宫颈癌多阶段多途径演进的树模型构建

目的基于宫颈癌比较基因组杂交资料构建宫颈癌的树模型,探讨宫颈癌发展演进的多途径模式。方法根据收集的58例宫颈癌完整比较基因组杂交资料,利用Desper等建立的肿瘤树模型软件平台,构建宫颈癌的树模型。结果宫颈癌树模型提示,有6个非随机的染色体扩增或者缺失事件发生在宫颈癌变过程中: 1q, 3q, 5p, 17q, 20q和 20p,其中 3q和 1q可能是宫颈癌癌变中的重要早期事件; 3q要先于 17q发生,并且两者之间可能存在先后依存关系;而且, 1q可能是一个相对独立发生的事件;这些扩增染色体上可能存在与宫颈癌发生、发展演进密切相关的瘤基因。结论基于比较基因组杂交资料构建的宫颈癌树模型,提示宫颈癌多阶段、多途径的发展演进模式,也为后续宫颈癌相关基因的探索指明了方向。     

后纵裂入路切除侧脑室三角区肿瘤的解剖学

目的 通过解剖学研究,探索顶枕部注入上矢状窦桥静脉的分布规律,比较各种至侧脑室三角区的经纵裂入路在外侧方向暴露范围,为临床设计、选择和改良手术入路提供解剖学依据。 方法 取4%甲醛固定、乳胶灌注动静脉血管的国人头颅标本5具,开颅并保留人字缝作为测量标志,观察后囟点前后桥静脉的分布情况,总结顶枕部桥静脉在后囟点前、后的分布规律。取4%甲醛固定、乳胶灌注的国人头颅标本5具,导航辅助下模拟同侧和对侧的经胼胝体、经扣带回、经楔前叶入路共6种手术入路的手术路径,以导航棒模拟手术视线,以导航棒与正中矢状面所成的角度代表手术入路在外侧方向的暴露范围,记录、计算各入路在外侧方向的暴露范围,并相互比较。 结果 没有桥静脉于后囟点和窦汇之间注入上矢状窦。在后囟点前方距离为s（s代表后囟点到窦汇的距离）的范围内注入上矢状窦的桥静脉,平均每个标本左侧有（1.4±0.5）条,右侧（1.6±0.5）条,双侧共（3.0±0.6）条。在同侧入路中,外侧方向的暴露范围经胼胝体入路＜经扣带回入路＜经楔前叶入路;对侧入路与同侧入路相同,暴露范围经胼胝体入路＜经扣带回入路＜经楔前叶入路。在切开脑组织位置相同的同侧和对侧入路中,外侧方向暴露范围同侧入路＜对侧入路。所有比较结果差异均具有统计学意义。 结论 顶枕部桥静脉集中分布在后囟点之前,后纵裂入路采用人字缝后方开颅较其前方更为安全。在经纵裂入路中,向外侧方向的暴露,经楔前叶入路优于经扣带回入路、优于经胼胝体入路,对侧入路优于同侧入路;对侧入路有利于保证导航准确性。对侧后纵裂经大脑镰经楔前叶（CITT）入路在功能保护、增加外侧方向暴露、保证导航准确性等方面有一定优势。     

可视化人鼻咽癌细胞模型5-8F-EGFP的建立

目的:利用pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,建立稳定表达绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP,为整体鼻咽癌可视化研究提供良好的试验材料.方法:利用脂质体转染法,将pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,通过G418抗性筛选、亚克隆扩增获得GFP稳定表达的人鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP.结果:成功获得稳定表达GFP的人鼻咽癌细胞5-8F-EGFP细胞株,比较5-8F和5-8F-EGFP发现,两者生长曲线、细胞周期分布、裸鼠成瘤能力等都没有显著性差异.结论:我们建立了非G418依赖、稳定表达GFP且保持母株细胞特性的人鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP,为鼻咽癌整体可视化研究打下了坚实基础.     

应用神经内镜Endoport技术切除侧脑室肿瘤

目的:分析采用神经内镜Endoport技术切除侧脑室肿瘤的临床应用效果.方法:回顾性分析采用神经内镜Endoport技术治疗的5例侧脑室肿瘤患者的临床资料,其中肿瘤位于侧脑室额角1例、室间孔区1例、三角区3例,分析该技术的疗效.结果:5例肿瘤均全切除.术后病理结果示脑膜瘤3例,毛细胞星形细胞瘤1例,室管膜下巨细胞星形细...     

