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81.
含有海肾萤光素酶报告基因的登革4型病毒亚基因组复制子的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建含有海肾萤光素酶(Renilla luciferase, R.luc)报告基因的登革4型病毒亚基因组复制子,为探讨病毒基因组中保守序列和元件在复制和翻译调控机制中的作用提供新的手段.方法:利用定点诱变PCR技术构建prM-E基因缺失的登革4型病毒亚基因组复制子(DENRP),用顺式水解酶元件(cis-acting hydrolase element,CHYSEL)技术将R.luc报告基因插入到DENRP缺失的结构基因区,构建含有R.luc报告基因的复制子(DEN-R.luc2A-RP).将构建的复制子线性化并体外转录成RNA后,经电穿孔转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光、RT-PCR和R.luc检测技术对复制子进行鉴定.结果:所构建的prM-E基因缺失的复制子和含有海肾萤光素酶报告基因的复制子,均可在BHK-21细胞中自主复制并稳定表达病毒特异蛋白.DEN-R.luc2A-RP可持续表达外源R.luc报告基因21 d,在转染后24~96 h R.luc荧光信号呈线性增强.在该区间进行实时检测可显示复制子复制和翻译水平的变化.结论:获得了两株可在BHK-21细胞中稳定表达的复制子,为进一步研究登革4型病毒复制和翻译机制奠定了基础. 相似文献
82.
登革4型病毒基因组cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨登革4型病毒C基因中保守的cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用.方法:首先在获得含有海肾荧光素酶(Renilla luciferase, R.luc)报告基因的复制子(DEN-R.luc2A-RP)基础上,利用重叠PCR构建cHP发卡结构系列突变体(cHP1~cHP6).将构建的突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞.通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R.luc报告基因检测技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译进行检测.结果:cHP发卡结构系列突变体均可在BHK-21细胞中复制并稳定表达病毒特异蛋白,在该发卡结构中引入缺失或突变对病毒早期翻译并无显著影响,但病毒RNA复制均显著下调.结论:cHP发卡结构在基因组RNA复制过程中可能具有重要的调控作用. 相似文献
83.
84.
穿刺活检报告高分级前列腺上皮内瘤的诊治 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨前列腺穿刺活检报告为高分级前列腺上皮内瘤(HGPIN)病例的临床诊断和治疗措施。方法记录分析了7例首诊穿刺活检报告为HGPIN的患者资料并对该组所有患者进行规律随访,随访时间18~43个月。随访内容包括血PSA检测以及增加针数的10点前列腺穿刺。对随访中发现前列腺癌的病例实施根治手术治疗,对高度怀疑前列腺癌病例给与放射治疗,治疗后均作随访。结果7例患者中,1例患者于首诊时行前列腺癌根治术,术后标本病理仅报告HGPIN。3例随访29~43个月,未发现前列腺癌存在的证据,而未行特殊治疗。在随访过程中,2例证实前列腺癌而行前列腺癌根治术,术后分别随访24个月和36个月,均健在;1例行前列腺放射治疗,术后随访30个月健在,血PSA逐渐下降。结论HGPIN是前列腺癌的癌前病变,前列腺穿刺活检报告HGPIN的患者应给与严密随访。根据随访中血PSA和前列腺穿刺结果,必要时采取针对前列腺癌的治疗干预措施,以争取较好的预后。 相似文献
85.
86.
刘然 《现代电生理学杂志》2004,11(4):242-242
第三节 症状问诊 Section 3 Interrogation of the symptoms Section 3 Interrogation sur les symptfmes 皮肤 skin La peau 1.您有皮疹吗? Do you have rashes? Avez-vous des boutons? 2.是的,我有皮疹。 Yes.I have rashes. Oui,jai des boutons. 3.您这里发痒吗? Do you have any itching here? Avez-vous des demangeaisons ici. 相似文献
87.
目的:系统评价产后尿失禁病人患病体验的质性研究,了解产后尿失禁病人的感受及需求,为医护人员进行个性化的临床治疗提供参考依据。方法:检索the Cochrane Library、PubMed、Web of Science、EMbase、CINAHL、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库、维普数据库等中英文数据库,检索时限从建库至2022年4月。使用《澳大利亚Joanna Briggs Institute循证卫生保健中心质性研究质量评价标准(2017)》进行文献质量评价,运用汇集性整合方法进行结果整合。结果:共纳入5篇文献,提炼出37个研究结果,整合出因疾病产生的负面体验、存在疾病感知障碍及渴望得到各种支持2个主题。结论:医护人员应积极改善病人对疾病的认知,提供专业知识指导,重视产后女性的患病体验感及情感需求等,充分利用各种心理护理措施,促进病人的求医行为及增强病人治疗的信心,提升病人的生活质量。 相似文献
88.
89.
目的 研究住院2型糖尿病合并阻塞性睡眠呼吸暂停征(OSAS)患者肾脏合并症情况.方法 收集符合条件的2型糖尿病患者,记录年龄、病程、体重指数、腰围、血压等指标,使用便携式睡眠呼吸监测仪进行睡眠呼吸监测,同时完善糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2小时血糖、肌酐、尿素氮、24小时尿微量白蛋白及尿蛋白检验,并计算肾小球滤过率.结果完成研究106例,71例合并OSAS.合并OSAS的患者肌酐(64.49±15.72μmol/L vs 57.28±8.69μmol/L,P<0.05)、尿素氮(5.04±0.61mmol/L vs 4.71±0.64mmol/L,P<0.05)、24小时尿微量白蛋白[25.30(12.64,68.70)mg vs 8.74(4.8,16.24)mg,P<0.05]及24小时尿蛋白[0.24(0.1,1.45)g vs 0.15(0.06,0.26)g,P<0.05]高于未合并OSAS患者,合并OSAS患者肾小球滤过率(89.83±13.97mL·min-1·1.73m-2 vs 102.88±8.02mL·min-1·1.73m-2,P<0.05)偏低.合并OSAS的患者中,出现Ⅲ期以上糖尿病肾病比未合并OSAS的患者更多见(53.5%vs46.5%,P<0.05).采用多因素logistics回归分析后发现,糖化血红蛋白(OR1.36,95% CI 1.01~1.07,P<0.05),空腹血糖(OR 1.01,95%CI 0.73~1.16,P<0.05)及每小时睡眠呼吸暂停次数(AHI)(OR 1.11,95%CI 1.00~1.23,P<0.05)与Ⅲ期以上糖尿病肾病患病独立相关.结论 合并OSAS的2型糖尿病患者肾脏功能下降更明显,更容易出现肾脏并发症,OSAS是糖尿病肾脏病变的独立危险因素. 相似文献
90.
人民网科技济南6月21日电 "中药方面我们提一点儿瓶颈的问题",全国人大常委会副委员长桑国卫在刚刚结束的第四届中国生物产业大会高层论坛中发表的题为"我国创新药物发展战略和现状"的报告中表示,“(中药)标准化的质量是非常重要的,另外临床前评价、临床评价技术体系和中药的安全性问题也要引起我们的重视。” 相似文献