白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究

目的 探讨抑癌基因PTEN表达沉默的机制及诱导PTEN表达对白血病细胞的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)检测白血病细胞系HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937、NB4、K562中PTEN基因启动子区域甲基化状态;用甲基化转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理白血病细胞,MSP检测甲基化状态的改变、RT-PCR检测PTEN mRNA水平的改变、瑞特染色观察细胞形态学改变、膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)标记染色检测细胞凋亡.结果 检测的白血病细胞系中HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937细胞PTEN基因显示超甲基化状态,而NB4和K562细胞显示低甲基化状态;5-Aza-CdR处理HL-60和Nalm-6细胞后,PTEN基因甲基化降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖性,细胞出现凋亡现象.结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活或沉默,甲基化抑制剂可以诱导PTEN表达,并引起白血病细胞凋亡.     

定量RT-PCR方法检测衰老大鼠肾脏PAI-1基因的表达

目的采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREENⅠ)定量PCR法,对来源珍贵的微量组织中的基因进行检测,并对其可行性及适用性进行研究. 方法取24月龄的老年大鼠、3月龄青年大鼠各6只,提取其肾脏组织的RNA, 采用SYBR GREEN I实时检测的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测纤溶酶系活化剂抑制物-1(PAI-1)基因的表达,并用磷酸甘油醛脱氢酶(G3PDH)作为外参. 结果标准曲线有良好的相关性(R2>0.99),PCR产物特异,将PAI-1的拷贝数与G3PDH的拷贝数相除,青年大鼠肾脏PAI-1表达水平为(1.27±0.90)×10-3,老年大鼠肾脏PAI-1表达水平为(3.84±2.00)×10-3,两者比较,差异有显著性(P<0.05). 结论只要严格控制PCR反应条件,SYBR GREENⅠ定量PCR法可以作为一种良好的定量PCR方法对来源珍贵的微量组织的基因表达进行检测,并证实了老年大鼠肾脏PAI-1表达水平明显增加.     

重组人骨保护素抑制破骨细胞及促进羟磷灰石修复去势大鼠下颌骨缺损的研究

目的 探讨转染人骨保护素（hOPG）基因的大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）复合羟磷灰石（HA）支架对去势大鼠下颌骨缺损的修复作用。方法 将重组腺病毒pDC316-hOPG-EGFP转染rBMSCs,蛋白质印迹法和骨磨片试验分别检测hOPG的表达水平和抑制破骨细胞功能;构建骨质疏松大鼠模型,分别将HA支架、未转染rBMSCs复合HA支架、转染rBMSCs复合HA支架植入大鼠下颌骨骨缺损,6周后通过抗酒石酸酸性磷酸酶、苏木精-伊红染色检测骨缺损区破骨细胞及骨修复情况。结果 体外携载有hOPG基因的腺病毒成功转染rBMSCs,转染后的rBMSCs表达具有抑制破骨细胞活性功能的hOPG;表达hOPG的rBMSCs复合HA支架后骨缺损处破骨细胞明显减少,成骨增多。结论 转染hOPG基因的rBMSCs在体内外均具有抑制破骨细胞功能的作用,且转染rBMSCs复合HA支架可促进骨质疏松大鼠的下颌骨缺损修复。     

腹腔镜胆囊切除术中肝中静脉及其属支误伤出血的防范及处理

目的探讨腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)中肝中静脉及其属支误伤出血的预防和处理方法。方法对我院2008年1月至2010年1月期间27例行LC时肝中静脉及其属支损伤破裂出血患者的临床资料进行回顾性分析。结果 27例患者均在腹腔镜下止血成功,其中17例通过腹腔镜下填塞压迫止血,6例通过腹腔镜下钛夹钳夹止血,4例通过腹腔镜下缝扎止血。3种止血方法中以腹腔镜下填塞压迫止血法的手术时间最短、术中出血量最少,分别为(90.26±12.46)min和(240.32±80.15)ml,但3种止血方法的手术时间及术中出血量之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LC中要尽量在正确的层次分离胆囊床,以减少肝中静脉及其属支的损伤。采取正确的止血措施或止血困难时及时中转开腹,对安全完成手术至关重要。     

