用DHPA法及API法鉴定酵母菌的对比分析

目的对比分析双歧层次鉴定法(DHPA法)与API法对酵母菌鉴定的准确性与可比性.方法用DHPA法及API 20C AUX试条鉴定酵母菌.结果DHPA法和API法对酵母菌对43个KIU鉴定的正确性均为100%.对256株临床分离酵母菌的鉴定符合率为81.3%.在48株两种方法鉴定不符合的菌株中,有8株为API缺码,占鉴定不符合菌株的16.7%,而DPHA法无缺码现象.结论DPHA法解决了API法存在的缺码或不能鉴定问题,是酵母菌准确、快速、简便、经济和实用的鉴定方法.     

不同标本分离的铜绿假单胞菌对12种常用抗生素耐药性分析

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是人体最重要的条件致病菌之一,可引起机体多系统、多脏器或多部位感染.近年来,由于其分离率高、耐药性广泛、治疗困难、死亡率高并时有爆发流行而受到高度重视。关于铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药性监测,国内外多有报道,但对不同感染部位分离铜绿假单胞菌的耐药性缺少对比分析。为了分析不同部位分离铜绿假单胞菌对多种常用抗生素的耐药性,本文用VITEK Automatic Microbial System     

CTX-M-38型β-内酰胺酶的克隆与表达

目的构建新型β-内酰胺酶CTX-M-38的表达载体。方法应用PCR扩增CTX-M-38基因全长编码序列,经NdeI、XhoI酶切后连接至pET-26b(+)表达载体,重组质粒经酶切及DNA测序确证后,转入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。超声破碎法提取表达蛋白产物,检测其活性,等电聚焦电泳检测蛋白的等电点(pI)。结果PCR扩增获得894bp的产物,重组表达载体经NdeI、XhoI酶切及DNA测序后表明,目的基因已成功接入表达载体,重组菌的粗提物经头孢硝噻吩检测显示具有β-内酰胺酶活性,显示载体[pET-26b(+)/CTX-M-38]构建成功。蛋白pI为8.4。结论β-内酰胺酶CTX-M-38在原核表达细胞中实验了基因重组表达,为进一步分析酶的特性提供条件。     

甲氧西林耐药溶血葡萄球菌糖肽类耐药突变株体外筛选

目的：调查在体外糖肽类选择性压力下,溶血葡萄球菌对糖肽类敏感性的变化。方法：琼脂稀释法检测万古霉素、替考拉宁和苯唑西林对6株溶血葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）,连续浓度梯度法体外筛选万古霉素和替考拉宁耐药突变株。结果：6株甲氧西林耐药溶血葡萄球菌（MRSH）均筛选出替考拉宁耐药突变株（MIC=32～128μg／mL）．未筛选出万古霉素耐药突变株。万古霉素对6株替考拉宁耐药突变株仍保持较好的抗菌活性（MIC=2～4μg／mL）。结论：万古霉素对MRSH抗菌活性稳定,在抗生素压力下不易筛选出耐药株突变株,替考拉宁对MRSH抗菌活性很不稳定,在抗生素压力下极易筛选出耐药株突变株     

医院细菌耐药监测研究

目的 了解深圳地区医院临床分离菌的耐药情况。方法 2001年1--2002年6月，本院临床分离菌用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果 1734株细菌中革兰阳性菌占40．6％，革兰阴性菌占59．4％。最常见的临床分离菌是凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等；MRSA和MRCNS分别为37．8％和78．8％；粪肠球菌耐万古霉素株7．6％；大肠埃希菌中产ESBLs株占34．9％，肺炎克雷伯菌占34．2％；产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率(除碳青酶烯类外)均显著高于非产ESBLs株。结论 细菌耐药性仍是目前临床上的难题，需采取积极措施，减缓细菌耐药性的增长。     

100株产超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏试验结果比较分析

目的了解我院产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药情况.方法用纸片扩散法检测了100株产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对16种抗生素的耐药性.结果 66株产ESBLs的大肠埃希菌对16种抗生素的敏感性排在前三位的是:亚胺培南(100%),头孢哌酮/舒巴坦(100%),哌拉西林/他唑巴坦(94.1%);34株产ESBLs肺炎克雷伯菌对16种抗生素的敏感性排在前三位的是:亚胺培南(97.0%),哌拉西林/他唑巴坦(84.6%),头孢吡肟(73.7%).结论治疗产ESBLs大肠埃希菌引起的感染的首选药物为亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦,其次为哌拉西林/他唑巴坦;治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌引起的感染的首选药物是亚胺培南,其次是哌拉西林/他唑巴坦;产ESBLs肺炎克雷伯菌对常见药物的敏感性普遍低于产ESBLs的大肠埃希菌.     

支气管扩张病人非结核分枝杆菌的临床研究

目的对支气管扩张病人群作结核分枝杆菌(TM)和非结核分枝杆菌(NTM)调查研究.方法分析了支气管扩张96例应用痰涂片、痰培养和纤维支气管镜刷检涂片和/或培养三种方法进行分枝杆菌的检出结果,其中任一为阳性则认为有临床意义.则进一步分离鉴定.结果 96例患者中,痰涂片检出分支杆菌19例(19.8%),纤支镜检出分支杆菌5例(7.6%),合计检出分枝杆菌24例(25%).共培养分离鉴定出分枝杆菌18例,其中NTM 17例,TM 1例.本组支扩病人中NTM检出率为17.7%(17/96).结论本组支气管扩张病人非结核分枝杆菌检出率为17.7%,提示部分支气管扩张病人存在NTM感染.     

2327例血液及体液快速培养结果分析

目的：提高血培养及体液培养阳性率，快速准确作出病原学诊断。方法：用BacT/ALERT3D全自动血培养仪对2327份血液和体液标本进行检测，针对不同年龄患者选用标准血培养瓶，并对其检出阳性的时间、阳性率和病区分布、细菌种类及部分细菌耐药性进行评估。结果：培养时间缩短到5d，培养阳性率为20．7％，其中血液为16．9％，各种体液为32．2％，共检出细菌49种，真菌6种，血培养中葡萄球菌的比例高达60．1％，其中凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率高达90％。结论：BacT／ALERT 3D全自动血培养仪提高了血培养及体液培养阳性率，缩短了检出时间。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶基因分型研究

产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）是临床肠杆菌科细菌对β内酰胺类抗生素耐药的重要机制。近年来国内外ESBLs在临床分离菌中的检出率快速上升，其种类也不断增多。国内报道以CTX-M和SHV型ESBLs最为常见。为了较全面了解本院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株ESBLs的基因分型，经本研究应用聚合酶链反应（PCR）及DNA测序方法，对215株产ESBLs临床分离株的TEM、SHV和CTX-M基因进行分析。