游离脂肪酸对THP-1巨噬细胞NALP3炎性通路的影响

目的：探讨NALP3 炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH) 的炎症发 生发展中的可能作用。方法：选择THP-1 构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸干预24 h;用不同浓度 的N- 乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC) 预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸孵育24 h。分别用活性氧(reactive oxygen species,ROS) 指示剂结合流式细胞仪检测THP-1 中ROS 的变化;ELISA 检测细胞上清液中IL-1 的浓 度;免疫荧光技术检测NALP3,caspase-1 蛋白的表达;荧光定量PCR 检测NALP3 蛋白复合体各组分(NALP3, ASC,caspase-1)mRNA 的表达水平。结果：与空白组相比,各棕榈酸组细胞内ROS 增加,NALP3 和caspase-1 蛋 白表达及其分泌IL-1 水平均增加(P<0.05),并随棕榈酸浓度增加而增强;NAC 预处理后,与单纯棕榈酸组相比, 各NAC 组THP-1 产生ROS 水平均下降,同时NALP3 和caspase-1 蛋白表达水平,NALP3 复合体各组分mRNA 水 平及其分泌IL-1 的能力均降低(P<0.05),此抑制作用随NAC 浓度增加而增强。结论：游离脂肪酸可通过产生 ROS 调节巨噬细胞NALP3 炎性小体信号通路的活化引起炎症因子分泌,该通路可能是NASH 的发病机制之一。     

沙鼠脑缺血脑组织转化生长因子βⅠ型受体表达的研究

目的　阐明缺血脑组织的病理改变与转化生长因子 βⅠ型受体 (TβRⅠ )表达的关系。 方法　夹闭沙鼠双侧颈总动脉诱导短暂前脑缺血 ,检测缺血再灌后不同时点脑组织的病理变化和转化生长因子 βⅠ型受体 (TβRⅠ )mRNA及蛋白的表达。 结果　随沙鼠脑缺血再灌时间的延长 ,病理损害的加重 ,随之脑组织中TβRⅠmRNA和蛋白的表达逐渐上调。 结论　缺血脑组织TβRⅠ的表达上调可能是脑组织细胞对缺血产生的一种保护性反应以提高对TGFβ的敏感性 ,也可能是脑组织病理损伤严重程度的又一标志     

银屑病患者皮损中CDK4和p16蛋白表达

近几年对细胞周期调控研究具有突破性的进展之一是确立了细胞周期素(cy-clin)的周期性累积与分解对细胞周期进程的调控作用。cyclinD类似于癌基因,在与周期素依赖性激酶4(CDK4)结合后刺激细胞分裂、增殖。p16蛋白是一种抑癌基因产物,与cyclinD竞争并同CDK4结合,阻止细胞分裂、生长[1,2]。鉴于银屑病与角朊细胞的增殖和分化异常有关,我们采用免疫组化方法研究了CDK4及p16在银屑病患者皮损中的表达。一、资料和方法1.标本:16份银屑病患者石蜡标本为我院1994年7月至1995年10月门诊及住院确诊的寻常型银屑病患者皮损,这些患者均为进行期,男…     

