表现为片状低信号,FS-T1WI-FLASH上呈高信号,骨质吸收破坏呈斑片状长T1长T2影,境界清晰,骨质增生硬化在MRI各序列上均呈片状、条状、环状及分隔状低信号。结论：MRI能准确反映膝关节骨关节炎损伤的程度、范围,为临床对骨关节炎的诊治提供了可靠、直接的依据。     

急性上尿路梗阻性肾衰的临床处理

急性上尿路梗阻性肾衰的临床处理王益鑫，黄翼然，吴家骏，邱峰，黄旭元１９８９年８月至１９９４年３月，抢救３４例上尿路梗阻引起的急性肾功能衰竭患者取得较好效果，报告如下。临床资料本组３４例。年龄３６～７８岁，平均５８．３岁。男２９例，女５例。１８例为独肾...     

短期大剂量糖皮质激素致皮肤副作用2例

糖皮质激素类药物主要用于抗炎、抗病毒、抗休克和免疫抑制治疗,在临床各科多种疾病的诊治上应用广泛,但是临床上不合理的应用非常突出。长期大剂量应用糖皮质激素类药物所致副反应普遍而严重,已引起医务人员的重视。但短期大剂量使用糖皮质激素类药物亦可引起严重副作用,容易被临床医护人员忽视。现我们报道两例短期大剂量使用糖皮质激素所致严重皮肤副反应病例,希望医护人员能从中吸