转化生长因子与脑缺血

转化生长因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｅｔａ,ＴＧＦβ）是多功能的细胞因子,参与体内多种病理和生理过程,可刺激细胞外基质的分泌,促进血管生成,从而在损伤修复中起重要作用。新近研究表明,ＴＧＦβ与中枢神经系统疾病关系密切,因此,ＴＧＦβ与脑缺血的关系随之成为目前研究热点,本文就ＴＧＦβ的生物学特点及与脑缺血的关系综述如下。１　ＴＧＦβ的生物学特点１．１　ＴＧＦβ的结构ＴＧＦβ是由二硫键连接的两个各含１１２个氨基酸亚单位组成的二聚体多肽,分子量为２５ｋＤ。这…     

流式细胞术检测局灶性脑缺血再灌注Bcl-xL和Bax蛋白表达

目的：探讨Bcl-xL、Bax在局灶性脑缺血－再灌注中的表达及作用。方法：用线栓法复制大脑中动脉脑缺血－再灌注模型,流式细胞术（FCM）检测Bcl-xL、Bax蛋白表达。结果：缺血3小时再灌注,随缺血－再灌注时间延长,半影区Bax表达逐渐增强,再灌注24和48小时达高峰,而Bcl-xL表达早期增强后即呈下降趋势,Bcl-xL/Bax比率呈动态变化。结论：Bcl-xL表达增高,有利于促进神经细胞存活,Bcl-xL与Bax比率的转变,可促进神经细胞凋亡。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的调控

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在局灶性脑缺血再灌注损伤中对缺血后神经细胞凋亡的调控机制及作用。方法 在缺血及再灌注不同时间点,采用免疫组化及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测缺血中心区及半影区内bFGF蛋白及mRNA表达的动态变化。结果 缺血半影区bFGF蛋白及mRNA达表明显增加,缺血中心区表达略有增加。结论 bFGF的表达趋势与缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡趋势相符,说明bFGF对神经细胞有保护和修复作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠局灶性脑缺血 再灌注损伤神经细胞凋亡的调控

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在局灶性脑缺血再灌注损伤中对缺血后神经细胞凋亡的调控机制及作用。方法在缺血及再灌注不同时间点,采用免疫组化及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血中心区及半影区内bFGF蛋白及mRNA表达的动态变化。结果缺血半影区bFGF蛋白及mRNA达表明显增加,缺血中心区表达略有增加。结论bFGF的表达趋势与缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡趋势相符,说明bFGFF对神经细胞有保护和修复作用。     

磷酸肌酸对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体MDA、SOD和Ca2+表达的影响

目的 探讨磷酸肌酸(PCr)对缺血再灌注(I/R)损伤心肌线粒体的影响.方法 采用大鼠左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠I/R模型.60只雄性大鼠随机分为缺血再灌注(I/R)损伤组、假手术组、PCr组,假手术组只剖胸不结扎冠状动脉,余两组制作I/R模型,PCr组结扎前45 min经股静脉注射PCr 4 mg/kg,假手术组和I/R组分别静脉注射相应体积的生理盐水,在缺血45 min及2 h时测定I/R区心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化物(SOD)及总Ca2+浓度.结果 与假手术组比较I/R损伤组MDA、总钙显著增高(P＜0.05),SOD显著降低(P＜0.01);与I/R损伤组比较,PCr组MDA含量及总钙水平显著降低(P<0.05),SOD显著增高(P＜0.01).结论 PCr对心肌I/R损伤有保护作用.     

重组人载脂蛋白E3发酵条件的优化及纯化

目的 研究重组人载脂蛋白E3(rhApoE3)在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,以及rhApoE3的纯化方法.方法 分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生rhApoE3的发酵过程进行了优化;通过阳离子交换层析和反向疏水层析,对rhApoE3的纯化方法进行了研究.结果 确定rhApoE3在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在pH6.0的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h,经过阳离子交换层析和反向疏水层析,rhApoE3纯度可达94%以上.结论 确定了rhApoE3在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,以及rhApoE3的纯化方法.     

