重组多价人精子表位肽的原核表达及其条件优化

目的构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,优化其在大肠杆菌中的表达条件。方法用化学合成法合成多价人精子表位肽基因。该基因经PCR扩增,BamHI和XhoI双酶切后,克隆至GST融合表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒。将该重组质粒转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达。利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,观察在摇瓶发酵条件下改变培养基组成、诱导温度、诱导时机、诱导剂浓度和诱导时间等条件对GST-多价人精子表位肽融合蛋白表达量的影响。结果构建了重组多价人精子表位肽原核表达载体。在摇瓶实验中,优化的表达条件为:TB培养基,诱导温度37℃,在菌体对数生长的中后期进行诱导,IPTG诱导终浓度0.05 mmol/L,诱导时间5 h。优化后GST-多价人精子表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.2%,且主要以可溶形式表达。结论成功构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,重组表达载体在E.coli BL21(DE3)内主要表达可溶形式的GST-多价人精子表位肽融合蛋白,在优化条件下可获得较高的表达量。     

影响宫颈癌手术疗效临床病理因素的循证评价

目的评价影响宫颈癌手术治疗疗效的临床病理因素。方法检索中外数据库9个,筛选符合纳入标准的国内外文献12篇,通过循证分析评价患者年龄、临床分期、肿瘤直径大小、术前放化疗、术后放化疗、组织学类型、病理分化程度、宫旁浸润、手术切缘情况、脉管浸润、盆腔淋巴结等11个因素与宫颈癌手术疗效的关系。结果宫颈癌根治术后患者5年无瘤生存率为49．4％～95．2％,5年生存率为49．7％－87．4％;肿瘤大小、临床分期、宫旁浸润、盆腔淋巴结转移、脉管浸润、手术切缘阳性、组织分化程度、术后放化疗是影响宫颈癌手术治疗疗效的临床病理因素;年龄、组织学类型、术前放化疗与宫颈癌手术治疗疗效的关系尚不明确,需要进一步研究;术后放、化疗对宫颈癌术后预后有益。结论宫颈癌根治术后应详细了解患者的临床病理资料,注重对有高危因素患者的随访及治疗;放疗及化疗是治疗的重要手段,实施个体化的综合治疗以提高患者的生存率和生活质量。     

影响宫颈癌手术治疗疗效的临床病理因素分析

目的:探讨影响宫颈癌手术治疗疗效的临床病理因素,为临床干预方案的合理决策提供依据.方法:选择经手术治疗、有病理诊断、病历资料及随访资料完整的宫颈癌患者424例进行回顾性研究.生存率统计采用life-table计算方法,预后相关因素分析采用COX比例风险模型和Log-rank检验.结果:单因素分析显示肿瘤分化程度、临床分...     

妇产科学临床教学与考试改革

现阶段我国医疗卫生领域正处于一个变革时期,社会对医疗卫生事业提出了更高要求,如何提高医学教育质量和水平已成为一个重要议题。因此,教学模式和方法的改革备受关注。妇产科学作为临床医学教育的重要部分,面临许多新的问题和挑战,     

Vandetanib对人卵巢癌细胞抑制作用机制探讨

目的探讨Vandetanib对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3和卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的Vandetanib对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度（IC50）;流式细胞术检测药物对细胞凋亡及其周期分布变化;采用蛋白质印迹法分析凋亡基因Bcl-2、Bax及反映肿瘤细胞侵袭力的基因MMP-2的蛋白表达变化。结果与对照组相比,Vandetanib能明显抑制SKOV3和SKOV3/DDP生长,呈时间-剂量依赖性,IC50值均呈明显减小趋势。32μmol/L的Vandetanib作用SKOV3和SKOV3/DDP 72h后,抑制率分别为（43.21±0.92）%和（56.74±1.09）%,64μmol/L的Vandetanib作用SKOV3和SKOV3/DDP72h后,抑制率分别为（55.37±1.21）%和（79.20±0.39）%,耐药株SKOV3/DDP的抑制率明显高于敏感株SKOV3,差异有统计学意义,P〈0.05。流式细胞术结果显示,随时间浓度的增加,两种细胞凋亡明显增加,G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少,差异有统计学意义,P〈0.05。蛋白印迹法结果显示,药物作用于SKOV3细胞株Bcl-2、MMP-2表达减少,Bax表达无明显变化;药物作用于SKOV3/DDP细胞株Bcl-2表达减少,Bax表达增加,耐药株不表达MMP-2。结论 Vandetanib对两种细胞株生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,可以诱导细胞凋亡并将细胞阻滞于G1期,其机制与下调Bcl-2/Bax、MMP-2表达有关,有利于降低卵巢癌细胞的侵袭力。     

