肾镜在下尿路结石治疗中的应用

目的:探讨和推广应用肾镜和钬激光粉碎膀胱和尿道结石。方法:回顾性分析膀胱结石16例,尿道结石2例患者资料。结石大小1.5～4.5cm。先用扩张管带Peel-away鞘进入前尿道,至尿道球部时退出扩张管,保留Peel-away鞘。然后插入肾镜,在直视下进入膀胱。找到结石后,利用Peel-away鞘固定结石,置入钬激光进行碎石。碎石片直接经Peel-away鞘直视下冲洗出,无需用另外的冲洗球冲洗膀胱。结果:18例均成功碎石,手术时间18～45min,术后住院时间3～8d,2例尿道结石患者为门诊手术,碎石后即可带导尿管回家。术后10天随访,无结石残留,无尿道狭窄发生。结论:利用肾镜粉碎膀胱及尿道结石,其优点在于可以直视下用Peel-away鞘固定结石,减少结石碎片散落,并且碎石片直视下冲出,减少副作用,缩短手术时间。     

肾移植受者术前供者反应性干扰素γ和转化生长因子β生成细胞的频数及其意义

LISPOT与肾移植术后6个月肾功能相关,可能为肾移植受者远期预后提供信息.     

双特异性单链抗体介导的T细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用

目的 研究并比较两种抗人γ-精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体介导T细胞杀伤前列腺癌细胞的作用.方法 利用流式细胞仪分析双特异性单链抗体(BsAb)及多价双特异性单链抗体(mBsAb)与LNCaP细胞和Jurkat细胞的亲和力;将LNCaP细胞作为靶细胞,分为抗体浓度固定组和效应细胞/靶细胞比例固定组,利用51Cr释放试验评价两种双特异性单链抗体在体外介导T细胞杀伤靶细胞的能力;将Jurkat细胞种植裸鼠后,建立裸鼠前列腺癌模型,并分为非治疗组、对照组、BsAb组和mBsAb组,进一步评价两种双特异性单链抗体在体内介导T细胞杀伤靶细胞的能力.结果 流式细胞仪结果显示:BsAb和mBsAb均可特异性结合LNCaP细胞和Jurkat细胞,阳性结合率分别为56.3%、55.4%和74%、83%.51Cr释放试验结果显示:在体外,BsAb和mBsAb均可介导T细胞对前列腺癌细胞的杀伤,并且T细胞的杀伤效率与抗体浓度和效应细胞/靶细胞比例呈正相关.与非治疗组和对照组比较,接种前列腺癌细胞的裸鼠在体内注射激活的细胞毒T细胞的同时分别接受两种抗体的治疗后,肿瘤生长均明显受到抑制(P＜0.05).另外,体外介导杀伤作用和体内抑制肿瘤生长等方面,多价双特异性抗体的效果明显优于双特异性抗体.结论 同时识别人γ-精浆蛋白和CD3分子的双特异性单链抗体可有效地介导T细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用,并且双特异性单链抗体四聚体的形成可明显改善抗体介导杀伤作用的效率.     

成人胰岛细胞肝内移植的临床研究(附1例报告)

目的 评估成人胰岛细胞肝内移植治疗1型糖尿病的临床疗效及价值。方法 2003年间对1例1型糖尿病患者行了3次成人胰岛细胞肝内移植术,术后观察移植前后的血糖、C肽、胰岛素用量和免疫抑制剂的应用等指标．密切观察病情变化,积极防治并发症。结果 移植后患者饮食不受限制,生长发育良好,未发生酮症酸中毒．未发生低血糖反应,血糖平均水平降低了27％,胰岛素用量减少到移植前的40％,C肽水平较移植前有明显的提高。结论 建立了成人胰岛细胞肝内移植的一整套方法,取得了治疗1型糖尿病的临床疗效。     

抗前列腺特异抗原/抗CD3双特异性单链抗体四聚体的活性研究

目的:研究抗前列腺特异抗原(PSA)/抗CD3双特异性单链抗体四聚体的生物活性.方法:利用流式细胞仪和51Cr释放试验评价双特异性单链抗体四聚体的抗原亲和活性和体外介导杀伤靶细胞的效果. 利用裸鼠前列腺癌模型分析其在体内介导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤的能力.结果:抗PSA/抗CD3双特异性单链抗体四聚体可以特异性结合表达前列腺癌细胞和CD3阳性的淋巴瘤细胞,阳性结合率分别为70.4%和81%. 在体外,有细胞毒T淋巴细胞存在时该四聚体可引起前列腺癌细胞的裂解,在抗体浓度固定组和效应细胞/靶细胞比例固定组,靶细胞裂解率分别随着效应细胞/靶细胞比例和抗体浓度的增加而增加,最高裂解率分别可以达到(80.3±5.2)%和(78.6±5.5)%. 与对照组比较,接种前列腺癌细胞的裸鼠在体内注射激活的细胞毒T淋巴细胞的同时接受该四聚体的治疗后,肿瘤生长明显受到抑制(P＜0.0001).结论:抗PSA/抗CD3双特异性单链抗体四聚体具有良好的生物学活性,具有体外杀伤肿瘤细胞和体内抑制肿瘤生长的作用.     

CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因多态性对肾移植患者他克莫司剂量及浓度的影响

研究CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因突变对他克莫司血药浓度/剂量×体表面积(C/D′)、不良反应和急性排斥反应的影响。采用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切片段长度多态性(RFLP)方法检测227例肾移植患者CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因型,比较不同基因型患者之间他克莫司的C/D′值、不良反应和急性排斥反应发生率的差异。测得CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因型在肾移植患者中的突变频率分别为30.8%和74.2%。消除CYP3A5*3等位基因影响后,CYP3A4*18B各基因型间他克莫司C/D′值无显著性差异(P>0.05);而消除CYP3A4*18B等位基因影响后,CYP3A5*1/*1和*1/*3基因型患者的他克莫司C/D′值显著低于*3/*3(P<0.01)。CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因多态性与不良反应和排斥反应间差异无统计学意义(P>0.05)。     

MC148基因对RANTES趋化单核细胞的拮抗作用

目的 研究人β趋化因子同源物MC148基因对趋化因子RANTES的拮抗作用。方法 从传染性软疣病毒(MCV)基因组中克隆MC148DNA片段，通过同源重组构建Ad—MC148腺病毒重组体。重组体转染293细胞，从上清液提纯蛋白MC148P。通过趋化实验研究MC148P对RANTES趋化单核细胞的抑制作用。结果 构建了复制缺陷型腺病毒重组体Ad—MC148，重组蛋白MC148P可以剂量依赖性地拮抗趋化因子RANTES对单核细胞的趋化作用。结论 MC148P是趋化因子RANTES的拮抗剂，可以拮抗RANTES对单核细胞的趋化作用。对趋化因子类似物的研究有望为抑制器官移植排斥反应找到新途径。     

成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病

目的 探讨新型成人胰岛细胞分离、纯化技术分离的成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的安全性与有效性.方法 采用全氟化碳液(PFC)和UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE 2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞.通过上腹部小切口,胃右静脉或脐静脉插管,将经短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到11例1型糖尿病患者肝脏内.采用达利珠单抗或阿来佐单抗进行诱导,西罗莫司和他克莫司联用的方案预防排斥反应,术后观察胰岛素使用情况,监测血糖、G-肽与糖化血红蛋白水平以及肝功能、肾功能.结果 45个胰腺中,42个成功分离出胰岛细胞,其数量平均为28.5×104胰岛当量(IEQ)/个,纯度为95.7%,活率为93.2%,胰岛素释放试验刺激指数为2.43.11例1型糖尿病患者共行胰岛细胞移植20次,其中移植1次4例,2次5例,3次2例,每次移植胰岛细胞数平均为11 200 IEQ/kg.术后随访6个月至4年,6例完全撤除胰岛素,2例胰岛素用量较术前减少80%,3例减少50%.术后血糖稳定维持在正常水平,C-肽均超过0.166 nmol/L,糖化血红蛋白基本正常,肝、肾功能正常,未发生与胰岛细胞输注相关的并发症.结论 新型成人胰岛细胞分离、纯化方法可靠,采用该技术分离、纯化的成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床效果较好.     

HLA配型对群体反应性抗体阳性的肾移植受者人/肾存活率的影响

目的探讨HLA交叉反应组（CREGs）配型对群体反应性抗体（PRA）阳性肾移植受者人／肾存活率的影响。方法应用美国莱姆德公司LAT1240、LM720R、SSP2LB试剂，准确检测112例PRA阳性肾移植受者体内PRA的水平及其抗体的特异性，评估其致敏状态，应用CREGs配型标准选择最匹配的供者。结果112例受者中，HLA-Ⅰ类抗体阳性43例，Ⅱ类抗体阳性39例，Ⅰ、Ⅱ类抗体均为阳性30例；HLA配型0～5个位点错配数分别为6、39、38、21、7、1例，术后移植肾发生加速性排斥反应2例、急性排斥反应18例、慢性排斥反应5例、移植肾功能延迟恢复（DGF）4例，因排斥反应导致移植肾切除1例，死亡13例（其中移植肾带功能死亡5例）。目前人存活99例，肾存活96例，5年、3年和1年肾存活率分别为86．21％、86．96％和91．96％。结论运用CREGs配型原则，能使供、受者间的HLA相配率显著提高，可减少PRA对肾移植的不良影响，提高PRA阳性受者的人／肾存活率。     

我国心死亡器官捐献中存在的问题及对策我国心死亡器官捐献中存在的问题及对策

供器官短缺是全球器官移植面临的最大问题之一。我国器官捐献率明显低于欧美等发达国家,心死亡器官捐献（DCD）是现阶段解决器官短缺的关键性措施。我国DCD工作刚开始,涉及到一系列伦理、法律、人权等社会问题。为避免出现器官买卖现象,保障器官捐献工作的有序开展,必须加强器官捐献工作的规范管理,用法律来规范器官捐献的社会行为,用行政手段建立具有中国特色的器官捐献协调系统,用严谨的科学态度制定器官分配的规则和合理的捐献救助标准,以保证DCD工作的健康、可持续发展。