一种创伤失血性休克并全身炎症反应综合征(SIRS)犬模型的建立

目的建立一种创伤失血性休克并全身炎症反应综合征（SIRS）犬模型，满足多器官功能障碍综合征（MODS）实验研究的需要。方法选择15只杂种犬，用重量为1．5kg的铁块从18cm高处自由落下分别锤击每只犬的两侧小腿造成双侧胫腓骨粉碎性骨折，再用同法在每侧小腿骨折段局部增加锤击9次，并从股动脉导管放血至平均动脉血压（MAP）40～55mmHg维持1h；检测休克后1h犬的主要生理指标有两项或以上符合动物SIRS标准者作为SIRS动物模型；模型犬复苏至休克后24h，统计休克后24h实验犬的MODS发生率。结果平均每只犬的失血量为血液总量的38．9％，MAP较基础值下降了63％；15只犬休克后1h均达到动物SIRS标准，其中符合SIRS指标4项的1只、3项的5只、2项的9只；休克后24h MODS发生率为33.3％的。结论本法制作的创伤失血性休克模型能达到稳定的SIRS动物标准，可为开展MODS的实验研究应用。     

胶原蛋白海绵在多种创面修复中的应用

目的：探讨胶原蛋白海绵在不同类型创面上有无促进创面愈合的作用。方法：选择56例患有不同类型创面的患者，用胶原蛋白海绵敷贴于取皮区、Ⅱ度烧伤、慢性溃疡创面上或填塞于压疮所致的窦道的底部为实验组．常规治疗为对照组；观察愈合的经过、愈合的时间，并作组织病理学检查。结果：14例取皮区创面使用胶原蛋白海绵的愈合时间是(2．86&;#177;0．86)d,对照组为(4．14&;#177;0.86)d，两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0.01；Ⅱ度烧伤创面治疗组愈合时间是(6．75&;#177;1．39)d．对照组为(10．63&;#177;1．19)d．两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；肉芽创面、慢性溃疡创面、压疮创面总显效率83．3％，总有效率100％；组织病理：对照组肉芽组织中可见较多内皮细胞增生形成的实性细胞簇及扩张的新生毛细血管．在毛细血管周围有散在新生的纤维母细胞。可见大量的胶原纤维形成，胶原纤维排列无序，部分融合。实验组早期及中期成纤维细胞及毛细血管数量明显多于对照组，成纤维细胞转化为纤维细胞的时期较对照组早，胶原纤维的产生增加，排列更有序。结论：胶原蛋白海绵对创面修复及愈合，加速肉芽组织的生长、促进慢性溃疡和压疮创面生长等方面均有显著的作用。     

基因物质p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达和意义

目的　探讨基因物质 p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达情况及意义。方法　在 5例正常人尸体上各取 2 1个不同部位的全层皮肤组织 ,采用免疫组织化学SP法 ,用基因物质 p63、β1整合素作为第一抗体标记表皮干细胞 ,并通过图像分析 ,研究表皮干细胞在正常人不同部位皮肤中的表达情况。结果　 (1)头皮 p63的PU值 [阳性单位 (% ) ] (4 2 .17± 3 .10 )最大 ,与面皮、腋部、上臂内侧、前臂内侧、腰背部、手背、足背及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足背p63的PU值(2 1.19± 6.89)最小 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。头皮CD2 9的PU值 (2 9.13± 4.99)最大 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足底CD2 9的PU值 (11.89±1.5 2 )最小 ,阴囊与面皮、腰背、上臂内外侧、手掌、手背、腹部及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 )。(2 )正常人不同部位多毛组与汗毛组 p63、CD2 9的PU值差异有显著性(P <0 .0 0 0 1)。(3 )躯干组与四肢组p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。(4 )屈侧与伸侧p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　 (1) p63、CD2 9对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达不同 ,头皮、阴阜、阴囊皮肤组织中的阳性表达较高 ,而其他部位皮肤组织中     

严重腹部电烧伤临床分析

目的探讨严重电烧伤全层腹壁及腹腔内脏器损伤的诊治方法。方法收集1992年3月至2006年4月5例严重腹部高压电烧伤采用皮瓣转移或植皮术进行修复的临床资料，对其进行回顾性分析。结果采用皮瓣转移或植皮术进行修复的5例患者，4例皮瓣全部成活，其中3例皮瓣Ⅰ期愈合，1例皮瓣远端缺血坏死；1例术后3小时病情恶化抢救无效死亡。结论严重腹部电烧伤治疗的关键在于把握剖腹探查的时机和选择恰当的皮瓣。     