血清抗苗勒管激素水平在多囊卵巢综合征的临床意义

目的 探讨血清抗苗勒管激素(AMH)水平检测在多囊卵巢综合征(PCOS)中的临床意义.方法 选择PCOS患者80例(PCOS组),其中具有以下情况之一者纳入PCOS组1(40例):月经正常、高雄激素血症和多囊卵巢(PCO);月经稀少或闭经、雄激素正常和PCO;月经稀少或闭经、高雄激素血症和无PCO.月经稀少或闭经、高雄激素血症和PCO患者纳入PCOS组2.40例年龄和体质量指数(BMI)相匹配的健康妇女纳入对照组.检测各研究组血清AMH水平及各项相关指标.结果 PCOS组血清AMH(55.21±9.03) pmol/L高于对照组(12.58±4.82)pmol/L(P＜0.05),PCOS组2血清AMH(61.73±7.62)pmol/L高于PCOS组1(32.53±3.05)pmol/L(P＜0.05);对照组及PCOS组血清AMH均与小卵泡数(FN)呈正相关(相关系数分别为0.856、0.703,P＜0.05);对照组血清AMH与年龄呈负相关(r=-0.431,P＜0.05).结论 AMH分泌异常可能与PCOS发生发展有关,血清AMH水平是描述PCO的可靠指标,也是反映健康妇女卵巢功能衰退的敏感标志物,而在PCOS患者中可能无此作用.     

臭氧+胶原酶治疗腰椎间盘突出症疗效不佳的相关分析

目的 探讨影响臭氧+胶原酶治疗腰椎间盘突出症疗效不佳的各项因素,并进一步探讨其适应症,禁忌症等相关问题.方法 4年间用盘内注射方法 对254例腰椎间盘突出症患者进行臭氧+胶原酶注射,其中33例疗效不佳,对其进行CT及MIR复查分析,并部分病例进行手术探查.结果 随访3月-4年,平均6.3月,优良率87%,疗效不佳率达13%.3例手术探查,1例后纵韧带骨化,1例腰椎管狭窄,黄韧带肥厚,1例解剖变异.结论 臭氧+胶原酶治疗腰椎间盘突出症比单一方法 好,但不佳率较高,仍然要注意适应症,禁忌症,更要注意操作方法 及其他细节,以便提高疗效,减少医疗纠纷.     

叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂复合物对卵巢癌细胞的体外抑瘤效应

目的探讨叶酸-壳聚糖-碳纳米管-顺铂(cisplatin-carbon nanotube-chitosan-folic acid,DDP-SWCNT-CHI-FA)复合物对人卵巢癌细胞的影响。方法制备DDP-SWCNT-CHI-FA复合物,测定复合物中顺铂的药载浓度;采用MTT法检测药物对卵巢癌细胞的作用;应用Western blot法检测SKOV3/DDP细胞中铜转运蛋白-1(human copper transporter-1,h CTR-1)的表达。结果 SWCNT-CHI-FA和FA-CHI携载顺铂的载药率分别为125.7%和46.08%;顺铂和DDP-SWCNT-CHI-FA对卵巢癌细胞株SKOV3的IC50分别为(8.27±0.39)μg/μl和(5.18±0.83)μg/μl,对其耐药株SKOV3/DDP的IC50分别为(37.43±1.24)μg/μl和(28.23±1.17)μg/μl;SKOV3/DDP细胞中DDP-SWCNT-CHI-FA组的h CTR-1蛋白表达水平较顺铂组低。结论制备的DDP-SWCNT-CHI-FA复合物具有高载药率;可以增强顺铂对卵巢癌顺铂耐药细胞的抑制作用。     

子宫内膜癌雌孕激素受体及P53表达的临床意义

目的：检测子宫内膜癌组织中雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ）及Ｐ５３表达的阳性率并探讨其临床意义。方法：用免疫组化法对３３例子宫内膜癌标本进行了ＥＲ、ＰＲ及Ｐ５３的检测。结果：子宫内膜癌组织中ＥＲ、ＰＲ及Ｐ５３的总阳性率分别为６６．５７％、６３．６４％、２７．２７％,ＥＲ、ＰＲ、Ｐ５３阳性表达率与癌组织的细胞分化程度有并,随着子宫内膜癌组织学分级的增高,ＥＲ、ＰＲ阳性表达率逐渐降低,而Ｐ５３的     

鳞状细胞癌抗原用于宫颈鳞癌疗效及复发监测的意义

鳞状细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SC-CAg）是一种相对分子质量为45000的糖蛋白，1977年Kato等首先从子宫颈鳞状细胞癌组织中分离出来，目前用于宫颈鳞状细胞癌的辅助诊断。本研究旨在探讨鳞状细胞癌抗原作为一种肿瘤标志物对于宫颈鳞状细胞癌临床治疗的价值，以及复发监测的意义，以指导临床医生对预后高危患者的识别及个体化治疗策略的制定。