非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响

目的:研究非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响.方法:收集100例非小细胞肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常组织,检测αVβ3的表达情况;培养肺癌细胞株A549,采用siRNA转染的方式敲低αVβ3的表达,而后检测促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达情况.结果:(1)肺癌组织中αVβ3的mRNA和蛋白含量均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)促增殖和抗凋亡基因:处理组细胞Bcl 2、Notch1、Cyclin E的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)侵入和血管新生基因:处理组细胞VEGF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:非小细胞肺癌组织中αVβ3表达量升高;siRNA敲低αVβ3表达后,可以抑制肺癌细胞株A549中促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达.     

Q-RT-PCR检测LAMC2、KLK6、SNCG在鼻咽癌肝转移细胞中的表达

目的检测LAMC2、KLK6、SNCG等3个基因在鼻咽癌细胞株5-8F-EGFR和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFR中的表达情况,分析这些基因在鼻咽癌肝转移过程中所起的作用。方法采用基于SYBR GREENⅠ法的实时荧光定量RT-PCR（Q-RT-PCR）检测5-8F-EGFR和5-8F-H3B-EGFR中LAMC2、KLK6、SNCG等3个基因的表达情况。结论 LAMC2、KLK6、SNCG等3个基因在5-8F-H3B-EGFR中表达均上调,且与5-8F-EGFR比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 Q-RT-PCR能够敏感、特异地检测出5-8F-EGFR和5-8F-H3B-EGFR中mRNA的表达差异,方法准确可靠,操作方便;LAMC2、KLK6、SNCG有可能成为判断鼻咽癌肝转移的潜在分子标志物。     

CCR7基因rs3136685多态性与中国北方汉族人群冠心病的关系

目的 探讨趋化因子CCR7基因单核苷酸多态位点rs3136685多态性与中国北方汉族人群冠心病的关系.方法 连续收集2010年3月—2011年12月沈阳军区总医院心内科住院患者578例,其中病例组(经冠状动脉造影证实一支或多支血管狭窄50％以上)287例,对照组(冠状动脉造影正常且没有其他粥样硬化证据)291例.冠心病组根据血管病变支数分为3个亚组:单只病变组(n=104),双支病变组(n=89)和3支病变组(n=94).提取患者血液白细胞基因DNA,采用直接测序法测定趋化因子CCR7基因rs3136685单核苷酸多态位点的基因型,并进行基因型和等位基因与冠心病及冠心病病变程度的相关性分析.结果 CCR7基因rs3136685单核苷酸多态性共检测到3种基因型,即GG型、AG型和AA型,在病例组的分布频率分别为42.9％、45.6％、11.5％,在对照组分别为43.0％、44.3％、12.7％,两组基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律,3种基因型在两组间的分布差异无统计学意义(P＞0.05).A等位基因在病例组及对照组的分布频率分别为34.3％、34.9％,差异亦无统计学意义(P＞0.05).亚组分析显示,CCR7基因rs3136685单核苷酸多态性的基因型和等位基因频率在单支病变、双支病变及3支病变3个亚组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CCR7基因rs3136685单核苷酸多态性与中国北方汉族人群冠心病的发病及疾病严重程度可能无相关关系.     

乙醇大剂量快速干预对急性肝衰竭小鼠预后的影响及机制

目的探讨乙醇大剂量快速干预对急性肝衰竭小鼠的保护作用及机制。方法采用D-氨基半乳糖/细菌脂多糖（GalN/LPS）诱导制作急性肝衰竭小鼠模型。制模前30 min予乙醇大剂量（4g/kg）快速（一次性腹腔注射）干预,制模后1、8 h采集血清和肝脏样本,测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、谷丙转氨酶（ALT）;肝组织切片HE染色观察肝衰竭,实时反转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）分析肝组织中5个促炎症细胞因子基因表达。结果乙醇干预后TNF-α、ALT水平明显降低,肝组织损伤程度减轻,炎症细胞因子TNF-α、MIP-2、mKC、IL-1β在肝脏的基因表达水平明显降低。结论乙醇可降低D-氨基半乳糖/细菌脂多糖诱导的急性肝衰竭小鼠的死亡率以及肝衰竭程度。其机制可能为抑制TNF-α等促炎因子水平。     

可视化鼻咽癌细胞模型CNE2-EGFP的建立

目的利用pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,建立稳定表达绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为整体鼻咽癌可视化研究提供良好的试验材料。方法利用脂质体转染法,将pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,通过G418抗性筛选、亚克隆扩增获得GFP稳定表达的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP。结果成功获得多个稳定表达GFP的人鼻咽癌细胞CNE2-EGFP细胞株,比较CNE2和CNE2-EGFP发现,两者生长曲线、细胞周期分布、裸鼠成瘤能力等均无显著性差异。结论建立了非G418依赖、稳定表达GFP且保持母株细胞特性的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为鼻咽癌整体可视化研究打下了坚实的基础。