胶原蛋白海绵在多种创面修复中的应用

目的:探讨胶原蛋白海绵在不同类型创面上有无促进创面愈合的作用。方法:选择56例患有不同类型创面的患者,用胶原蛋白海绵敷贴于取皮区、Ⅱ度烧伤、慢性溃疡创面上或填塞于压疮所致的窦道的底部为实验组,常规治疗为对照组;观察愈合的经过、愈合的时间,并作组织病理学检查。结果:14例取皮区创面使用胶原蛋白海绵的愈合时间是(2.86±0.86)d,对照组为(4.14±0.86)d,两者比较差异有显著性意义(P<0.01);Ⅱ度烧伤创面治疗组愈合时间是(6.75±1.39)d,对照组为(10.63±1.19)d,两者比较差异有显著性意义(P<0.01);肉芽创面、慢性溃疡创面、压疮创面总显效率83.3%,总有效率100%;组织病理:对照组肉芽组织中可见较多内皮细胞增生形成的实性细胞簇及扩张的新生毛细血管,在毛细血管周围有散在新生的纤维母细胞。可见大量的胶原纤维形成,胶原纤维排列无序,部分融合。实验组早期及中期成纤维细胞及毛细血管数量明显多于对照组,成纤维细胞转化为纤维细胞的时期较对照组早,胶原纤维的产生增加,排列更有序。结论:胶原蛋白海绵对创面修复及愈合,加速肉芽组织的生长、促进慢性溃疡和压疮创面生长等方面均有显著的作用。     

深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中转化生长因子β表达及微血管生成和胶原合成与解毒烧伤膏的干预作用

目的：观察有一定促进浅Ⅱ度、深Ⅱ度创面愈合作用的解毒烧伤膏在烫伤创面愈合过程中对转化生长因子β、微血管生成和胶原合成的影响。探讨其可能的作用途径。 方法：实验于2004-09／2004-12在中山大学动物中心和中山大学附属第一医院外科实验室完成。取10只小香猪，制作深Ⅱ度烫伤创面模型，随机分为解毒烧伤膏观察组和空白对照组，记录创面愈合时间；分别在伤后第3、5、7、9天取材，采用免疫组织化学链菌素生物素一过氧化物酶标记物法法检测转化生长因子13的表达，在400倍光镜下随机选取5个视野，每个视野观察100个细胞，以胞浆或（和）胞核着棕色者为阳性染色，计数阳性细胞数。以CD34-抗免疫组织化学标记血管内皮细胞，先后在低倍镜（10&;#215;10）下全面观察切片，以确定组织血管密度最高处，再在高倍镜（10&;#215;40）下计数并记录5个视野的微血管数，取其平均值。记数微血管密度。羟脯氨酸法检测每克组织胶原含量。比较实验组与对照组创面愈合时间，转化生长因子β的阳性表达率，创面微血管密度计数及胶原含量测定。结果：纳入动物10其，全部进入结果分析，无脱失值。①观察组烫伤愈合时间明显早于对照组[（11．0&;#177;1．5），（14．0&;#177;2．5）d，t=4．08，P〈0．001]。②转化生长因子β表达主要在炎症细胞和毛囊上皮细胞，伤后第3、5天，观察组转化生长因子β的阳性表达率明显高于对照组[（25．0&;#177;7．5）％，（11．0&;#177;4．6）％；（45．7&;#177;8．3）％，（24．6&;#177;7．4）％，t=3．61，6．34，P〈0．01]；观察组转化生长因子β表达的高峰早于且强于对．照组。④第5天微血管密度记数观察组显著高于对照组[（40．6&;#177;2．4），（32．6&;#177;2．4）个，t=2．69，P（0．05]。④观察组第7、9天胶原含量明显高于对照组[（24.5&;#177;0．72），（1．97&;#177;0．15）g／mg；（3．51&;#177;0．46），（2．85&;#177;0.13）g/mg；t=3．61,6．79，P〈0．01]; 结论：解毒烧伤膏能促进烫伤刨面的愈合，可能与早期提高组织中转化生长因子β的表达、促进血管增生和后期胶原的合成有关。     

