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目的:获得人源性乙型肝炎病毒抗HBs轻链基因.方法:从已构建的人源性噬菌体抗体库中,用固相化HBs/Ag对构建的人源性噬菌体抗体库进行三轮淘筛,经ELISA实验,筛选到抗HBs噬菌体抗体(P/N:2.415)的阳性克隆,根据已知序列合成一对轻链引物,进行PCR扩增,扩增出轻链目的基因片段,将目的基因片段定向克隆入质粒pUC18,进行序列测定及分析.结果:筛选出的克隆具有HBsAg特异性亲和力,构建了pUCl8-抗HBsk链重组质粒,序列分析其为κ链,为643bp包括了可变区和恒定区.结论:利用抗原抗体特异性反应从噬菌体抗体库中筛选到抗HBs轻链基因. 相似文献
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空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)基因工程疫苗外周神经安全性的实验研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 以空肠弯曲菌(campylobacter jejuni,CJ)菌体全抗原为对照,以基因重组的该菌融合黏附蛋白(TrxA/PEB1)作为CJ疫苗免疫大鼠,并对其神经安全性进行实验性评价。方法分别以纯化的TrxA/PEB1和CJ Pen19菌体全抗原经全身免疫增强法免疫大鼠,初次免疫后第2、4、5周采用ELISA法动态观察抗体滴度,并分别于第3、5周分离坐骨神经原纤维及行甲苯胺蓝染色光镜观察。采用ELISA法检测第5周抗血清与GM1抗原的结合反应。神经外膜下注射抗TrxA/PEB1和抗CJ全菌抗原的特异性抗血清,观察其神经病理学改变。结果 (1)经两种抗原免疫后,大鼠均产生高滴度特异性IgG,且各自与两种抗原发生交叉反应I(2)以CJPen19全抗原免疫后抗血清可与GM1抗原结合,而TrxA/I)EBI免疫者则否,(3)CJPenl9免疫组有60%大鼠坐骨神经出现以轴索变性为主的免疫性损伤。而TrxA/PEB]融合蛋白免疫者则未发生;(4)CJ Pen19免疫血清神经外膜下注射后全部大鼠均发生轴索变性为主的病变。且75%为显著病变,而TrxA/PEB1免疫血清外膜下注射后却未引起明显病变。结论CJ Pen19全菌抗原和。TrxA/PEB1纯化蛋白作为免疫原均可激发大鼠有效体液免疫应答,但与CJ全菌抗原相比,TrxA/PEB1蛋白所产生的全身免疫反应未引起周围神经损伤,其抗血清不含针对GMl抗原的抗体,对外周神经元免疫损伤作用。据此可认为TrxA/PEB1作为CJ疫苗安全可靠。 相似文献
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空肠弯曲菌粘附蛋白PEB1的克隆表达及免疫保护性初步探索 总被引:6,自引:0,他引:6
空肠弯曲菌 (Campylobacterjejuni,Cj)已成为近年引起腹泻最常见病原 ,而其某些菌株更被证实是诱发格林 巴利综合征 (GBS)的最主要前驱感染因子。Cj的可溶性蛋白 (PEB1)是该菌侵袭肠道的重要致病因子 ,其抗原性在各个菌株间相对保守〔1〕,使它可望成为Cj疫苗候选抗原成分。材料和方法菌株和质粒 :空肠弯曲菌 5个血清型共 7个菌株 ,包括血清型PennerO∶2 ,PennerO∶19各 2株 ,每种血清型包含标准株和自GBS患者分离菌株各 1株。其它为血清型PennerO∶4、O∶8和O∶2 1各 1株。转化菌JM10 9、宿主菌BL2 1(DE3)及表达质粒pET32a(+ )… 相似文献
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肝细胞移植的新进展及存在的问题 总被引:3,自引:2,他引:1
自 70年代末发展起来的肝细胞移植技术 ,早期仅作为肝脏先天性酶缺乏症和血液系统疾病及急、慢性肝衰竭的治疗方法之一 ;肝基因治疗出现后 ,它又成为肝基因治疗的重要手段。一些研究者认为 :体外培养的和体内移植的肝细胞均能产生一种刺激受损肝细胞再生的物质。这种物质能直接刺激肝脏的再生 ,增强受体对肝功能衰竭的耐受力 ;或刺激其他器官和网状内皮系统 ,能够对代谢和激素的分泌调节产生一种特殊的影响 ,可以增强受体对肝功能衰竭的耐受力 ,植入的肝细胞与其分泌的特殊物质共同在受体内发挥作用。现就肝细胞移植的研究现状及最新进展综… 相似文献
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