骨纤维结构不良合并骨囊肿1例并文献复习

骨纤维结构不良（fibrousdysplalia，FD）又称骨纤维异常增殖症．是一组以骨纤维变性为特征的类肿瘤疾患，是先天性非遗传性疾病。好发于颅骨、上颌骨、股骨近端和胫骨干，     

不同转染方法对逆转录病毒转染效率影响的研究

目的探讨不同加样方法对逆转录病毒转染软骨细胞效率的影响。方法将构建并包装好的逆转录病毒重组基因PLNCX2-IL-1Ra—GFP分别采用以下加样转染方法进行转染并作对照研究，a）第1组：先加病毒上清，6h后补充培养液．b）第2组：先加病毒上清，隔夜补充培养液；c）第3组：先加病毒上清，6h后更换成培养液，隔夜培养后弃液，重复先加病毒上清，6h后更换成培养液；d）第4组：先加病毒上清，6h后补充培养液，隔夜培养后弃液，重复先加病毒上清，6h后补充培养液；e）第5组：经典转染法，同时加病毒上清液和培养液。转染2d后免疫荧光显微镜下观察荧光显色，4周稳定转染后分别检测各组细胞培养液中NO含量，并用ELISA法检测上清液中hIL-1Ra的表达情况。结果酶切鉴定重组基因正确；免疫荧光显微镜观察可见绿色荧光显色；1～5组NO含量以第4组为最高，第5组为最低；ELISA检测1～5组培养液中hIL-1Ra的含量以第4组为最高，第5组为最低。结论四种不同加样转染方法的转染效率均高于经典法，其中以第4组为最好。     

“2008年骨质疏松性骨折及骨科新进展论坛”会议纪要

2008年5月16日至18日，“2008年骨质疏松性骨折及骨科新进展论坛”及“银丝带”骨健康大讲堂全国巡讲活动在山西国贸大饭店隆重召开。本次活动经中华医学会批准，由中华医学会骨科学分会、中国健康促进基金会、山西医科大学第二医院主办，《实用骨科杂志》协办，旨在提高对骨质疏松性骨折的诊断与治疗水平。本次大会有幸邀请到中国工程院院士邱贵兴、山西省副省长胡苏平、     

转化生长因子-β1基因和胰岛素样生长因子1基因联合转染治疗兔膝骨性关节炎的研究

目的观察重组大鼠转化生长因子(TGF)-β1和胰岛素样生长因子(IGF)-1基因转染兔膝关节后对骨性关节炎(OA)的治疗效果。方法前交叉韧带切断法(ACLT)将新西兰白兔膝关节制成OA模型,分为5组,分别向膝关节内注射转染了不同重组基因的阳性克隆软骨细胞。4 周和8周后,取关节标本进行Mankin’s评分,AB-PAS染色,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原原位杂交和免疫组织化学检测,透射电镜观察。结果手术对照组软骨损伤程度较大,其Mankin’s评分为 9．50±0．96(4周)和12．5±1．71(8周),明显高于空白对照组(P<0．01)和TGF—β1基因转染组、双基因转染组(P<0．05);各因子原位杂交和免疫组织化学染色,空白对照组(P<0．01)及TGF-β1 基因转染组、双基因转染组(P<0．05)的灰度值高于手术对照组;双基因转染组的灰度值较单基因转染组高(P<0．05);8周时各对应组灰度值较4周有明显下降(P<0．05);透射电镜观察显示,手术对照组的超微结构较空白对照组明显紊乱,经基因治疗4周后,超微结构逐渐恢复正常,但在8 周后,其紊乱程度又逐渐加重。结论关节内注射转基因软骨细胞对OA有一定治疗作用;TGF-β1 和IGF-1双基因的治疗效果优于单基因;基因治疗4周后,基因表达逐渐减弱,基因治疗具有时效性。     