重组人载脂蛋白E3在毕赤酵母中的分泌表达及鉴定

目的 在毕赤酵母中高效表达重组人载脂蛋白E3(rhApoE3),制备与天然hApoE3具有相同结构和活性的rhApoE3.方法 用RT-PCR法自人肝组织RNA克隆hApoE3的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoE3.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X33.甲醇诱导后进行SDS-PAGE、Western印迹分析,筛选高表达工程菌.结果 经PCR法克隆的hApoE3 DNA序列与GenBank登录的序列一致.SDS-PAGE和Western印迹分析均在分子量约34kD出现特异性条带,rhApoE3表达量达150mg/L.结论 在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生rhApoE3,获得高效表达rhApoE3的毕赤酵母工程菌.     

人尿激肽酶原对急性脑梗死患者神经功能及MMP表达的影响

<正>人尿激肽酶原是从男性尿液中提取的糖蛋白,为组织型激肽酶原。有研究发现其有缩小急性脑梗死患者梗死面积、改善神经功能的作用,机制可能与选择性扩张缺血区微动脉,改善缺血脑组织微循环有关[1]。另有研究表明金属基质蛋白酶(MMPs)存在脑缺血后的表达变化,并与侧枝循环重建、血脑屏障结构的完整性、血流动力学等病理及病理生理过程相关[2,3]。提示人尿激肽原参与脑缺血损伤与修复的过程可能与MMPs有关,但相关研究较少。本     

不同评分模型对短暂性脑缺血发作后脑梗死的风险预测价值

目的：评估ABCD、ABCD2、SPI-Ⅱ和ESSEN风险预测评分模型对短暂性脑缺血发作（TIA）高危患者近期及远期进展为脑梗死的预测价值。方法：回顾性分析235例TIA患者ABCD、ABCD2、SPI-Ⅱ和ESSEN评分,随访7 d和1年内脑梗死发生率,通过绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC）以评估4种评分模型的准确性,并与原始模型进行比较,计算相对危险度（RR）。 结果:235例TIA 患者7 d内脑梗死发生率为9.36%,1年内脑梗死发生率为20.43% 。7 d内AUC,ABCD评分模型为0.70,ABCD2评分模型为0.74,SPI-Ⅱ评分模型为0.67,ESSEN评分模型为0.62;1年内AUC,ABCD评分模型为0.62,ABCD2评分模型为0.62,SPI-Ⅱ评分模型为0.64,ESSEN评分模型为0.65。与原始模型比较,低危组、中危组和高危组患者TIA后7 d内RR值, ABCD评分模型分别为 0.09、0.92和0.72,ABCD2评分模型分别为0.49、0.59和0.65;TIA后1年内RR值,SPI-Ⅱ评分系统分别为0.58、0.87和0.55,ESSEN评分模型分别为0.11、0.18和0.55。 结论：本研究选择的4种风险预测评分模型均可用于中国人群TIA后脑梗死风险评估,其中ABCD2评分模型对短期风险预测具有较大价值,而ESSEN评分模型对于远期风险预测更具价值。
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慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层Smac、NAIP表达的变化

慢性脑缺血即长期慢性脑低灌注是临床上常见的脑损伤之一,是血管性痴呆（Vascular dementia,VD）、阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）、和皮层下动脉硬化性脑病（Binswanger）病等多种认知障碍性疾病的共同病理过程,其损伤机制尚不完全清楚.近年研究发现Smac、NAIP在细胞凋亡中起重要作用,可参与急性脑缺血神经元凋亡的调控过程,但其是否参与慢性脑缺血致认知功能障碍的损伤尚不清楚.本研究在成功制备慢性脑缺血致认知功能障碍模型基础上,从蛋白和基因水平,探讨慢性缺血大鼠脑内细胞凋亡调控因子Smac、NAIP 表达的变化以及丁苯酞对两者的影响.