荷负电气溶胶治疗Ⅱ度烧伤创面的临床效果及病理学观察

目的观察荷负电气溶胶(下称气溶胶)治疗Ⅱ度烧伤创面的效果。方法选择单纯浅Ⅱ、深Ⅱ度烧伤患者,随机分为:(1)气溶胶组:浅Ⅱ度180例、深Ⅱ度100例,伤后6h~2d开始用气溶胶治疗创面,l~2次/d,1.5h/次。(2)对照组:浅Ⅱ、深Ⅱ度患者各30例,常规治疗。(3)自身对照组:浅Ⅱ、深Ⅱ度患者各10例,同上用气溶胶治疗,但同一患者部分创面覆盖无菌金属片屏蔽气溶胶(屏蔽组),部分创面不屏蔽(非屏蔽组)。观察气溶胶治疗过程中患者创面的大体变化,治疗前后进行创面细菌培养,并监测其肝、肾功能及血生化指标有无改变。记录各组患者创面愈合时间。另制作深Ⅱ度烫伤大鼠模型,同前分为气溶胶组和对照组并治疗。取两组大鼠治疗前及治疗后1、2、3周的创面组织标本,作病理学观察。结果气溶胶治疗后患者创面渗出少,治疗前后均无细菌生长。总体来讲,气溶胶治疗前后患者肝、肾功能及血生化指标无明显改变。气溶胶组患者浅Ⅱ度创面伤后(6.3±1.6)d愈合,深Ⅱ度创面(15.1±3.1)d愈合,明显短于对照组相同深度创面[(11.3±1.4)、(21.2±1.4)d,P<0.01]。自身对照组中,相同烧伤深度的非屏蔽组与屏蔽组比较,创面愈合时间也明显缩短(P<0.01)。病理学检查显示,气溶胶组大鼠治疗后第3周皮肤结构已基本恢复正常,而对照组此时恢复较差。结论气溶胶能有效促进Ⅱ度烧伤创面的愈合且使用安全。     

建立一种兔耳增生性瘢痕的动物模型

目的　建立由动物自身产生的与人增生性瘢痕类似的增生性动物模型。方法　选用2 4只新西兰大耳白兔 ,分别在兔耳腹侧、背侧面作直径 1.5cm的全层皮肤缺损各 14 4个、72个 ,对创面愈合后形成的增生块进行组织病理学、层黏连蛋白 (LN)mRNA及整合素 β1mRNA检测等检查。结果　兔耳腹侧创面可产生类似人增生性瘢痕样的过度增生 ,其发生率为 71% ,以兔耳腹侧面中部为著 ,增生块最长持续时间超过伤口愈合后 15 0d ,而兔耳背侧面的创面增生块发生率不到3 0 % ,且增生块持续时间短 ,为 76d。切片镜下显示 ,增生块的真皮层存在大量成纤维细胞 ,与人增生性瘢痕结构类似。结论　兔耳腹侧面尤其腹侧面的中部可产生类似人增生性瘢痕样病理改变 ,可望成为研究瘢痕的动物模型。     

不同年龄人真皮多能干细胞的分离及体外分化特点

目的研究不同年龄人真皮多能干细胞的分离、鉴定及体外分化特点。方法切取胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤标本（1cm×1cm），采用干细胞培养基筛选原代细胞克隆并记录其数量和直径；检测各种标本来源细胞克隆的体外分化情况；行单个细胞克隆分化分析，并检测其相关蛋白的表达。结果胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤原代培养获得的细胞克隆数分别为（20．1±2．5）×10^2、（15．8±5．7）×10^2、（10．8±1．3）×10^2、（6．2±1．4）×10^2个，两两比较，差异有统计学意义（P＜0．01）；克隆直径分别为（83±12）、（55±10）、（46±12）、（42±8）μm，胎儿＞患儿＞中青年及老年患者（P＜0．05）。各种细胞克隆均能向神经元细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞分化，其中胎儿来源的细胞克隆有向神经元细胞分化的优势。培养1个月，胎儿、患儿、中青年患者、老年患者单个细胞克隆形成率依次为41．1％、25．5％、17．7％、15．2％；单个细胞克隆亦能同上多向分化，同时表达巢蛋白、纤维连接蛋白、原癌基因c-mye、信号转导和转录激活因子3、端粒体逆转录酶。结论采用干细胞培养基能够有效分离不同年龄人真皮中具有克隆增殖和多向分化潜能的干细胞，年龄对其的数量、增殖和分化有明显影响。     

解毒烧伤膏对深Ⅱ度烫伤创面愈合中白细胞介素8、10表达的影响

解毒烧伤膏能不同程度地促进浅Ⅱ、深Ⅱ度烧伤和残余创面的愈合，无明显不良反应。为进一步探讨其在促进创面愈合过程中的分子机制，笔进行了下述实验。