帕瑞昔布钠超前镇痛在人工全膝关节置换术围手术期镇痛的疗效观察

目的评价帕瑞昔布钠超前镇痛在人工膝关节置换术（TKA）围手术期镇痛的临床疗效。方法选择单侧TKA术患者60例,随机分为帕瑞昔布钠组（A组）、对照组（B组）各30例。A组术前1h给予肌注帕瑞昔布纳40mg一支,在麻醉复苏时即刻静脉使用PCIA泵,术后6h后再次给予肌注帕瑞昔布钠40mg一支。B组术前不给任何镇痛处理,在麻醉复苏时即刻静脉使用PCIA泵。观察并询问患者术后2h、4h、8h、12h、24h和48h疼痛视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）,患者按术后12h、24h按压PCIA次数,术后24h、48h膝关节被动活动最大可忍受度及药物不良反应情况。结果与B组相比,术后2h、4h、8h、12h时VAS评分降低,术后24h、48h膝关节被动活动最大可忍受度增大,A组术后12 h和24 h按压PCIA次数减少,药物不良反应发生减少。结论在TKA术围手术期合理应用帕瑞昔布钠,可以达到良好的超前镇痛目的,减低术后疼痛VAS评分,减少PCIA次数和药物不良反应的发生,改善患者术后早期活动度。     

反转录病毒载体介导转化生长因子β1基因体外转染兔膝关节软骨细胞的表达

背景：将功能基因片段整合到基因载体内,再将基因载体转染入靶细胞中或转染入关节腔内,通过转基因的靶细胞持续大量分泌功能基因产物,在一个较长的时期内保持局部治疗浓度,可修复关节软骨损伤。 目的：以重组反转录病毒载体介导转化生长因子β1体外转染兔膝关节软骨细胞,观察其表达情况及其对软骨细胞生物学性状的影响。 方法：采用胰酶消化法分离培养兔软骨细胞。载体经PLNCX2 Hind Ⅲ/Not Ⅰ双酶切、去磷酸化后,与载体pDsRed2双酶切得到大的部分多克隆位点和RFP基因连接,构建PLNCX2-RFP。转化生长因子β1基因从PGEMT-TGF中扩增,经双酶切后与PLNCX¬2-RFP连接,构建PLNCX2-TGFβ1-RFP。包装反转录病毒载体,并检测病毒上清滴度。将培养的兔膝关节软骨细胞分组转染：对照组(不做任何转染)、转染PLNCX2组、转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组,持续筛选2周,观察细胞变化。收集稳定转染的细胞上清液,以NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响,以ELISA法检测细胞培养上清液中人转化生长因子β1表达。 结果与结论：重组基因PLNCX2-TGFβ1-RFP经酶切鉴定测序TGFβ1、RFP、序列均正确,表明构建成功预期的真核表达载体PLNCX2- TGFβ1-RFP。转染到包装细胞并筛选培养后,病毒滴度为1×106 CFU。稳定转染软骨细胞后可观察到红色荧光,证明转染成功。持续筛选2周,散在贴壁细胞形成阳性克隆,逐渐弥漫融合,并有细胞簇出现,双核多见,细胞增生活跃。转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组NO浓度高于对照组、转染PLNCX2组(P < 0.05),对照组、转染PLNCX2组间差异无显著性意义。对照组与转染PLNCX2¬组均无转化生长因子β1表达,转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组转化生长因子β1质量浓度为(28.08±3.73) ng/L。提示反转录病毒载体PLNCX2介导的人转化生长因子β1能有效转染到兔膝关节软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃。     

pcDNA3+转化生长因子-β1单独转染及其与pAT153+胰岛素样生长因子-1共转染兔软骨细胞的研究

目的 探讨重组大鼠转化生长因子-β1基因（pcDNA3＋TGF-β1）单独转染及其与重组大鼠胰岛素样生长因子-1基因（pAT153＋IGF-1）共转染兔软骨细胞后细胞增殖及所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原的变化。方法 兔软骨细胞体外分别用pcDNA3＋TGF-β1单转染、pcDNA3＋TGF-β1和pAT153＋IGF-1共转染，筛选阳性克隆后，进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、^3H．TdR（^3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷）检测。结果 基因转染组与空白组相比，TGF-^31、IGF-1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高，空白组、基因单转染组、基因双转染组软骨细胞位于S期的比例分别为5．6％、33．4％、40．1％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 基因pcDNA3＋TGF-β1、pAT153＋IGF-1转染软骨细胞后，细胞分泌的TGF-Ⅱ1、IGF-1及Ⅱ型胶原显著增多，细胞增殖明显增强，上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高；pcDNA3＋TGF-β1和pAT153＋IGF-1双基因共转染软骨细胞后，细胞分裂增生活跃程度及分泌的TGF-β1、IGF-1和Ⅱ型胶原含量高于pcDNA3＋TGF-β1单基因转染，多基因共转染作为将来骨性关节炎基因治疗的方法，其治疗效果可能会优于单基因转染。     