嗜酸乳杆菌对小鼠结肠炎的疗效及结肠黏膜转录因子表达的影响

目的: 观察嗜酸乳杆菌治疗DSS诱导小鼠实验性结肠炎的疗效以及对转录因子STAT1, T-bet及GATA3的影响, 了解嗜酸乳杆菌的作用机制.方法: 采用2.5% DSS诱导小鼠结肠炎模型, 70只Balb/c小鼠随机分为7组: 模型组、阴性对照组(菌粉保护剂组)、阳性对照组(美沙拉嗪组)、嗜酸乳杆菌低剂量组(1×109 CFU/L)、中剂量组(1×1010 CFU/L)、高剂量组(1×1011CFU/L)、正常组. 用DAI评分和病理组织学积分检测各干预组疗效, RT-PCR法检测结肠组织中STAT1、T-bet、GATA3的表达水平,Western blot和免疫组织化学法检测结肠组织中T-bet的表达.结果: 模型组小鼠DAI积分及组织病理学积分要明显高于正常组(均P<0.05), 嗜酸乳杆菌低、中、高剂量组和美沙拉嗪干预后, 小鼠DAI积分及组织病理学积分较模型组有明显下降(6.20±2.64, 5.00±1.21, 5.72±2.63,5.81±1.32 vs 7.81±1.02; 4.25±2.05, 2.56±1.81, 2.20±1.12, 3.10±2.60 vs 5.80±2.94, 均P<0.05); 嗜酸乳杆菌低、中、高剂量组及美沙拉嗪干预后转录因子在核酸水平较模型组STAT1、T-bet的表达降低(均P<0.05); GATA3的表达升高(均P<0.05), 但仍低于正常组. 而T-bet的蛋白和免疫组织化学表达都与mRNA有相同趋势, 较模型组降低(0.27±0.04, 0.23±0.02, 0.18±0.04, 0.27±0.11 vs 0.30±0.04;0.263±0.045, 0.234±0.015, 0.114±0.025,0.252±0.024 vs 0.322±0.064, 均P<0.05). 其中又以嗜酸乳杆菌高剂量组效果最佳.结论: 嗜酸乳杆菌对实验性结肠炎小鼠有治疗作用, 可抑制转录因子的表达, 其部分作用机制可能为通过抑制STAT1、T-bet信号分子的激活来抑制Th1型免疫反应, 减少对GATA3的抑制而发挥治疗作用.     

恶性滋养细胞肿瘤p16抑癌基因的表达与细胞增殖的关系及临床意义

为研究ｐ１６抑癌基因表达与滋养细胞癌变的关系，用免疫组化ＳＰ法测定了ｐ１６、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在恶性滋养细胞肿瘤、葡萄胎及正常绒毛中的表达。结果示：①ｐ１６蛋白表达在恶性滋养细胞肿瘤和正常绒毛间差异有显著性（Ｐ＜００５）；②ｐ１６阴性标本较ｐ１６阳性标本的ＰＣＮＡ阳性率显著高（Ｐ＜００５）；③不同临床分期的恶性滋养细胞肿瘤患者ｐ１６阳性率不同，其中ｐ１６阳性患者３年生存率高于ｐ１６阴性者。以上结果提示，ｐ１６基因的突变可能是滋养细胞癌变及增殖失控的重要原因；临床检测ｐ１６蛋白表达对估计恶性滋养细胞肿瘤患者的预后有帮助。     

γ—氨基丁酸受体系统与肝性脑病

γ 氨基丁酸受体系统中α ,β亚基与配体结合时均产生相同的效果 ,使脑细胞静息膜电位增大 ,表现为抑制作用。肝性脑病患者血液中存在内源性BZ样物质BZD及抑制BZD与GABA BZ受体结合的神经肽DBI。患肝性脑病时BZD水平升高 ,而DBI水平降低 ,血氨通过星状细胞分泌神经类固醇兴奋GA BA BZ受体复合物产生脑细胞的抑制从而阐明了肝性脑病患者脑细胞功能紊乱的发生机制。     

组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究

用苔盼蓝及吖啶橙染色，ＤＮＡ片段检定与ＤＮＡ电泳等方法进行组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究，旨在探讨其可能机制及其在胸腺细胞负选择中的作用。结果表明，组织胺诱导使体外培养的胸腺细胞出现典型的细胞调亡。雷尼替丁可阻断上述作用，提示胸腺细胞存在Ｈ＿２受体，活化该受体可能在胸腺细胞的负选择中起重要作用。     