经支气管镜刷检和灌洗液检查对肺结核的诊断价值

目的探讨电子支气管镜检查对肺结核的诊断价值。方法对99例肺结核患者治疗前的电子支气管镜检查结果进行回顾性分析,计算刷检、灌洗液检查及刷检+灌洗液的三种不同取材方法检出的抗酸菌阳性率。结果刷检涂片、灌洗液涂片及刷检涂片+灌洗液涂片找出抗酸杆菌的阳性率分别为56.10%(46/82)、64.63%(53/82)、76.25%(61/80),刷检加灌洗组优于其他两组,差异有统计学意义(P0.05)。结论电子支气管镜检查对肺结核的确诊具有重要的临床应用价值,联合刷检和灌洗液两种取材方法可提高肺结核的诊断率。     

广西部分医院相关科室医师对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征知识掌握情况和态度调查分析

目的了解广西部分医院相关科室医师对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）知识的培训、掌握情况及对此病的重视程度。方法制作OSAHS知识问卷调查表（OSAKA）。内容包括答卷人基本情况、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征知识、对OSAHS的重视程度等共30条。调查对象主要为广西二、三级医院内科、儿科、耳鼻喉科、口腔科医护人员。结果共调查广西28家医院医护人员1 569人,其中医师811人,收回医师问卷调查表755份（应答率93%）。对OSAHS知识有了解的医师为65.7%;接受过OSAHS知识培训的医师为27.8%;18条OSAHS知识题（每题回答正确得1分）平均得分（11.51±4.15）分。结论广西相关科室医师接受OSAHS知识的培训率较低,对OSAHS的流行病学特点、发病机制、诊断、治疗及治疗副作用认识不足。半数左右的受调查医师对诊断治疗OSAHS缺乏信心。必须通过各种方式尽快提高各相关专业人员OSAHS知识水平。     

HPLC法测定消石胶囊中橙皮苷的含量

目的建立消石胶囊中橙皮苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasi15umC_(18)柱(4.6mm×250mm,5um),流动相为0.1%磷酸—乙腈(78:22),流速为1.Oml·min~(-1),检测波长为283nm。结果橙皮甙进样量在0.30～2.0ug 的范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关数为0.9998。平均回收率为98.51%;RSD 为1.07%。结论本方法简便快速,分离度好,结果准确可靠。     

气管、支气管成形术治疗胸部疾患25例报告

1975年8月至1982年5月,共行气管、支气管成形术25例。肺癌18例,其它疾患7例。手术方式有全肺加半隆突切除、肺叶加袖状或楔状切除,单纯支气管袖状或楔状切除。最长切除5厘米,平均2厘米。18例肺癌中5例存活3年,1例7年。全部病例均在术中做冰冻切片,检查气管切缘,以免癌残留。本法可最大限度切除病变,保留健肺,值得推广。     

平衡针灸配合自主功能锻炼治疗肩周炎临床体会

目的：探讨平衡针灸配合自主功能锻炼治疗肩周炎的临床效果。方法：选取肩周炎患者56例,采用随机数字表法分为对照组和治疗组各28例。对照组采用平衡针灸治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用自主功能锻炼治疗。比较两组患者临床治疗总有效率、治疗前后视觉模拟评分（VAS）分级情况等。结果：对照组和治疗组总有效率分别为71．4％,92．9％,治疗组总有效率明显高于对照组,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;两组患者治疗前VAS评分评级情况组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;两组患者治疗后VAS评分评级情况均明显优于治疗前,且治疗组患者VAS评分评级情况改善程度均明显优于对照组,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：平衡针灸配合自主功能锻炼治疗肩周炎临床效果明显优于单独采用平衡针灸治疗,可有效缓解疼痛,恢复肩周关节活动功能,改善生活质量。     

集束化护理干预对恶性肿瘤患者的影响研究

目的：探讨集束化护理干预对恶性肿瘤患者的影响.方法：选择2011年1 ～12月在我院住院的恶性肿瘤患者200例,随机分为观察组和对照组各100例,对照组按照常规进行护理,观察组患者增加集束化护理干预项目,比较两组患者干预前后焦虑和睡眠质量以及社会支持能力方面的差异.结果：经过集束化护理干预,观察组患者利用社会支持高于对照组,焦虑水平低于对照组,睡眠质量优于对照组（均P＜0.05）.结论：集束化护理干预对于恶性肿瘤患者有积极作用,可以降低其焦虑水平,提高其睡眠质量.