骨性关节炎关节软骨内Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原表型的实验研究

目的对骨性关节炎（OA）关节软骨内Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原进行动态观察. 方法采用兔膝关节伸直位制动的OA动物模型,对不同制动时间动物的右侧股骨内髁关节软骨进行Mankin评分,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原的免疫组化测定. 结果 OA早期Ⅱ型胶原量增加,但随着OA病变的发展从切线层向深层逐渐丧失.OA关节软骨内无Ⅰ型胶原的分泌,但出现Ⅲ型胶原,其量随着病变发展有呈增加趋势,同时在病变中也受到破坏. 结论 OA关节软骨的胶原类型以Ⅱ型胶原为主,但出现Ⅲ型胶原.     

反转录病毒载体介导转化生长因子β_1基因体外转染兔膝关节软骨细胞的表达

背景:将功能基因片段整合到基因载体内,再将基因载体转染入靶细胞中或转染入关节腔内,通过转基因的靶细胞持续大量分泌功能基因产物,在一个较长的时期内保持局部治疗浓度,可修复关节软骨损伤.目的:以重组反转录病毒载体介导转化生长因子β_1体外转染兔膝关节软骨细胞,观察其表达情况及其对软骨细胞生物学性状的影响.方法:采用胰酶消化法分离培养兔软骨细胞.载体经PLNCX_2 Hind Ⅲ/Not Ⅰ双酶切、去磷酸化后,与载体pDsRed_2双酶切得到大的部分多克隆位点和RFP基因连接,构建PLNCX_2-RFP.转化生长因子β_1基因从PGEMT-TGF中扩增,经双酶切后与PLNCX_2-RFP连接,构建PLNCX_2-TGFβ_1-RFP.包装反转录病毒载体,并检测病毒上清滴度.将培养的兔膝关节软骨细胞分组转染:对照组(不做任何转染)、转染PLNCX_2组、转染PLNCX_2-TGFβ_1-RFP组,持续筛选2周,观察细胞变化.收集稳定转染的细胞上清液,以NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响,以ELISA法检测细胞培养上清液中人转化生长因子β_1表达.结果与结论:重组基因PLNCX_2-TGFβ_1-RFP经酶切鉴定测序TGFβ_1、RFP、序列均正确,表明构建成功预期的真核表达载体PLNCX_2-TGFβ_1-RFP.转染到包装细胞并筛选培养后,病毒滴度为1×10~6CFU.稳定转染软骨细胞后可观察到红色荧光,证明转染成功.持续筛选2周,散在贴壁细胞形成阳性克隆,逐渐弥漫融合,并有细胞簇出现,双核多见,细胞增生活跃.转染PLNCX_2-TGFβ_1-RFP组NO浓度高于对照组、转染PLNCX_2组(P<0.05),对照组、转染PLNCX_2组间差异无显著性意义.对照组与转染PLNCX_2组均无转化生长因子β_1表达,转染PLNCX_2-TGFβ_1-RFP组转化生长因子β_1质量浓度为(28.08±3.73)ng/L.提示反转录病毒载体PLNCX_2介导的人转化生长因子β_1能有效转染到兔膝关节软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃.     

股骨颈动力交叉钉系统内固定植入物安放位置的力学差异分析与临床应用

目的:利用三维重建方法建立股骨颈动力交叉钉系统内固定有限元模型,比较植入物不同置入位置对内固定效果差异的影响。方法:分别建立植入物处于股骨中上三分之一处,股骨中心以及股骨中下三分之一处,股骨中心沿矢状面前三分之一处,股骨中心沿矢状面后三分之一处,5种股骨颈动力交叉钉系统内固定有限元模型,比较在这5种位置下,股骨颈动力交...