克罗恩病维也纳、蒙特利尔临床分型的对比研究

目的:应用维也纳(Vienna)和蒙特利尔(Montreal)临床分类标准,探讨我国克罗恩病的临床表型特点.方法:回顾分析湘雅二医院和湘雅医院共168例住院克罗恩病患者的临床资料,按照Vienna、Montreal标准分别进行分型,对比分析两标准中各亚型特征.结果:Montreal标准的小于等于16岁A1亚型9例仅占5.4%,发病年龄主要集中在17 ～ 40岁,占63.1%,与Vienna标准小于40岁亚型的65.5%一致.累及部位均以回肠和回结肠亚型为主,Montreal标准的L4亚型7.1%明显少于Vienna标准的L4亚型13.7%(P=0.049).疾病行为的狭窄亚型在Vienna、Montreal标准中分别为40.5%和41.7%,是主要的并发症,Montreal标准的穿透亚型为10.7%,明显低于Vienna标准的18.5%(P=0.044).在Montreal标准下穿透行为的手术率为88.9%,明显高于Vienna标准的54.8%(P=0.014).结论:我国青少年克罗恩病极少,仍以17 ～ 40岁患者居多,累及部位以回肠和回结肠亚型为主,并发症以狭窄常见,穿透是手术的主要原因.Vienna、Montreal标准对我国克罗恩病患者分型各有优势,目前综合应用Vienna、Montreal标准对我国克罗恩病进行临床分型可能更有价值.     

青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌对急性期和恢复期结肠炎小鼠Th1/Th2亚群的影响

Objective To observe and analyze the effect of B. Adolescentis and L. Acidophilus on the proportion of Th cell Th1/Th2 in peripheral blood of UC-mice in acute stage and recovery stage. Method 40 BABL/c mice were induced by 3% DSS water for 7 clays free drinking and then with distilled water for 10 days. They were randomly allocated in 4 groups: NS group, SASP group, BF0624 group and LT0637 group, also the fifth group-10 normal animals. The blood of mice were collected by removing their eyes at day 8 and day 18, and then the mononuclear cells were iso]atecl. The proportion of Th1/Th2 was analyze through flow eytometry,hy labeling the specific antibody ot Th cellular membrane with the CD4 antibody, and the cytoplastie antigen of Thl or Th2 with IIA antibody or IF'N-γ antibody. Result The proportion of Th1/Th2 in normal mouse was 0. 84 -0. 94,and it raised up in DSS-mice at both acute stage and recovery stage. It decreased unequally after 7 or 17 days'B, adoleseentis, L. Acidophilus and SASP treatment, but that of all three groups were lower than NS group (2.21±0. 83). Even the proportion got close to the normal animals after 17 days'L. Acidophilus -treated. Conclusion The proportion of Thl/Th2 increased at the acute stage and recovery stage of DSS-mice. Both B. Adoleseentis and L. Acidophilus had more effective than SASP on decreasing the proportion of Th1/Th2 at two stages,ospecially L. Acidophilus.     

青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌对急性期和恢复期结肠炎小鼠Th1/Th2亚群的影响

Objective To observe and analyze the effect of B. Adolescentis and L. Acidophilus on the proportion of Th cell Th1/Th2 in peripheral blood of UC-mice in acute stage and recovery stage. Method 40 BABL/c mice were induced by 3% DSS water for 7 clays free drinking and then with distilled water for 10 days. They were randomly allocated in 4 groups: NS group, SASP group, BF0624 group and LT0637 group, also the fifth group-10 normal animals. The blood of mice were collected by removing their eyes at day 8 and day 18, and then the mononuclear cells were iso]atecl. The proportion of Th1/Th2 was analyze through flow eytometry,hy labeling the specific antibody ot Th cellular membrane with the CD4 antibody, and the cytoplastie antigen of Thl or Th2 with IIA antibody or IF'N-γ antibody. Result The proportion of Th1/Th2 in normal mouse was 0. 84 -0. 94,and it raised up in DSS-mice at both acute stage and recovery stage. It decreased unequally after 7 or 17 days'B, adoleseentis, L. Acidophilus and SASP treatment, but that of all three groups were lower than NS group (2.21±0. 83). Even the proportion got close to the normal animals after 17 days'L. Acidophilus -treated. Conclusion The proportion of Thl/Th2 increased at the acute stage and recovery stage of DSS-mice. Both B. Adoleseentis and L. Acidophilus had more effective than SASP on decreasing the proportion of Th1/Th2 at two stages,ospecially L. Acidophilus.